Малышу 9 месяцев | Friso Russia

Малышу 9 месяцев: РАЗВИТИЕ

К 9-ти месяцам в развитии малыша происходят значительные перемены. Он уже умеет сидеть без поддержки, сам вставать на ножки, может даже делать свои первые шаги, держась за опору. Его пассивный словарный запас существенно расширяется, и он понимает практически все, что говорят взрослые. Мышление крохи становится логическим, и если раньше он совершал многие действия спонтанно, то теперь придает им конкретное значение. Все это означает, что малыш приобретает новые возможности для познания мира. В этом возрасте ребенку интересно все, и ваша задача – максимально обезопасить и в то же время разнообразить его исследования.

Развитие движений

Ваш малыш начал вставать, и вот он уже пытается сделать первые шаги — правда, пока еще с помощью ходунков или другой опоры. Чтобы пробудить в нем желание двигаться дальше, поставьте чуть в отдалении от него яркую игрушку. Когда малыш дотянется до нее, подвиньте ее поближе и рассмотрите вместе.

С каждым разом увеличивайте расстояние от игрушки до ребенка.

Также для развития координации и укрепления мышц можно устроить веселые танцы: включите музыку, возьмите малыша за ручки и начните танцевать – ребенок начнет повторять ваши движения, делая пружинящие движения ногами.

Действия с предметами

Как настоящий ученый, малыш изучает свойства вещей и получает представление о форме, текстуре и размере. Предложите ему поиграть одновременно с несколькими вещами, чтобы он мог увидеть между ними различия: одни предметы могут катиться, а другие переворачиваются, одни игрушки гладкие, другие шероховатые. Особенно привлекают его вещи, которые он часто видит в ваших руках. Чтобы расширить кругозор ребенка, дайте ему возможность поиграть с безопасными предметами быта: ложками, маленькими кастрюльками с небьющимися крышками, деревянными лопатками. Любимой игрушкой в этом возрасте часто становится пластмассовая посуда: тарелочки можно собирать в стопочки, класть в большую по размеру кастрюльку, закрывать крышечкой… Такие действия расширяют представления ребенка о пустом и заполненном пространстве.

Развитие слуха

Ребенок уже узнает голоса близких людей, даже если они находятся в соседней комнате и он их не видит. Теперь ваша задача – научить его распознавать звуки, издаваемые обычными предметами. Сделайте из одеяльца небольшую ширму, возьмите две деревянные ложки и постучите ими под ширмой так, чтобы малыш слышал звук, но не видел предметы у вас в руках. Затем достаньте ложки, покажите их крохе и дайте ему возможность самому постучать ими друг о друга. Повторите игру еще раз, но уже с металлическими ложками, чтобы малыш запомнил разницу в звучании.

Развитие речи

В общении с ребенком чаще используйте звукоподражательные слова, наглядно показывайте ситуации, где они уместны. Например, разыграйте для малыша небольшой спектакль с куклой: вот кукла идет по кроватке: топ-топ, вот кукла упала: бух!, вот кукла поет: ля-ля-ля. Повторяйте такие звукоподражательные в каждой ситуации, которая возникает с ребенком: купание – буль-буль, кормление – ам-ам, падение – бо-бо.

Вскоре такие слова появятся и в «лексиконе» малыша. 

Малышу 9 месяцев: ФИЗИОЛОГИЯ И ПСИХОЛОГИЯ

В 9 месяцев малыш уже радует родителей первыми шагами. Неутомимый исследователь уже может дотянуться до предметов, находящихся на уровне его роста, поэтому родителям нужно быть очень внимательными. Сделайте свою квартиру безопасной, но интересной для малыша. Посмотрите на мир его глазами и постарайтесь предложить ему полезные и увлекательные занятия.

Рост и вес

В 9 месяцев рост малыша составляет 71-74 см, вес – 8600-9900 г.

Движения

Ребенок в 9 месяцев активно ползает, самостоятельно встает на ножки и, держась за руку взрослого, ходит приставным или чередующим шагом. Некоторые детки в 9 месяцев уже могут стоять без опоры и без поддержки, но непродолжительное время, поскольку мышцы еще недостаточно развиты. Зато многие малыши с удовольствием передвигаются в ходунках или держась за детскую каталку.

Действия с предметами

Играя с различными предметами, ребенок в основном подражает действиям взрослого.

Теперь он может выполнять гораздо более сложные действия, чем раньше: снимать и нанизывать кольца на стержень, вкладывать маленькие предметы в большие, собирать матрешки. Еще месяц назад он изучал все игрушки по очень похожей схеме (достать , взять в рот, потрясти или постучать, кинуть), а сейчас каждый предмет приобретает для него особые свойства. Если перед малышом мяч, то он катает его по полу, если кубик, то он кладет его на другой кубик, а если игрушка с кнопкой, то он на нее нажимает и ждет определенного эффекта. Игры ребенка становятся целенаправленными, он как бы предвидит, что может получиться в результате его действий. Это – важный этап в развитии мышления крохи.

Понимание речи

К 9-ти месяцев ребенок существенно обогащает свой пассивный словарь, запоминает имена близких, названия домашних животных и предметов обихода. Если вы попросите его принести игрушку, произнеся лишь ее название, но не указывая на нее пальцем, малыш вас поймет и принесет нужную вещь. Также ребенок хорошо понимает звукоподражания: буль-буль, бо-бо, топ-топ, и сам пытается их повторять.

Активная речь

Малыш внимательно следит за вашей артикуляцией и повторяет за вами новые слоги. Его лепет становится более разнообразным, а восклицания – эмоционально насыщенными. Теперь его лепет соотносится с конкретными ситуациями, и близкие уже могут его понимать.

Эмоции

К 9-му месяцу у ребенка формируются устойчивые привязанности к близким людям. Он призывает вас принять участие в его играх, протягивает вам игрушку, указывает на заинтересовавший его предмет, словно желая поделиться своим открытием. Малыш включает в общение все доступные ему средства: мимику, жесты, улыбку, лепет. Он прислушивается к вашим ответам и в своих действиях ориентируется на вашу оценку. Старайтесь стать для малыша примером для подражания, ведь уже сейчас закладывается характер крохи.

 

 

 

Малышу 7 месяцев | Friso Russia

Малышу 7 месяцев: РАЗВИТИЕ

Семь месяцев – это замечательный этап в развитии малыша.

Теперь он может самостоятельно сидеть и ползать, а значит, мир открывается для него в совершенно новом свете. Стремительно развивается и интеллект малыша. Он уже умеет решать простые бытовые задачи, а если у него что-то не получается, то он настойчиво требует помощи близких: мамы, папы, братика или сестрички. Занятия с крохой теперь становятся еще насыщеннее и интереснее!

Изучаем окружающие предметы

Малыш сосредотачивает своё внимание на мире предметов. Он уже понимает, что может совершать с ними определённые действия: сдавливать, растягивать, извлекать звуки… Ваша задача – расширить представление малыша об окружающем мире и показать ему специфические свойства предметов. Обратите внимание крохи, что круглые игрушки можно катать, квадратные – ставить друг на друга, резиновые – сжимать в руках, а деревянные – ударять друг об друга. Покажите малышу, как играет старший ребёнок – это будет для него лучшим примером. Вместе с крохой проводите весёлые «эксперименты»: сначала подбросьте пластмассовый шарик – он издаст звонкий звук и, часто подпрыгивая, покатится по полу; следом бросьте большой резиновый мячик – он издаст более глухой звук и подпрыгнет только один-два раза; затем подбросьте погремушку – она с грохотом упадёт и останется лежать на полу.

Таким образом, ребёнок сможет изучить свойства предметов в сравнении.

Учите кроху находить отличия и в близких по форме предметах. Для этого давайте ему лёгкие и более тяжёлые игрушки, тугие и более гибкие резиновые кольца, деревянные погремушки, издающие мягкий звук, и пластмассовые с резким перестуком наполнителя. Подобные действия помогут крохе разносторонне познавать мир, и уже в раннем возрасте вы сможете развить в нём наблюдательность и внимательность.

Игры и игрушки

В семь месяцев у малыша появляются свои предпочтения, чётко выделяются любимые игрушки и занятия. Особенно кроху привлекает всё, на что можно нажимать: детские развивающие центры с кнопками, игрушечные телефоны. Научившись ползать, малыш может претендовать на игрушки старшего ребёнка. Старайтесь избегать таких ситуаций, отвлекая кроху на другие занятия.

Можно купить малышу музыкальный пульт с цветными кнопками, при нажатии на которые начинают играть простые мелодии. В 7 месяцев ребёнок очень музыкален, он с удовольствием будет раскачиваться в такт любимым песенкам. Но берегите настоящий пульт от телевизора – вероятно, малыш захочет «извлечь звуки» и из него.

Те предметы, которые ещё не предназначены для игры ребёнка, лучше спрятать от него подальше: это мобильные телефоны, ноутбуки, кухонная техника… Если же малыш все-таки потянется к «запретному плоду», лучше не окрикивать его, а просто отвлечь, переключить его внимание на иное, не менее захватывающее действие.

Так, многие детки к семи месяцам начинают интересоваться книжками с картинками. Первые книги для малышей должны быть изготовлены из прочных и безопасных материалов: толстого картона или ткани, чтобы маленькие читатели учились сами их перелистывать. Лучше, чтобы в них были изображены простые и понятные предметы окружающего мира, люди, животные. Показывая крохе картинку, обязательно рассказывайте ему, что на ней изображено. Таким образом, вы расширяете его представление о мире и формируете пассивный словарный запас. Но не расстраивайтесь, если пока малышу будет не интересно сидеть за книжкой, в отличие, например, от его старшего брата или сестрички. Все дети индивидуальны, и, выбирая развивающие игры, необходимо учитывать особенности вашего крохи.

Развиваем речь

Кроха уже знает названия многих предметов, но его лепетание ещё не соотносится с конкретными понятиями. Для него это скорее игра, чем способ выразить свои желания. Он с удовольствием прислушивается к звукам, которые ему удаётся произнести, и следит за модуляциями своего голоса. Во время лепетания кроха тренирует весь свой артикуляционный аппарат: голосовые связки, язык, губы … Дайте ему возможность понаблюдать за тем, как произносите звуки вы: как двигаются ваши губы, что происходит с вашей мимикой. Хорошим примером станет и речь его братика или сестрички. Поддерживая речевую активность малыша, повторяйте за ним его слоги, его лепет, и добавляйте к этому новые сочетания звуков: например, тя-тя-тя, ля-ля-ля, та-та-та. Обязательно делайте паузы, чтобы малыш мог вам ответить! Хвалите, гладьте, целуйте и благодарите малыша за любые положительные результаты.

Малышу 7 месяцев: ФИЗИОЛОГИЯ И ПСИХОЛОГИЯ

К 7-ми месяца малыш уже умеет самостоятельно передвигаться, что очень расширяет границы его мира. Кроха может поползти к заинтересовавшему его предмету, ощупать его, попробовать, рассмотреть. Теперь он сосредотачивает внимание на изучении их свойств. Для оптимального развития ребёнку необходимо предоставить полную свободу движений: выберите место в квартире, где малышу ничего не будет мешать или угрожать.

Рост и вес

В 7 месяцев рост малыша составляет 69-71 см, а вес – 8000-9200 г.

Появление зубов

К 7-ми месяцам у деток обычно уже прорезываются. Первыми появляются два нижних передних зуба, затем два верхних передних. К 8-ми месяцам прорезываются ещё три верхних передних. Появление зубов обычно доставляет детям сильное беспокойство, они начинают всё тянуть в рот, яростно кусать резиновые игрушки. Вы можете помочь крохе, массируя ему десны и предлагая ему специальные кольца для жевания. В этот период обязательно надо показаться педиатру, чтобы он посоветовал, как облегчить состояние малыша.

Навыки малыша

В 7 месяцев малыш обычно очень подвижен: он становится на коленки, пытается переползти к интересной игрушке, активно осваивает новое пространство. У вашего чемпиона уже достаточно развиты мышцы, и теперь они могут выдерживать некоторую нагрузку. Попробуйте взять малыша под мышки и поставить его ножками на пол или к себе на колени – с вашей поддержкой он сможет сделать несколько шагов! А к концу месяца кроха уже самостоятельно встаёт на ножки, держась за опору или сетку манежа.

В этом возрасте дети умеют уверенно брать игрушки, перекладывать их из одной руки в другую. Постепенно их интерес начинают привлекать всё более мелкие предметы, и формируется новый тип захвата – двумя пальцами, большим и указательным. Для развития мелкой моторики предлагайте крохе собирать мелко порезанные кусочки еды, безопасной для этого возраста. Например, кусочки очищенного яблока.

У малыша появляются и новые знания о предметах, основанные на их свойствах. Так, в 7 месяцев он уже понимает, что мячик можно катать и кидать, кубики ставить один на другой, а мелкие игрушки складывать в коробку. В играх он подражает действиям взрослых: стучит предметами друг об друга, поднимает и опускает крышку пластмассовой кастрюльки. По просьбе мамы он может выполнить разученные движения: «сделать ладушки», помахать ручкой на прощание.

Ребёнок начинает активно пользоваться жестами. Если спросить его, где ляля, он уверенно покажет на неё пальчиком, а если что-то произойдёт, то он, копируя движения взрослых, недоумённо разведёт руками.

Кроха уже хорошо понимает причинно-следственные связи, и может выполнить два последовательных действия с одной целью. Например, он переворачивает коробочку и достаёт машинку, отодвигает препятствия и продвигается туда, куда он хочет.

Интеллект

Малыш с удовольствием изучает окружающий мир, совершая новые и новые пробы. Особый интерес он проявляет к решению простых задач: как достать предмет, который от него убегает, как сообщить взрослым о своих желаниях.

В 7 месяцев ребёнок уже хорошо понимает значение многих простых слов. Например, когда вы говорите малышу «ав-ав», он начинает искать глазами собачку, а когда просите найти папу, поворачивает голову в его направлении.

Речь

Семимесячный малыш уже отчётливо лепечет, громко произнося отдельные слоги или целые серии слогов. Например: а-дять, би-бе-де, а-де-де, ба-ба. Ребёнок в 7 месяцев прислушивается к себе, своей интонации, учится соотносить то, что услышал, с ощущениями от движений губ и языка. Пока лепетание крохи не соотносится с конкретными понятиями, но оно всё больше напоминает по звучанию отдельные слова. А по интонациям «тирады» малыша очень близки к манере разговора родителей.

Эмоции

Малыш постепенно меняет свой способ общения со взрослыми, и начинает настойчиво требовать сотрудничества. Теперь близкие для него – это в первую очередь помощники в освоении мира. Всё чаще и чаще он пытается с вашей помощью достать какой-либо предмет, приблизиться к желаемой цели, открыть запертую дверцу. Однако это не значит, что вы должны беспрекословно выполнять все его желания. Очень важно, чтобы к малышу относились с уважением, любовью и терпением, но в семье должны быть установлены границы поведения для малыша. Уже в этом возрасте он впервые понимает, что окружающие могут реагировать на его поведение по-разному: в каких-то случаях поощрять, а в каких-то ситуациях говорить «Нет, нельзя». Главное, вводить ограничения очень аккуратно, а по возможности просто переключать внимание малыша на другое занятие. В большинстве случаев достаточно просто отвлечь ребёнка от запретных предметов ласковым разговором, интересной игрушкой. Таким образом, вы поможете крохе изучать мир безопасно для себя.

 Малышу 7 месяцев: ПИТАНИЕ

Семимесячный малыш отличается повышенной подвижностью. В этом возрасте многие дети уже играют сидя, активно ползают, а особо шустрые бегают на четвереньках и даже пытаются вставать и ходить. Такая активность требует повышенных затрат энергии, поэтому питание семимесячного ребенка должно восполнять в полной мере эти затраты.

Основу питания ребенка в семь месяцев по-прежнему составляет грудное молоко. Незаменимое для детского здоровья, грудное молоко регулирует работу желудочно-кишечного тракта малыша. Вводить в рацион ребенка до года коровье молоко врачи не рекомендуют, но вместе с тем педиатры не возражают против использования в питании маленького человечка творога, который может быть как покупным, так и сделанным в домашних условиях. Поскольку творог является бесценным источником кальция, он должен входить и в питание кормящей мамы. При отсутствии по каким-либо причинам грудного молока, достойную замену ему составляют сухие молочные смеси.

Общие рекомендации

Планируя режим питания малыша в возрасте 7 месяцев, следует распределить продукты таким образом, чтобы меню было похожим на будущее меню подросшего ребенка. Первое утреннее кормление состоит по-прежнему из грудного молока или молочной смеси, следующее кормление впоследствии преобразуется в завтрак, за которым следует обед, включающий овощное или мясное пюре, затем полдник и ужин.

Сбалансированный рацион поможет адаптировать организм ребенка к разным продуктам, и сделает переход от детского питания к взрослому меню комфортным и безопасным.

Примерное меню для питания малыша 7 месяцев

Белок

В этом возрасте, ребенок уже распробовал кашки, овощные и фруктовые пюре. Пришло время вводить в его прикорм белковую пищу. Начинать обычно рекомендуют с половины сваренного вкрутую яичного желтка смешанного с уже знакомым овощным пюре. В яичном желтке содержатся витамины, железо, фосфор и другие необходимые элементы для роста и развития ребенка. Сваренный яичный желток подготовит малыша к употреблению классического источника белка — мяса, которое необходимо ему для энергичной жизнедеятельности.

Каши

Каши являются незаменимым продуктом, от которого не стоит отказываться, даже если малыш предпочитает овощное или мясное пюре. Для того чтобы разнообразить вкус каш, в них добавляют некоторые овощи, которые нравятся вашему ребенку, к примеру, тыкву. Тыквенно-рисовая каша не только выглядит более аппетитно, но и гораздо вкуснее, так что обязательно заинтересует младенца.

Фрукты

Кроме белков ребенку 7 месяцев необходимы витамины и минералы. Больше всего их содержится в свежих фруктах. Однокомпонентные пюре из яблок и груш уже знакомы малышу, теперь настало время приобщить ребенка к сочетаниям фруктов. Например, к яблокам добавить немного пюре из банана. Этот «заморский» плод — кладезь микроэлементов: в нем содержится и калий, и кальций, и магний, и железо. Кроме того, бананы практически никогда не вызывают аллергии, а значит не вызовут сыпь. Малышу наверняка понравится и яблочно-грушевое пюре или сочетание яблока с персиком.

Мясное пюре и мясные бульоны

Мясное пюре для малышей родители обычно покупают уже в готовом виде в специализированных магазинах детского питания. Но пюре вполне под силу сделать дома самим. Для этого понадобится нежирная говядина или белое куриное мясо. Мясо необходимо тщательно промыть, отварить, порезать на небольшие кусочки, а затем измельчить в блендере. Чтобы масса получилась более пюреобразной, к мясу можно добавить овощи, например кабачковое или тыквенное пюре, а также немного оливкового или подсолнечного масла.

Вводить мясное пюре в рацион малыша следует очень аккуратно, маленькими порциями, наблюдая за реакцией маленького организма. К началу 8-го месяца ребенок, по мнению специалистов должен получать 80 г мяса.

Для рациона семимесячного малыша подойдет и мясной бульон. Он также как и пюре готовится из куриной грудки или нежирной говяжьей вырезки. Тщательно промытое мясо заливают водой, доводят до кипения и варят около 10 минут. Полученный бульон сливают, а малышу готовят вторичный бульон – снова заливают мясо водой и варят около двух часов. Из мяса делают пюре, а бульон дают ребенку по чайной ложечке один или два раза в день.

Переход на взрослую пищу должен подарить ребенку не только новые гастрономические ощущения, но и заложить фундамент «взрослого» поведения за столом. Задача родных аккуратно и дружелюбно помочь ему в этом.

 

 

Пятый месяц жизни ребенка

Поздравляем – теперь у Вас вдвое больше счастья! Почему? Да потому, что к середине пятого месяца вес Вашего малыша должен стать примерно в два раза больше, чем в момент рождения.

У крохи могут начать резаться зубки, и, возможно, он готов к первому прикорму, ведь ребенок уже способен захватывать губами более густую, чем молоко, пищу, в частности – пюре, а его желудочно-кишечный тракт созрел для переваривания более «взрослой» еды. Кроме того, малыш начинает интересоваться едой взрослых: он наблюдает за тем, как Вы едите, и даже хватает кусочки с Вашей тарелки.

Что малыш будет уметь к концу пятого месяца

• Ребенок уже может долгое время сидеть при поддержке спины. Например, в детском стульчике, шезлонге, или среди подушек. Самостоятельно сидеть он пока не может – не присаживайте его специально, мышцы спины малыша еще не готовы к такой нагрузке, и в дальнейшем это может обернуться проблемами с позвоночником.
• Если Вы поднимете малыша в воздух и будете держать параллельно полу лицом вниз, то он приподнимет верхнюю часть тела с головой и будет держать их. Лежа на животе, ребенок сможет сделать «самолетик» – двигать руками и ногами с приподнятой головой. 

• Положите малыша на спину и потяните за ручки вверх. Он самостоятельно подтянется и будет держать голову, чтобы она не запрокинулась назад. Помимо этого, в лежачем положении ребенок может поднимать ножки и ручки, чтобы рассмотреть их, и даже пытаться взять ступни в рот. 
• К пяти месяцам ребенок тянет ручки к движущимся предметам и хватает их – например, он может отнять у Вас игрушку. А еще он уверенно берет предмет сразу двумя руками и перекладывает из одной в другую. Малыш хорошо умеет и очень любит самостоятельно держать бутылочку со смесью или водой. Еще одна привычка крохи – бросать игрушки на пол. Важно не ругать его за такое поведение, ведь оно помогает ребенку развиваться.
• Вас несомненно порадует тот факт, что теперь малыш способен играть в одиночку 5-10 минут. Ведь иногда так важно немножко отдохнуть.

Массаж и гимнастика

Для развития организма крохи важно регулярно делать ему массаж и гимнастику. Они полезны не только для укрепления мышц и костей, но и для сердечно-сосудистой, пищеварительной и нервной систем. Легкий массаж Вы можете освоить самостоятельно, а лечебный лучше доверить квалифицированным специалистам.

Очень полезными будут и гимнастические упражнения на фитболе. Они тоже укрепят и поспособствуют развитию мышц рук и ног, брюшного пресса, простимулируют работу пищеварительной системы, помогут научиться координировать движения и хорошо помогут развить вестибулярный аппарат.

Что нового в общении

• В гулении ребенка появляются согласные звуки: «ня», «ма», «ба» и так далее. Он повторяет их по нескольку раз, но пока не наделяет смыслом. Даже если он произнесет заветные «мама» или «папа», то на данном этапе это, к сожалению, не будет означать, что он Вас зовет.
• Зато малыш легко узнает тех людей, которые ему знакомы. Он понимает связь между конкретным человеком и его цветом волос, глаз, чертами лица, образом в целом. Поэтому сейчас не время для кардинальных перемен во внешности родителей. Если папа сбреет бороду, то кроха может его не узнать. А к незнакомцам малыш сейчас проявляет большое недоверие. Далеко не всем он позволяет взять себя на руки. Если мамы нет рядом, то ребенок и вовсе может испугаться чужого человека.  
• Малыш уже чувствует разницу в интонациях Вашего голоса. Не кричите и не ругайте его, рискуете получить в ответ обиду. Ведь если раньше восприятие ребенка делилось на «хорошо» или «плохо», то сейчас спектр его чувств огромен: здесь и радость, и возбуждение, и страх, и печаль, и настороженность, и много-много других эмоций. 

Материал подготовлен на основании учебника «Пропедевтика детских болезней», под редакцией Воронцова И. М., Мазурина А. В. 3-е изд., доп. и перераб. — СПб: ООО «Издательство Фолиант», 2009. — 1008 с.

^*Важное примечание: Грудное молоко — лучшее питание для ребенка, его необходимо сохранять как можно дольше. Если грудное вскармливание невозможно, педиатр поможет Вам подобрать молочную смесь по составу и свойствам приближенную к грудному молоку.

Развитие ребенка в 1 месяц: ваш календарь

Что должен уметь ребенок в 1 месяц

Все малыши развиваются индивидуально, и все же врачи выделяют основные навыки, которые должны появиться у крохи к первому месяцу его жизни:

• Лежа на животе, малыш начинает пытаться приподнимать голову. Иногда ему даже удается удержать ее несколько секунд, но не более.

• Он начинает фокусировать взгляд на знакомых людях, различать контрастные яркие цвета и узоры и отслеживать движение предметов.

• Благодаря развитию слуха кроха с легкостью отличает мамин голос от остальных, а также начинает пытаться произносить собственные, пока только ему понятные звуки.

• В 1 месяц у малыша должны проявляться 7 основных рефлексов:

  • Хватательный — малыш должен рефлекторно схватывать все, что касается его ладошки.

  • Сосательный — если провести вокруг рта пальцем или соской, у крохи будут заметны сосательные движения губ.

  • Плавательный — если положить малыша на живот, он начнет совершать плавательные движения.

  • Рефлекс ходьбы — если поддерживать ребенка под руки так, чтобы он касался ножками какой-то поверхности, он начнет имитировать ходьбу.

  • Рефлекс Бабинского — если провести пальцем по внешнему краю стопы, малыш разведет пальчики ног в разные стороны и повернет стопу.

  • Рефлекс Мора — кроха должен разводить и сводить ручки и ножки, если неожиданно услышит громкий звук.

  • Рефлекс Бабкина — если надавить малышу на ладонь, он повернет голову и откроет рот.

Не забывайте фиксировать каждый этап развития малыша, делая снимки. А чтобы они не затерялись в вашем телефоне или компьютере, зарегистрируйтесь на нашем сайте, и мы подарим вам фотокнигу с вашими любимыми фотографиями.

Как развивать ребенка в 1 месяц

Самое главное, что вы можете сделать в этот период — создать вокруг малыша спокойную и приятную атмосферу, полную нежности и любви.

• Тактильный контакт. Малыш все время должен чувствовать, что вы рядом — слышать, как бьется ваше сердце, чувствовать запах.

• Чтобы малыш активнее двигался, выкладывайте его на животик. Еще это будет способствовать хорошему пищеварению.

• Чтобы у малыша развивался слух, разговаривайте с ним. Вас не должно смущать, что он не понимает смысла ваших слов — он прекрасно улавливает интонацию и настроение. Вот увидите, очень скоро ему захочется начать с вами «диалог».

Чтобы развивать зрение у ребенка, показывайте ему яркие игрушки. Сначала он должен научиться на них фокусироваться, а затем следить взглядом за их перемещениями. Также старайтесь устанавливать зрительный контакт, когда вы разговариваете с малышом. Улыбайтесь, и малыш обязательно улыбнется вам в ответ!

Читайте также:

Календарь развития: достижения крохи в два месяца

Развитие ребенка в 2 месяца

Не успели оглянуться, как вашему малышу уже исполнилось два месяца? От души поздравляем! И хотя он по-прежнему еще очень маленький и постоянно нуждается в вашей любви и заботе, пришло время поговорить о его новых достижениях!

Держать голову. В два месяца кроха уже уверенно держит головку, а когда вы берете его на руки, с интересом вертит ей по сторонам.

Реагировать на звук. Если малыш что-то слышит, он поворачивает голову к источнику звука. С особым удовольствием он, конечно, реагирует на голос мамы и других близких ему людей.

Улыбаться. Если раньше малыш улыбался непроизвольно и чаще всего во сне, то в два месяца он начинает дарить свою улыбку любимым родителям, едва услышит их голос!

Уметь пользоваться мимикой и интонациями. Что касается эмоций, то тут дело не ограничивается улыбкой. Ребенок начинает различать выражения лица и тон голоса, а мама уже может отличить призывный плач малыша от возмущенного или жалобного.

Сосредоточивать взгляд. У малыша развивается зрение: он хорошо умеет фокусироваться на предмете и подолгу разглядывать что-то интересное. Именно поэтому над кроваткой малютки советуют вешать красивые игрушки.

Издавать первые звуки. Не удивляйтесь, если малыш начнет произносить странные звуки. Пока еще он делает это неосознанно: чаще всего сам этому удивляется, замирает и прислушивается. Со временем эти звуки станут более разнообразными и отчетливыми.

Координировать движения. Малыш уже двигает ручками и ножками, а также тянется за игрушками. Не расстраивайтесь, если он не сможет схватить игрушку с первого раза — для этого ему нужно с помощью глазомера точно определить расстояние, а для ребенка это пока сложная задача.

Изучать себя. Лежа на спине, малыш смотрит на свои ручки и ножки. Если дать ему в ручку игрушку, он будет разглядывать и ее (а возможно, даже попробует ее на вкус).

Плавать. В 2 месяца малыш уже может начать плавать под водой. Поэтому многие родители ходят с крохой в специальный детский бассейн уже с двух месяцев. Но перед этим обязательно проконсультируйтесь со своим педиатром.

Понимать, что такое режим дня. Малыш потихоньку начинает отличать день от ночи, а также привыкать к определенному распорядку дня, так что его уже можно приучить засыпать на всю ночь и просыпаться утром.

Не забывайте фиксировать каждое новое достижение своего малыша — ведите дневник и много фотографируйте! А чтобы снимки не пропали, зарегистрируйтесь на нашем сайте и получите в подарок фотокнигу!

3-й месяц жизни. Что должен уметь малыш?

Малыш на руках у взрослого в вертикальном положении уже в состоянии следить за игрушкой в течении 30-40 секунд, поворачивать головку на 180 градусов. Он активно следит за неподвижным или движущимся предметом, за лицом разговаривающего с ним взрослого. Но движения глаз координирует еще плохо.

Многие малыши могут косить глазками, что естественно в таком возрасте. К 4 месяцу это исчезает. Особенно хорошо малыша развлекают подвижные игрушки, которые легко и плавно раскачиваются в воздухе. Важно, чтобы на игрушке было несколько четких деталей. Идеальное расстояние до игрушки 30-50см. Больше всего малыши любят круглые предметы, а их любимый цвет – красный, который запомнился еще со времени внутриутробного развития.

К концу 3 месяца, лежа на животике, малыш уже умеет опираться на предплечья и поднимать головку на 2-2,5 минуты.

Такая поза передоставляет крохе новые возможности развития! Он с интересом оглядывается и воспринимает окружающий мир под другим углом зрения. Более полная подвижность головки является для него большим неврологическим достижением!

На 10-12 неделе наиболее подвижные малыши начинают переворачиваться со спины на животик.

В этот период развивается так называемая “стабильность корпуса”, которая является основной предпосылкой для первых произвольных движений ребенка и основой для самостоятельной активности.

Пока малыш еще чаще всего лежит на спине, поскольку именно из этого положения ему потом будет удобнее всего садиться.

К концу 3 месяца кроха начинает все больше ощущать свое тело. Присмотритесь к нему – он лежит прямо на спинке, но при этом его носик, подбородок, грудина, пупок и лобковая кость образуют прямую линию. А ручками он играет перед своим лицом, рассматривает свои пальчики, ножки согнуты и немного подтянуты к пупку.

Ярко выражен комплекс «оживления» в ответ на обращенную к нему речь.

Малыш очень активно ищет глазами источник звука, улыбается в ответ на вашу улыбку. Эта улыбка уже называется “социальной”, потому что она возникает в ответ на человеческое лицо. Это огромный шаг крохи в области межчеловеческих отношений!

В конце 3 месяца у малыша должен исчезнуть рефлекс Моро (заключается в симметричном отведении верхних конечностей с разгибанием пальцев, с последующим приведением конечностей и сгибанием пальцев.).

Обратите внимание, что теперь, при внезапном воздействии света и звука, ваш малыш не будет несвязно сучить ручками и ножками. Играя с ручками, кроха одновременно сгибает и ножки.

На 8-12 неделе исчезает и рефлекс хватания. У крохи возникает сознательное произвольное хватание.

Примерно с 10 недели малыш начинает увлеченно играть со своими руками, перебирать пальчиками. Он пытается удержать игрушку, стремится что-то потрогать своими руками. Так создается связь между зрением и действием. Конечно, малыш не сразу сможет захватывать сам игрушку. Этому он научится постепенно.

При поддержке малыша под мышки, он уже уверенно опирается в течение 45-60 секунд. о твердую опору ступнями ножек, согнутых в тазобедренных суставах.

Малыш хорошо реагирует на звуки.

Если вы нежно возьмете малыша на руки и заговорите с ним, он будет очень внимательно изучать ваше лицо. Кроха всматривается в выражение вашей мимики, прислушивается к тональности вашего голоса, отличает громкость вашего обращения к нему. Если вы захотите изменить тон или громкость вашей речи, он зарегистрирует это.

4 месяц жизни. Что должен уметь малыш?

Еще по теме:

Ребенок от 6 до 7 месяцев, чем с ним заниматься Ребенок 5 до 6 месяцев, чем с ним заниматься Ребенок 4 до 5 месяцев. Чем с ним заниматься Ребенок от 3 до 4 месяцев. Чем с ним заниматься Ребенок от 1 до 2 месяцев. Чем с ним заниматься

Начиная с 4 месяца, лежа на животике, малыш высоко поднимает головку, опираясь на предплечья. В это время он постигает сложные виды движения. Например, он пытается работать мышцами спины и ног. Ощущение собственного тела для малыша играет очень важную роль! Это ощущение очень важно стимулировать массажем, играми и нежными прикосновениями.

4 месяц для вашего малыша “тренировочный”. Спинка еще слабенькая, малыш начинает подтягиваться, чтобы в будущем сесть. Он любит, когда его поддерживают под мышки, поднимают за ручки и стремится подтанцовывать.

В этом возрасте ребенок спит только 3 раза в сутки, а бодрствует в течение двух часов подряд.

Малыш активно гулит и узнает маму, радуется, у него легко возникает «комплекс оживления».

Уже к концу 4 месяца малыш умеет громко и заразительно смеяться! То, что его окружает – это становится все более интересным для него. По звуку он может отыскивать людей, смотреть вперед и назад, через плечо. Родным он отвечает радостным гулением.

Малыш пугается, если слышит сердитый голос близкого человека. Его личико меняет мимику, он может даже заплакать!

В этом возрасте кроха легко различает тембр и силу звуков, под красивую классическую музыку он бодрствует и радуется ей, а устав, засыпает под нежную колыбельную. Ели вам нравится танцевать с малышом, танцуйте! Бережно качайте ребенка под медленную мелодию и более быстро под ритмичную. Таким образом вы разовьете чувство ритма у вашего крохи через движения.

В этом возрасте малыши получают огромное удовольствие от игры со звуками. Совершенно независимо от материнской речи, детки всего мира начинают произносить первые слоги: “ба”, “ма”, “ам”, “та”и пр. Некоторые малыши могут изменять тональность и громкость своей речи и даже напевать целые мелодии.
Все звуки для крохи живые! Он просто наслаждается ими. Чувство речи, каждой гласной и согласной имеет определенные свойства и для ребенка. Поэтому малыши любят слушать стихи, даже такие, которые для вас покажутся странными.
В это время завершается первоначальное развитие глазного яблока.

Он рассматривает предметы, как бы ощупывая их взглядом, определяя их форму и размер. Такое длительное и разнообразное зрительное сосредоточение, его внимание к предметам, активное гуление – все это свидетельство нормального психофизического развития.

Развитие зрения позволяет малышу детально рассматривать и запоминать предметы и людей. В этом возрасте он начинает различать некоторые цвета, улавливать разницу в форме фигур, например, овала, треугольника и прямоугольника. Он начинает реагировать на изменение облика человека, которого он хорошо знает. Мама надела новое платье, шапку или очки – все это для него интересно, все он пытается рассмотреть и изучить, в новом образе он стремиться узнать родное лицо.

В 4 месяца малыш уже будет радоваться своему отражению в зеркале. Для этого во многих игрушках есть безопасное зеркальце. Он будет приветствовать своего “незнакомца” радостной и сияющей улыбкой.
На четвертом месяце малыш уже пытается повернуться на бочок. Чуть позже он сможет перевернуться с живота на спинку. Все эти движения еще неуверенные, и больше похожи на опрокидывания.

Натолкнувшись на игрушки, он их рассматривает, стремится захватить и потрогать. Самостоятельно захватывать предметы он еще не умеет, но держит, вложенную погремушку в ладошку, достаточно крепко.

Любые предметы, которые попадают в ручки малыша, обязательно попадают в ротик для дальнейших исследований. Это новый шаг в развитии ребенка! Кроха стремиться познавать мир с помощью своего чувствительного ротика. Так он накапливает опыт тактильных ощущений…

Во время кормления кроха умело захватывает и придерживает своими ручонками грудь мамы или бутылочку.

Малыш уже умеет воспринимать тактильно различные материалы и предметы. Дайте ему возможность накапливать опыт все новых и новых ощущений. Предлагайте малышу игрушки из разнофактурных материалов, например, прорезыватели.
Это время незабываемых впечатлений и эмоций, как для крохи, так и для молодой мамы!

Фенотипический анализ и анализ развития мутаций в локусе crumbs, гене, необходимом для развития эпителия у Drosophila melanogaster

Akam M (1987) Молекулярная основа метамерного паттерна в эмбрионе Drosophila . Разработка 101: 1–22

Google ученый

Андерсон К.В. (1987) Гены дорсально-вентрального эмбрионального паттерна Drosophila . TIG 3: 91–97

Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Becker HJ (1957) Über Röntgenmosaikflecken und Defektmutationen im Auge von Drosophila und die Entwicklungsphysiologie des Auges.Zeitschrift für индукт. Abstammungs- und Vererbungslehre 88: 333–373

Google ученый

Becker HJ (1976) Митотическая рекомбинация. В: Ashburner M, Wright TRF (eds) Генетика и биология Drosophila , vol 1c. Academic Press, New York, pp 1020–1089

Google ученый

Bier E, Vässin H, Shepherd S, Lee K, McCall K, Barbel S, Ackerman L, Carretto R, Uemura T, Grell E, Jan LY, Jan YN (1989) Поиск паттернов и мутаций в Геном дрозофилы с вектором P-lacZ.Gen Dev 3: 1273–1287

Google ученый

org/Book»>

Campos-Ortega JA, Hartenstein V (1985) Эмбриональное развитие Drosophila melanogaster . Springer, Берлин Гейдельберг Нью-Йорк Токио

Google ученый

Demerec M (Ed.) (1950) Биология Drosophila . John Wiley & Sons Inc, Нью-Йорк

Google ученый

Doolittle RF, Feng DF, Johnson MS (1984) Компьютерная характеристика предшественника эпидермального фактора роста.Nature 307: 558–560

PubMed Google ученый

Dura JM, Randsholt NB, Deatrick J, Erk I, Santamaria P, Freeman JD, Freeman SJ, Weddell D, Brock HW (1987) Сложный генетический локус, polyhomeotic , необходим для сегментарной спецификации и развития эпидермиса в D . меланогастер. Ячейка 51: 829–839

Google ученый

Ekblom P (1989) Онтогенетически регулируемое преобразование мезенхимы в эпителий.FASEB J 3: 2141 2150

Google ученый

Элкинс Т., Зинн К., МакАллистер Л., Хоффманн Ф.М., Гудман С.С. (1990) Генетический анализ молекулы адгезии нервных клеток Drosophila : Взаимодействие мутаций фасциклина I и тирозинкиназы Абельсона. Ячейка 60: 565–575

PubMed Google ученый

Флеминг Т.П., Джонсон М.Х. (1988) От яйца до эпителия. Ann Rev Cell Biol 4: 459–485

PubMed Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Foe VE (1989) Митотические домены выявляют раннюю коммитцию клеток в эмбрионах Drosophila .Разработка 107: 1–22

Google ученый

Fujita SJ, Zipursky SL, Benzer S, Ferrus A, Shotwell SL (1982) Моноклональные антитела против нервной системы Drosophila . Proc Natl Acad Sci USA 79: 7929–7933

PubMed Google ученый

Garcia-Bellido A, Merriam JR (1971) Генетический анализ клеточной наследственности в имагинальных дисках Drosophila melanogaster .Proc Natl Acad Sci USA 68: 2222–2226

PubMed Google ученый

Ghysen A, O’Kane C (1989) Элементы, подобные нервным энхансерам, являются специфическими клеточными маркерами в Drosophila . Разработка 105: 35–52

PubMed Google ученый

Gray A, Dull TJ, Ullrich A (1983) Нуклеотидная последовательность кДНК эпидермального фактора роста предсказывает предшественник с молекулярной массой 128000.Nature 303: 722–725

PubMed Google ученый

Hartenstein V (1987) Влияние сегментарной компартментализации на развитие личиночной периферической нервной системы у Drosophila melanogaster . Arch Dev Biol Ру 196: 101–112

Google ученый

Hartenstein V (1988) Развитие Drosophila личинок сенсорных органов: пространственно-временной паттерн сенсорных нейронов, периферические аксональные пути и дифференцировка сенсилл. Разработка 102: 869–886

Google ученый

Ingham PW (1988) Молекулярная генетика формирования эмбрионального паттерна у Drosophila . Nature 335: 25–34

PubMed Google ученый

Ян Л.Й., Ян Ю.Н. (1982) Антитела к пероксидазе хрена как специфические нейрональные маркеры у Drosophila и эмбрионов кузнечика. Proc Natl Acad Sci USA 72: 2700–2704

Google ученый

Jürgens G, Wieschaus E, Nüsslein-Volhard C, Kluding H (1984) Мутации, влияющие на структуру кутикулы личинки у Drosophila melanogaster. II. Зиготические локусы на третьей хромосоме. Arch Dev Biol 193: 283–295

Google ученый

King RC (1970) Развитие яичников у Drosophila melanogaster . Academic Press, Нью-Йорк Лондон Сан-Франциско

Google ученый

Klein G, Langegger M, Timpl R, Ekblom P (1988) Роль цепи ламинина А в развитии полярности эпителиальных клеток.Ячейка 55: 331–341

PubMed Google ученый

Klingensmith J, Noll E, Perrimon N (1989) Фенотип сегментной полярности Drosophila включает различные тенденции к трансформации и гибели клеток. Dev Biol 134: 130–145

PubMed Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Knust E, Dietrich U, Tepaß U, Bremer KA, Weigel D, Vässin H, Campos-Ortega JA (1987a) Гомологичные последовательности EGF, закодированные в геноме Drosophila melanogaster , и их связь с нейрогенными генами.EMBO J 6: 761–766

PubMed Google ученый

Knust E, Bremer KA, Vässin H, Ziemer A, Tepaß U, Campos-Ortega JA (1987b) Усилитель расщепленного локуса и нейрогенеза у Drosophila melanogaster . Dev Biol 122: 262–273

PubMed Google ученый

Lehmann R, Nüsslein-Volhard C (1987) hunchback , ген, необходимый для сегментации передней и задней области эмбриона Drosophila .Dev Biol 119: 402–417

PubMed Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Lewis EB (1978) Генный комплекс, контролирующий сегментацию у Drosophila . Nature 276: 565–570

PubMed Google ученый

Линдсли Д.Л., Грелль Э.Х. (1968) Генетические вариации Drosophila melanogaster. Carnegie Inst Publ No. 627, Washington DC

Lindsley DL, Zimm G (1985) Геном Drosophila melanogaster. Drosophila Inform Serv 62

Lindsley DL, Zimm G (1990) Геном Drosophila melanogaster. Drosophila Inform Serv 68

Livneh E, Glaser L, Segal D, Schlessinger J, Shilo BZ (1985) Гомолог рецептора EGF Drosophila : сохранение как связывания гормона, так и киназного домена. Ячейка 40: 599–607

PubMed Google ученый

Madhaven MM, Schneiderman HA (1977) Гистологический анализ динамики роста имагинальных дисков и гнезд гистобластов во время личиночного развития Drosophila melanogaster .Roux’s Arch Dev Biol 183: 269–305

Google ученый

Маграсси Л., Лоуренс П.А. (1988) Схема гибели клеток у fushi tarazu , гена сегментации Drosophila . Разработка 104: 447–451

PubMed Google ученый

Martinez-Arias A (1985) Разработка слитых -эмбрионов Drosophila melanogaster .J Embryol Exp Morphol 87: 99–114

PubMed Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Martinez-Arias A (1989) Клеточная основа для формирования рисунка в эпидермисе насекомых. TIG 5: 262–267

PubMed Google ученый

Nüsslein-Volhard C, Frohnhöfer HG, Lehmann R (1987) Определение переднезадней полярности у Drosophila . Наука 238: 1675–1681

PubMed Google ученый

Perrimon N, Gans M (1983) Клональный анализ тканевой специфичности рецессивных мутаций с женской стерильностью Drosophila melanogaster с использованием доминантной мутации с женской стерильностью Fs (1) K1237 .Dev Biol 100: 365–373

PubMed Google ученый

org/Book»>

Poodry CA (1980) Эпидермис: морфология и развитие. В: Ashburner M, Wright TRF (eds) Генетика и биология Drosophila, vol 2d. Academic Press, New York, pp 443–498

Google ученый

Price JV, Clifford RJ, Schüpbach T (1989) Материнский вентрализующий локус torpedo является аллельным по отношению к слабому маленькому шарику , эмбрионально летальному, и кодирует Drosophila EGF рецептора.Ячейка 56: 1085–1092

PubMed Google ученый

Riggelman B, Wieschaus E, Scheld P (1989) Молекулярный анализ локуса armadillo : равномерно распределенные транскрипты и белок с новыми внутренними повторами связаны с геном полярности сегмента Drosophila . Gen Dev 3: 96–113

Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Rodriguez-Boulan E, Nelson WJ (1989) Морфогенез фенотипа поляризованных эпителиальных клеток.Наука 245: 718–725

PubMed Google ученый

Scheijter ED, Shilo B-Z (1989) Ген гомолога рецептора EGF Drosophila (DER) является аллельным по отношению к слабому маленькому шарику , локусу, необходимому для эмбрионального развития. Ячейка 56: 1093–1104

PubMed Google ученый

Schüpbach T (1987) Зародышевые линии и сома взаимодействуют во время оогенеза, чтобы установить дорсовентральную структуру яичной скорлупы и эмбриона у Drosophila melanogaster .Ячейка 49: 699–707

PubMed Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Скотт Дж., Урдя М., Кирога М., Санчес-Пескадор Р., Фонг Н., Селби М., Раттер В. Дж., Белл Г. И. (1983) Структура подчелюстной матричной РНК мыши, кодирующей эпидермальный фактор роста и семь родственных белков. Наука 221: 236–240

PubMed Google ученый

Саймонс К., Фуллер С.Д. (1985) Полярность клеточной поверхности в эпителии.Ann Rev Cell Biol 1: 243–288

PubMed Google ученый

Smouse D, Goodman C, Mahowald A, Perrimon N (1988) polyhomeotic : ген, необходимый для эмбрионального развития аксонных путей в центральной нервной системе Drosophila . Gen Dev 2: 830–842

Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Smouse D, Perrimon N (1990) Генетическое вскрытие сложного неврологического мутанта, polyhomeotic , у Drosophila .Dev Biol 139: 169–185

PubMed Google ученый

Szabad J, Schüpbach T, Wieschaus E (1979) Клеточная линия и развитие в эпидермисе личинок Drosophila melanogaster . Dev Biol 73: 256–271

PubMed Google ученый

Tearle R, Nüsslein-Volhard C (1987) Тюбингенские мутанты и список запасов. Drosophila Inform Serv 66: 209–269

Google ученый

Technau GM (1987) Одноклеточный подход к проблемам клеточного происхождения и коммитирования во время эмбриогенеза Drosophila melanogaster . Разработка 100: 1–12

PubMed Google ученый

Tepaß U, Theres C, Knust E (1990) Ген Drosophila crumbs кодирует EGF-подобный белок, экспрессируемый на апикальных мембранах эпителиальных клеток Drosophila и необходимый для организации эпителия. Ячейка 61: 787–799

PubMed Google ученый

Tomaselli KJ, Neugebauer KM, Bixby JL, Lilien J, Reichardt LF (1988) N-кадгерин и интегрины: две рецепторные системы, которые опосредуют разрастание нервных процессов на поверхности астроцитов.Нейрон 1: 33–43

PubMed Google ученый

Ван дер Меер Дж. (1977) Оптические чистые и постоянные препараты для фазово-контрастной микроскопии кутикулярных структур личинок насекомых. Drosophila Inform Serv 52: 160

Google ученый

Weigel D, Jürgens G, Küttner F, Seifert E, Jäckle H (1989a) Гомеотический ген вилочной головки кодирует ядерный белок и экспрессируется в концевых областях эмбриона Drosophila .Ячейка 57: 645–658

PubMed Google ученый

Weigel D, Bellen HJ, Jürgens G, Jäckle H (1989b) Специфические для примордиумов потребности гомеотического гена вилочной головки в развивающейся кишке эмбриона дрозофилы . Arch Dev Biol 198: 201–210

Google ученый

org/ScholarlyArticle»>

Wieschaus E, Riggleman R (1987) Автономные требования для гена сегментной полярности armadillo во время эмбриогенеза Drosophila .Ячейка 49: 177–184

PubMed Google ученый

Крошки

56
Сводка :
Эпителий — это ткань с высокой поляризацией, и несколько белковых комплексов с высокой консервативной полярностью служат для установления и поддержания полярности. Трансмембранный белок Crumbs (Crb), центральный компонент белкового комплекса Crb, необходим, среди прочего, для поддержания полярности в большинстве эпителиев эмбриона дрозофилы.Однако разные эпителии проявляют разную фенотипическую серьезность при потере crb . Использование трансгеномного подхода позволило более точно определить роль crb в различных эпителиях. В частности, представлены доказательства того, что потеря целостности эпителиальной ткани в вентральном эпидермисе crb мутантных эмбрионов происходит из-за нарушения активности актомиозина и избыточного количества нейробластов. Было продемонстрировано, что внутриклеточный домен Crb может только частично спасти этот фенотип, в то время как он способен полностью восстанавливать целостность ткани в другом эпителии.На основании этих результатов предполагается двойная роль внеклеточного домена Crb в вентральной нейроэктодерме. Во-первых, он необходим для апикального обогащения белка Crb, который, в свою очередь, регулирует активность актомиозина и тем самым обеспечивает целостность ткани; и во-вторых, внеклеточный домен Crb стабилизирует рецептор Notch и, таким образом, обеспечивает правильную передачу сигналов Notch и спецификацию правильного количества нейробластов.

Недавняя литература

Уитни, Д. С., Петерсон, Ф. К., Киттелл, А. В., Эгнер, Дж. М., Прехода, К. Э. и Фолькман, Б. Ф. (2016). Привязка крошек к модулю Par-6 CRIB-PDZ регулируется Cdc42 . Биохимия 55: 1455-1461. Идентификатор PubMed: 26894406 Резюме : Par-6 представляет собой каркасный белок, который организует другие белки в комплекс, необходимый для инициирования и поддержания клеточной полярности.Cdc42-GTP связывает модуль CRIB Par-6 и изменяет аффинность связывания соседнего домена PDZ. Аллостерическая регуляция PDZ-домена Par-6 была впервые продемонстрирована с использованием пептида, идентифицированного при скрининге типичных карбоксиконцевых лигандов. Crumbs, мембранный белок, который локализует комплекс консервативной полярности, впоследствии был идентифицирован как функциональный партнер Par-6, который, вероятно, взаимодействует с доменом PDZ. Это исследование показывает с помощью ядерного магнитного резонанса, что Par-6 связывает карбоксиконцевой пептид Crumbs, и сообщает о кристаллической структуре комплекса PDZ-пептид.Пептид Crumbs связывает Par-6 прочнее, чем ранее изученный карбоксильный пептидный лиганд, и взаимодействует с модулем CRIB-PDZ зависимым от Cdc42 образом. Кристаллическая структура Crumbs: Par-6 выявляет специфические контакты PDZ-пептида, которые способствуют его более высокому сродству и усилению связывания с Cdc42. Сравнение с существующими структурами предполагает, что множественные С-концевые лиганды Par-6 отвечают на общий конформационный переключатель, который передает аллостерические эффекты связывания GTPase.

Нгуен, М.Б., Вуонг, Л. и Чой, К. (2016). Ebi модулирует рост крыльев с помощью убиквитин-зависимого подавления активности Crumbs у Drosophila . Разработка 143: 3506-3513. PubMed ID: 27702784 Резюме : Передача сигналов Notch на дорсовентральной (DV) границе важна для формирования паттерна и роста крыльев у Drosophila . Белок Ebi домена WD40 участвует в регуляции передачи сигналов Notch на границе DV. Это исследование показывает, что Ebi регулирует рост крыла, противодействуя функции трансмембранного белка Crumbs (Crb).Ebi физически связывается с внеклеточным доменом Crb (Crbext), и это взаимодействие специфически опосредуется повторами 7-8 WD40 Ebi. и домен ламинина G Crbext. Надрез на крыле в результате уменьшения уровни Ebi подавляются за счет уменьшения функции Crb. Последовательный с этой антагонистической генетической связью, нокдаун Эби в DV граница повышает уровень белка Crb. Кроме того, Ebi требуется для подавление Crb за счет убиквитилирования.В совокупности исследование предполагает, что взаимодействие выражения Crb на границе DV и убиквитин-зависимое подавление Crb с помощью Ebi обеспечивает механизм поддержание передачи сигналов Notch во время развития крыла.

Nemetschke, L. и Knust, E. (2016). Drosophila Crumbs предотвращает эктопическую активацию Notch в развивающихся крыльях путем ингибирования лиганд-независимого эндоцитоза . Разработка 143 (23): 4543-4553. Идентификатор PubMed: 27899511 Сводка : Многие компоненты передачи сигналов апикально ограничены в эпителиальных клетках, а локализация и изобилие рецепторов являются ключевыми для морфогенеза и гомеостаза тканей.Следовательно, контроль полярности апикобазального эпителия имеет решающее значение для правильной передачи сигналов. Notch — это повсеместно экспрессируемый, апикально локализованный рецептор, который выполняет множество функций; поэтому его деятельность должна строго регулироваться. Это исследование показывает, что Drosophila Crumbs, эволюционно законсервированная детерминанта полярности, предотвращает эндоцитоз Notch в развитии крыльев посредством прямого взаимодействия между двумя белками. Эндоцитоз Notch в отсутствие Crumbs приводит к активации лиганд-независимого, зависимого от Deltex сигнального пути Notch и не требует активности лигандов Delta и Serrate или γ-секретазы. Эта функция Crumbs не связана с общими дефектами апикобазальной полярности, так как локализация других апикальных белков не изменяется. Эти данные раскрывают механизм, объясняющий, как Crumbs напрямую контролирует локализацию и доставку мощного рецептора Notch, и добавляют еще один аспект регуляции Crumbs в активности пути Notch. Более того, данные подчеркивают тесную связь между апикальной детерминантой Crumbs, переносом рецепторов и гомеостазом ткани.

Ципин, С., Haowei, C., Rui, X., Dandan, Z. and Juan, H. (2017). Исследование функционального сохранения полярности внутриклеточного домена белка Крамбса . И Чуань 39 (1): 32-40. Идентификатор PubMed: 28115303 Сводка : Трансмембранный белок Crumbs (Crb) играет ключевую роль в установлении и поддержании апикально-базальной полярности клеток в эпителиальных клетках путем определения идентичности апикальной плазматической мембраны. Хотя его внутриклеточный домен содержит всего 37 аминокислот, он абсолютно необходим для его функции. У Drosophila мутации в этом внутриклеточном домене приводят к серьезным дефектам полярности эпителия и аномальному эмбриональному развитию. Внутриклеточный домен Crb демонстрирует высокую гомологию между видами от Drosophila до Mus musculus и Homo sapiens. Однако внутриклеточные домены двух белков Crb у C. elegans довольно отличаются от таковых у дрозофилы и млекопитающих, что ставит вопрос о том, сохраняется ли функция внутриклеточного домена белка Crb у C. elegans.Используя подход геномной инженерии, это исследование заменило внутриклеточный домен Crb дрозофилы на домен Crb2 C. elegans (CeCrb2), который имеет чрезвычайно низкую гомологию с таковыми из белков Crb дрозофилы и млекопитающих. Неожиданно замена внутриклеточного домена Crb дрозофилы на домен CeCrb2 не вызывала каких-либо аномалий в развитии эмбриона дрозофилы с точки зрения экспрессии и локализации Crb и других белков полярности и апикально-базальной полярности в эмбриональных эпителиальных клетках.Эти результаты подтверждают мнение, что, несмотря на обширные вариации последовательностей, все функционально важные аминокислотные остатки и мотивы межклеточного домена белков Crb полностью консервативны между Drosophila и C. elegans.

Перес-Моцкус, Г., Рока, В., Мазуни, К. и Швайсгут, Ф. (2017). Neuralized регулирует эндоцитоз и морфогенез эпителия Crumbs через определенные изоформы Stardust . J. Cell Biol. 216 (5): 1405-1420. PubMed ID: 28400441 Резюме : Crumbs (Crb) является консервативной детерминантой идентичности апикальной мембраны, которая регулирует эпителиальный морфогенез во многих контекстах развития.Это исследование выявило комплексный белок Crb Stardust (Sdt) в качестве мишени для Neuralized (Neur) убиквитинлигазы E3 у Drosophila melanogaster. Neur взаимодействует со специфическими изоформами Sdt, содержащими мотив связывания Neur (NBM), и подавляет их. Используя CRISPR (сгруппированные с регулярными интервалами короткие палиндромные повторы) -индуцированную делецию экзона, кодирующего NBM, было обнаружено, что Sdt является ключевой мишенью Neur и что Neur действует через Sdt, подавляя Crb. Далее было показано, что Neur способствует эндоцитозу Crb через NBM-содержащие изоформы Sdt. Хотя регуляция Crb с помощью Neur не является строго необходимой, она вносит вклад в ремоделирование эпителия в задней части средней кишки и тем самым облегчает трансэпителиальную миграцию примордиальных половых клеток у ранних эмбрионов. Таким образом, это исследование раскрывает новый регуляторный механизм для контроля развития Crb-опосредованного морфогенеза.

Пелликка, М. и Тепасс, У. (2017). Уникальные биологические профили клеток сетчатки, вызывающие болезни, миссенс-мутации в белке полярности Crumbs .J Cell Sci [Epub перед печатью]. PubMed ID: 28515229 Сводка : Мутации в человеческом гомологе CRB1 Crumbs являются основной причиной заболеваний сетчатки, которые приводят к слепоте. CRB1 — это трансмембранный белок, обнаруженный во внутреннем сегменте фоторецепторных клеток (PRC) и апикальной мембране глии Мюллера. Функция внеклеточной области CRB1 плохо изучена, хотя с ней картировано более 80 болезнетворных миссенс-мутаций. В этом исследовании воссозданы четыре мутации в Drosophila Crumbs (Crb), которые влияют на различные внеклеточные домены.Crb регулирует полярность и рост эпителия, а также способствует дифференцировке и выживанию PRC. Мутантные изоформы Crb продемонстрировали замечательное разнообразие в изобилии белка, внутриклеточном распределении и способности восстанавливать недостаток эндогенного Crb, вызывать фенотип с усилением функции или способствовать дегенерации PRC. Интересно, что хотя экспрессия мутантных изоформ в значительной степени устраняет дефекты развития мутантов crb , они ускоряют дегенерацию PRC по сравнению с сетчатками, в которых отсутствует Crb, что указывает на то, что функция Crb в клеточной дифференцировке и выживании клеток зависит от различных молекулярных путей.Несколько мутантных белков Crb аномально накапливались в рабдомере и влияли на перенос родопсина, что позволяет предположить, что аномальная физиология родопсина вносит вклад в Crb / CRB1-зависимую дегенерацию сетчатки.

Оливарес-Кастинейра, И. и Ллимаргас, М. (2017). EGFR контролирует удлинение трахейной трубки Drosophila с помощью регуляции внутриклеточного транспорта . PLoS Genet 13 (7): e1006882. PubMed ID: 28678789 Сводка : Развитие регулируется несколькими консервативными сигнальными путями.Среди них путь EGFR многократно используется для формирования органов и тканей, и при нарушении регуляции может привести к раку и метастазированию. Учитывая его актуальность, решающее значение имеет определение его нижележащего молекулярного механизма и понимание того, как он инструктирует клеточные изменения. Это исследование подошло к этому вопросу в респираторной системе дрозофилы. Была идентифицирована новая роль EGFR, ограничивающего удлинение спинного ствола трахеи. Было обнаружено, что EGFR регулирует апикальный детерминант Крамбса и регулятор внеклеточного матрикса Serpentine, два фактора, которые, как ранее было известно, контролируют длину трубки. EGFR регулирует организацию эндосом, в которые загружены белки Crb и Serp. Эти результаты согласуются с ролью EGFR в регулировании маршрутов рециркуляции Retromer / WASH. Кроме того, это исследование дает новое представление о торговле Crb и его рециркуляции во время формирования органов. Эта работа связывает передачу сигналов клеток, механизмы трафика и морфогенез и предполагает, что регуляция транспорта грузов может быть общим результатом активации EGFR.

Хохапфель, Ф., Denk, L., Mendl, G., Schulze, U., Maassen, C., Zaytseva, Y., Pavenstadt, H., Weide, T., Rachel, R., Witzgall, R. и Krahn, MP ( 2017). Отличительные функции Крамбса, регулирующие щелевые диафрагмы и эндоцитоз в нефроцитах дрозофилы . Cell Mol Life Sci. PubMed ID: 28717874 Сводка : Подоциты млекопитающих, ключевые детерминанты фильтрационного барьера почек, дифференцируются от столбчатых эпителиальных клеток и несколько ключевых детерминант апикально-базальной полярности в общепринятом эпителии, как было показано, регулируют морфогенез и функцию подоцитов. Однако мало что известно о роли Crumbs, консервативного регулятора полярности во многих эпителиях, в формировании щелевой диафрагмы и функции подоцитов. Это исследование использовало нефроциты дрозофилы в качестве модельной системы для подоцитов млекопитающих и идентифицировало консервативную функцию белков Крамбса для клеточного морфогенеза, сборки / поддержания диафрагмы нефроцитов и эндоцитоза. Специфический для нефроцитов нокдаун Crumbs приводит к нарушению сборки / поддержания диафрагмы нефроцитов и снижению эндоцитоза, что может быть устранено Drosophila Crumbs, а также человеческими Crumbs2 и Crumbs3, которые оба экспрессируются в подоцитах человека.В отличие от внеклеточного домена, который способствует сборке / поддержанию диафрагмы нефроцитов, внутриклеточный мотив взаимодействия FERM у Crumbs важен для регуляции эндоцитоза. Более того, Moesin, который связывается с FERM-связывающим доменом Crumbs, необходим для эффективного эндоцитоза. Таким образом, это исследование описывает новый механизм развития и функции нефроцитов, который, вероятно, будет сохранен в подоцитах млекопитающих.

Das, S. и Knust, E. (2018). Двойная роль внеклеточного домена Drosophila Crumbs для морфогенеза эмбриональной нейроэктодермы . Биол Открытый 7 (1). PubMed ID: 2

Баджур, А. Т., Айер, К. В. и Кнуст, Э. (2019). Цитокортекс-зависимая динамика Drosophila Crumbs контролирует стабильность и напряжение соединений во время ретракции зародышевой ленты . J Cell Sci. PubMed ID: 31300472 Сводка : Во время морфогенеза эпителий подвергается динамическим перестройкам, что требует постоянного ремоделирования соединений и формы клеток, но в то же время механизмов, сохраняющих полярность клеток и целостность ткани. Апико-базальная полярность является ключом к локализации механизмов, которые позволяют изменять форму клеток.Эволюционно консервативный белок Drosophila Crumbs является критическим для поддержания апико-базальной полярности и целостности эпителия. Каким образом Crumbs сохраняется в динамично развивающемся эмбрионе, остается в значительной степени неизвестным. В этом исследовании были применены методы количественной флуоресценции, чтобы показать, что во время ретракции зародышевой полосы динамика Крамбса коррелирует с морфогенетической активностью эпителия. Генетические и фармакологические изменения показали, что мобильный пул Crumbs точно настраивается актомиозиновой корой в зависимости от стадии.Стабилизация Crumbs на плазматической мембране зависит от правильной связи с актомиозиновой корой через интактный сайт связывания FERM-домена в его внутриклеточном домене, потеря которого приводит к увеличению натяжения соединений и более высокому обмену DE-кадгерина, что приводит к нарушению перестройки соединений. Эти данные определяют Crumbs как посредника между полярностью и регуляцией соединений, чтобы управлять ремоделированием эпителия в ответ на изменения активности актомиозина.

Латтнер, Дж., Ленг, В., Кнуст, Э., Бранкачк, М., Флорес-Бенитес, Д. (2019). Crumbs организует транспортный механизм, регулируя апикальные уровни PI (4,5) P2 у Drosophila . Elife 8. Идентификатор PubMed: 31697234 Сводка : Эффективный векторный внутриклеточный транспортный механизм зависит от хорошо установленной апико-базальной полярности и является предпосылкой для функции секреторного эпителия. Несмотря на обширные знания об отдельных путях торговли людьми, мало что известно о механизмах, координирующих их временную и пространственную регуляцию.Это исследование сообщает, что белок полярности Crumbs необходим для фосфолипидного гомеостаза апикальной плазматической мембраны и эффективной апикальной секреции. Привлекая betaHeavy-Spectrin и MyosinV к апикальной мембране, Crumbs поддерживает Rab6-, Rab11- и Rab30-зависимый транспорт и регулирует липидные фосфатазы Pten и Ocrl. Нокдаун Crumbs приводит к увеличению апикальных уровней PI (4,5) P2 и образованию нового, обогащенного Moesin и PI (4,5) P2 апикального мембранного мешочка, содержащего микроворсинки-подобные структуры.Эти результаты идентифицируют Crumbs как важный центр, необходимый для поддержания организации апикальной мембраны и физиологической активности личиночной слюнной железы.

Краут, Р. С. и Кнут, Э. (2019). Изменения в эндолизосомной организации определяют преддегенеративное состояние у мутанта Drosophila retina крохи. PLoS One 14 (12): e0220220. Идентификатор PubMed: 31834921 Сводка : Мутации в гене crumbs (crb) полярности эпителия приводят к дегенерации сетчатки у дрозофилы и человека.Общая морфология сетчатки и ее ухудшение у мутантов Drosophila crb были хорошо охарактеризованы, но биологическое происхождение дегенерации клеток не совсем понятно. Дегенеративные состояния сетчатки и других участков нервной системы часто связаны с дефектами деградационных путей внутриклеточного транспорта. Однако до сих пор эффекты crb на эндолизосомную систему или на пространственную организацию этих компартментов в фоторецепторных клетках не описаны.Это исследование поэтому спрашивает, проявляют ли фоторецепторы у мутантов crb изменения в эндолизосомных компартментах в преддегенеративных условиях, когда сетчатка все еще остается морфологически интактной. Данные, представленные в этом исследовании, показывают, что уже задолго до начала дегенерации Arl8, Rab7 и Atg8-несущие эндолизосомные и аутофагосомные компартменты претерпевают изменения в морфологии и положении относительно друг друга в мутантных сетчатках crb . Предполагается, что эти изменения могут быть ранними признаками предрасположенного к дегенерации состояния crb сетчатки.

Агилар-Арагон, М., Флетчер, Г. и Томпсон, Б. Дж. (2019). Двигательные белки цитоскелета Dynein и MyoV направляют апикальный транспорт Crumbs . Dev Biol. Идентификатор PubMed: 31881198 Резюме : Крохи (Crb у Drosophila; CRB1-3 у млекопитающих) являются трансмембранной детерминантой полярности эпителиальных клеток и регулятором передачи сигналов Hippo. Crb обычно локализован в апикальных межклеточных контактах, прямо над слипчивыми соединениями, но как апикальный транспорт Crb регулируется в эпителиальных клетках, остается неясным.В этом исследовании использовался фолликулярный эпителий дрозофилы, чтобы продемонстрировать, что поляризованный транспорт Crb опосредуется транспортом по микротрубочкам моторным белком динеином и вдоль актиновых филаментов моторным белком Myosin-V (MyoV). Блокирование транспорта Crb-содержащих везикул с помощью Dynein или MyoV ведет к накоплению Crb в эндосомах Rab11, а не к апикальной доставке. Заключительные этапы доставки и стабилизации Crb на плазматической мембране требуют комплекса экзоцисты и трех апикальных белков домена FERM — Merlin, Moesin и Expanded, одновременная потеря которых нарушает апикальную локализацию Crb.Соответственно, нокаутирующая делеция Crb FERM-связывающего мотива (FBM) также нарушает апикальную локализацию. Наконец, избыточная экспрессия Crb бросает вызов этой системе, создавая сенсибилизированный фон для идентификации компонентов, участвующих в поляризации цитоскелета, перемещении апикальной мембраны и стабилизации Crb в апикальном домене.

Хван, Дж. Х., Вуонг, Л. Т. и Чой, К. В. (2020). Crumbs, Galla и Xpd необходимы для регуляции кинезина-5 в митозе и росте органов у Drosophila .J Cell Sci. Идентификатор PubMed: 32501288 Сводка : Xeroderma Pigmentosum D (XPD) — это многофункциональный белок, участвующий в транскрипции, репарации ДНК и сегрегации хромосом. У Drosophila Xpd взаимодействует с Crumbs (Crb) и Galla, чтобы регулировать митоз во время эмбриогенеза. Неизвестно, как эти белки связаны с митозом. Это исследование показывает, что Crb, Galla-2 и Xpd регулируют ядерное деление у синцитиального эмбриона путем взаимодействия с Klp61F, митотическим кинезином-5 дрозофилы, связанным с биполярными веретенами.Crb, Galla-2 и Xpd физически взаимодействуют с Klp61F и совместно локализуются на митотических веретенах. Нокдаун любого из этих белков приводит к аналогичным митотическим дефектам. Эти фенотипы восстанавливаются за счет сверхэкспрессии Klp61F, что позволяет предположить, что Klp61F является основным эффектором. Митотические дефекты galla-2 РНКи подавляются сверхэкспрессией Xpd, но не наоборот. Истощение Crb, Galla-2 или Xpd приводит к снижению уровней Klp61F. Снижение функции протеасомы восстанавливает уровни Klp61F и подавляет митотические дефекты, вызванные нокдауном Crb, Galla-2 или Xpd.Кроме того, рост глаз регулируется Xpd и Klp61F. Следовательно, это исследование предполагает, что Crb, Galla-2 и Xpd взаимодействуют для поддержания уровня Klp61F во время митоза и роста органов.

Юнг, Дж., Йом, Э. и Чой, К. В. (2020). Ciao1 взаимодействует с Crumbs и Xpd, чтобы регулировать рост органов у Drosophila . Cell Death Dis 11 (5): 365. Идентификатор PubMed: 32404863 Сводка : Ciao1 является компонентом комплекса сборки цитозольного кластера железа-серы (CIA) вместе с MMS19 и MIP18.Xeroderma pigmentosum группа D (XPD), ДНК-геликаза, участвующая в регуляции клеточного цикла и транскрипции, является мишенью CIA для модификации железо-сера (Fe / S). In vivo функция Ciao1 и Xpd у развивающихся животных изучалась редко. Это исследование показывает, что Ciao1 взаимодействует с Crumbs (Crb), Galla и Xpd, чтобы регулировать рост органов у дрозофилы. Аномальный рост глаза за счет сверхэкспрессии внутриклеточного домена Crb (Crb (intra)) подавляется за счет снижения уровня Ciao1. Потеря Ciao1 или Xpd вызывает аналогичное нарушение роста органов.РНКи-нокдаун как Ciao1, так и Xpd обнаруживает сходные фенотипы, как Ciao1 или только Xpd RNAi, что указывает на их функцию в пути. Дефекты роста, вызываемые Ciao1 RNAi, подавляются сверхэкспрессией Xpd. Ciao1 физически взаимодействует с Crb (intra), Galla и Xpd, поддерживая их генетические взаимодействия. Примечательно, что дефекты Xpd RNAi могут также подавляться сверхэкспрессией Ciao1, что подразумевает взаимную регуляцию между двумя генами. Мутантные клоны Ciao1 в имагинальных дисках показывают пониженные уровни циклина E (CycE) и ассоциированного со смертью ингибитора апоптоза 1 (Diap1).Мутантные клоны Xpd обладают сходным восстановлением CycE и Diap1. Следовательно, нокдаун Ciao1 и Xpd с помощью РНКи показывает повышенную апоптотическую гибель клеток. Кроме того, сверхэкспрессии CycE достаточно для восстановления дефектов роста Ciao1 RNAi или Xpd RNAi. Интересно, что избыточная экспрессия Diap1 в мутантных клонах Ciao1 индуцирует экспрессию CycE, указывая тем самым, что снижение CycE в мутантных клетках Ciao1 является вторичным по отношению к потере Diap1. Взятые вместе, это исследование раскрывает новые роли Ciao1 и Xpd в выживании и росте клеток посредством регулирования уровня Diap1 во время развития органов.

Ciao1 взаимодействует с Crumbs и Xpd для регулирования роста органов у Drosophila

Ciao1 взаимодействует с Crb и Galla

Ранее мы показали, что грубый фенотип глаз, вызванный сверхэкспрессией Crb ^внутри системой Gal4-UAS23 ^{23 23 подавляется уменьшением Galla1 или Galla2 15 . Поскольку белки Galla являются гомологами MIP18 млекопитающих, которые образуют комплекс с Ciao1, мы проверили, имеет ли Drosophila Ciao1 функциональное родство с Galla, проверив его генетическое взаимодействие с Crb intra . Сверхэкспрессия Crb внутри с помощью GMR-Gal4 ( GMR > Crb внутри ) вызывает серьезное огрубление глаз и уменьшение их размера (рис. 1b). Нокдаун Ciao1 в GMR > Crb в состоянии привело к значительному подавлению фенотипа сверхэкспрессии Crb внутри (рис. 1c), что согласуется с подавлением эффектов Crb внутри за счет эффектов или galla2 RNAi .Однако Ciao1 RNAi по GMR-Gal4 в условиях дикого типа не обнаруживали явных дефектов глаз (рис. 2b). Утрата копии Ciao1 дикого типа из-за делеционной мутации (+ / Ciao1 Δ60 , см. Рис. 3a) также привела к подавлению фенотипа Crb внутри глаза (рис. 1d). Фенотип грубых глаз с почерневшими омматидиями подавлялся у ~ 70% популяции за счет Ciao1 RNAi (линия v32020 RNAi) и у 80% населения за счет + / Ciao1 Δ60 (рис. 1д). Уменьшение количества глаз, вызванное сверхэкспрессией Crb внутри , также облегчалось Ciao1 RNAi (v32020) и + / Ciao1 Δ60 (рис. 1e ‘). Чтобы проверить физическое взаимодействие между Ciao1 и Crb, были выполнены анализы GST-pull-down и коиммунопреципитации. Результаты исследования GST показали прямое связывание между Ciao1 и Crb внутри (рис. 1f). Кроме того, V5-Ciao1 коиммунопреципитируется с Crb Myc-intra , что позволяет предположить, что эти два белка образуют комплекс (рис.1г).}

Рис. 1. Сниженный Ciao1 подавляет фенотип Crb ^intra , а Ciao1 взаимодействует с Crb ^intra и Galla.

a — d Генетическое взаимодействие между crb и Ciao1 . a GMR > + контрольные мухи. b Избыточная экспрессия Crb ^внутри посредством GMR-Gal4 ( GMR > Crb ^внутри ) показывает фенотип шероховатости в глазу. c Фенотип сверхэкспрессии частично компенсируется Ciao1 RNAi . d Фенотип Crb ^intra также подавляется мутантом + / Ciao1 ^Δ60 . Шкала 200 мкм ( a — d ). e – e ‘ Количественная оценка частичного восстановления Crb ^{внутри фенотипа грубого глаза} , показанного в b – d . Фенотип «спасения» представлен ( e ) отсутствием / присутствием почерневших омматид на поверхности глаза и ( e ‘) восстановлением размера глаза. n ≥ 17 в каждой группе. Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± s.e.m), и значения p были рассчитаны с использованием теста Стьюдента t . ** p <0,01. f GST pull-down анализ показывает прямое связывание между MBP-Ciao1 и GST-Crb ^внутри . г V5-Ciao1 (Ciao1 ^V5 ) коиммунопреципитирует с Myc-Crb ^intra (Crb ^Myc-intra ) в клетках S2. h MBP-Ciao1 напрямую связывается с GST-Galla1-C и не проявляет связывания с GST-Galla1-N. i Диаграмма полной длины Galla1 и Galla2 и фрагментов Galla1, использованных в h . Galla1 имеет дополнительную N-концевую область, отсутствующую в MIP18. j V5-Ciao1 (Ciao1 ^V5 ) и Myc-Galla1 (Galla1 ^Myc ) коиммунопреципитируют в клетках S2.

Рис. 2: фенотипов Ciao1 RNAi в глазу и крыле.

a — d Эффекты Ciao1 RNAi на глаз взрослого человека. a GMR > + контроль. b Нокдаун Ciao1 GMR-Gal4 не влияет на морфологию глаза взрослого человека. c ey > + контрольный взрослый глаз. d Уменьшение Ciao1 у ey > Ciao1 RNAi мух демонстрирует меньшую и деформированную структуру головы. Шкала 200 мкм ( a — d ). a ‘ — d’ Эффекты Ciao1 RNAi в глазном диске третьего возраста. Глазные диски окрашивали DAPI (серый) и анти-Elav (зеленый).Стрелки указывают положение морфогенетической борозды. (a ’) GMR > + имагинальный диск глаза в качестве контроля. b ‘ GMR > Ciao1 RNAi глазной диск выглядит нормальным. c ′ ey > + контроль. d ‘ ey > Глазной диск личинки Ciao1 RNAi показывает уменьшение размера с потерей вентральной части. e – f ′ Окрашивание глазных дисков полосой. Пунктирной линией отмечена дорсовентральная (DV) средняя линия. ey > + контроль показывает нормальный шаблон DV ( e — e ′ ′ ). ey > Ciao1 RNAi глазной диск обнаруживает преимущественную потерю вентрального домена ниже границы DV ( f – f ′ ′ ). Масштабная линейка, 50 мкм ( a ′ — f ′ ′ ). г Количественные данные показывают, что ey > Ciao1 RNAi глаза уменьшены примерно до 40% от своего нормального размера. n = 10. h — l Эффекты Ciao1 RNAi в крыле при 29 ° C. (h) ptc > + управляющее крыло. i ptc > GFP не влияет на крыло. j Нокдаун Ciao1 ptc-Gal4 показывает сокращение между областью продольной жилки 3 (L3) и жилки 4 (L4) крыла. Стрелки в h — j указывают ширину между L3 и L4. Масштабная линейка, 100 мкм ( h – j ). k Количественная оценка длины, измеренной между жилкой 3 крыла и жилкой 4. n ≥ 12 в каждой группе. l — o Влияние и > Ciao1 RNAi на окрашивание Ph4 и размер домена и . ru > GFP Диск управляющего крыла л GFP. л ′ Ph4. л ′ ′ Слияние. m ru > GFP, диски крыльев Ciao1 RNAi показывают значительное снижение GFP, экспрессирующего область и . м ′ Ph4. м ′ ′ Слияние. Шкала, 50 мкм ( l — м ′ ′ ). n Количественная оценка области экспрессии GFP и > GFP, Ciao1 RNAi крыльевых дисков. o Отношение относительного окрашивания Ph4 в передне-задней области крыльевых дисков количественно определяют между и > GFP контроль и и > GFP, Ciao1 RNAi крыльевых дисков. Относительное окрашивание Ph4 в переднем и заднем доменах — это количество точек Ph4 в передней (или задней) части, разделенное на переднюю (или заднюю) область, соответственно. n ≥ 12 в каждой группе. Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± с.e.m.), а значения p были рассчитаны с использованием теста Стьюдента t . NS не значимо ( p > 0,05). * p <0,05. ** p <0,01. *** р <0,001.

Рис. 3. Получение и характеристика мутанта с делецией Ciao1 .

a – c Создание и проверка мутанта с делецией Ciao1 . a Выделение мутанта с делецией Ciao1 ^Δ60 путем неточного вырезания P {Epgy}, вставленного в 5’UTR Ciao1 в 36-м положении от сайта начала транскрипции (+1). Мутант Ciao1 ^Δ60 имеет делецию 926 п.н. ниже сайта вставки Р-элемента. b + / Ciao1 ^Δ60 взрослых гетерозиготных мух (№ 1 и № 2, каждый образец выделен из двух взрослых гетерозиготных мух) показали снижение уровня Ciao1. c Количественная оценка полос вестерн-блоттинга b . n = 4 взрослых мухи. Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± s.e.м), а значения p были рассчитаны с использованием критерия Стьюдента t . * p <0,05. ( d — f ) мутантных клонов Ciao1 с мутацией Minute и без нее. d FRT42D контрольных клонов, индуцированных hsFLP. e Мутантные клоны Ciao1 . Были получены только клоны небольшого размера. f Мутантные клоны Ciao1 были больше на фоне M / +.Масштабная линейка, 50 мкм. Генерация мутантных клонов Ciao1 с помощью EGUF . г EGUF / + контрольный взрослый глаз. h Фенотип глаза взрослого человека мутантных клонов Ciao1 , полученных с помощью EGUF . Масштабная линейка 200 мкм.

Информация из базы данных взаимодействий Drosophila предполагает, что Ciao1 и Galla1 и 2 взаимодействуют ²⁴ . Для дальнейшего выявления взаимодействующей природы этих генов были проведены эксперименты по связыванию белков Ciao1 и Galla.Результаты показали физическое взаимодействие Ciao1 с Galla1, но гораздо более слабое взаимодействие с Galla2 с помощью анализа GST pull-down (рис. S1a). Galla1 и Galla2 консервативны, но Galla1 имеет дополнительный N-концевой участок, который отсутствует в Galla2 / MIP18 ¹⁵ . Чтобы идентифицировать связывающую область Ciao1, физическое взаимодействие было протестировано с N-концом (aa 1–110) и консервативным C концом (aa 111–218) ¹⁵ (Fig. 1i). Ciao1 напрямую связывается с С-концевой консервативной областью Galla1, но не с N-концевой областью (рис. 1ч). Кроме того, анализ co-IP с использованием клеток S2 показал постоянное взаимодействие между Myc-Galla1 и V5-Ciao1 (рис. 1j).

Ciao1 необходим для развития органов

Чтобы изучить роль Ciao1 в развитии, мы проанализировали фенотипы частичной потери функции, используя две независимые линии Ciao1 RNAi (v32020 и v105939), которые демонстрируют сходные фенотипы. Мы сосредоточились на эффектах Ciao1 RNAi , чтобы понять основу генетического взаимодействия между crb и Ciao1 в глазу.Развивающийся глазной диск у личинок третьего возраста состоит из недифференцированных, пролиферирующих передних клеток и задних клеток, которые в основном дифференцируются ^25,26 . Как уже упоминалось, Ciao1 RNAi в дифференцирующихся клетках позади морфогенетической борозды не обнаруживает очевидных дефектов внешней морфологии взрослого глаза (Fig. 2b). Таким образом, Ciao1 может не быть критически необходимым для дифференцировки сетчатки. Напротив, аномалии наблюдались при использовании ey-Gal4 , который управляет экспрессией Gal4 преимущественно в недифференцированной области глазного диска. РНКи ey-Gal4 ( ey > Ciao1 RNAi ) приводили к частичной летальности на стадии куколки (61% популяции, n = 82), но у всех выживших мух наблюдалось сильное сокращение глаз (рис. 2d) . Размер глаз ey > Ciao1 RNAi был уменьшен примерно до 40% от нормального размера с деформированными структурами головы-глаза (Fig. 2g). Чтобы наблюдать эффекты развития, мы исследовали глазные диски личинок третьего возраста. Глазные диски демонстрировали коррелирующий фенотип с дефектными глазами взрослых, когда глазные диски были меньше по размеру, часто с преимущественной потерей вентральной области (рис.2г ‘). Глазные диски окрашивали антителом Bar, маркером для предшественников фоторецепторов R1 и R6, чтобы различить дорсальный и вентральный домены. В соответствии с формой взрослых глаз, Ciao1-истощенные глазные диски обнаруживают более серьезную потерю вентрального домена (Fig. 2f-f ′ ′). Следовательно, результаты дополнительно подтверждают, что Ciao1 необходим для роста глазных дисков на ранних личиночных стадиях.

Кроме того, когда Ciao1 RNAi скрещивали с ptc-Gal4 при 29 ° C, целевая область крыла вдоль передне-задней границы между жилкой 3 и 4 уменьшалась (рис.2h – k). В случае en-Gal4 мы исследовали диски крыльев до гибели куколки. Контроль показал экспрессию GFP в интактном заднем отделе крыльевых дисков. Однако, когда домен en крылового диска был сбит с помощью Ciao1 RNAi , область экспрессии GFP резко снижалась (Fig. 2m – n). Окрашивание Ph4 было определено количественно, и наблюдалось соотношение между передней и задней областями. en > Крыловые диски Ciao1 RNAi показали аналогичное соотношение A / P сигналов Ph4 по сравнению с отношением A / P и > GFP (рис.2o). Взятые вместе, результаты указывают на критическую роль Ciao1 в росте различных органов.

Чтобы проверить, может ли уменьшение размера органа за счет Ciao1 RNAi возникнуть из-за изменений в размере клеток, глазные диски, содержащие мутантных клонов Ciao1 , окрашивали на маркер соединения адгезивов, Armadillo. Результаты показали, что размер клеток в мутантных клонах Ciao1 не отличался по сравнению с размером клеток дикого типа (рис. S2a – b ′ ′). Кроме того, наблюдались крылья взрослых особей ptc > Ciao1 RNAi .Используя преимущество фенотипа ptc > Ciao1 RNAi , площадь образца была выбрана между L3 и L4 для измерения плотности клеток (рис. S2c – e). Число клеток в выбранной области сравнивали между ptc > + , ptc > GFP и ptc > Ciao1 RNAi . Поскольку каждая клетка крыла дает один волос, количество волос в данной области служит индикатором размера клетки. Результаты показали небольшую разницу в плотности клеток (рис.S2e). Таким образом, оказывается, что уменьшение размера органа из-за потери функции Ciao1 не происходит из-за уменьшения размера клеток.

Мутантные клетки Ciao1 имеют недостатки роста

Чтобы изучить эффекты потери функции Ciao1, мы провели скрининг на мутантов Ciao1 путем неточного иссечения P-элемента P {EPgy2} ¹¹⁰⁷⁶ , вставленного в 5 ′ UTR из Ciao1 . В результате мы выделили делеционный мутант Ciao1 ^Δ60 , который имеет делецию 926 п.н. ниже сайта вставки Р-элемента (рис.3а). Этот мутант показал эмбриональную летальность, подтверждая, что Ciao1 важен для развития и жизнеспособности. Эта летальность была устранена повсеместной экспрессией Ciao1 из трансгена UAS-Ciao1 . Антитело Ciao1 получали, как описано в разделе «Материалы и методы», и полученные антитела тестировали на его специфичность в тканях. Ciao1 ^Δ60 мутантные клоны показали сильное снижение уровня Ciao1 (рис. S3a – a ′ ′). Также уровень Ciao1 был снижен у Ciao1 ^Δ60 / + взрослых гетерозиготных мух (рис.3б – в). Ciao1 мутантных клонов, индуцированных тепловым шоком ( hs ) Flip рекомбиназа ( hsFLP ) ²⁷ были небольшими и часто терялись (рис. клетки дикого типа. Таким образом, мы использовали метод Minute ²⁸ , чтобы дать клону преимущество в росте. Используя этот метод, можно было увеличить размер мутантных клонов, сравнимых с размером Ciao1 ⁺ клонов дикого типа (рис.3е). Таким образом, мутантные клетки Ciao1 имеют недостатки роста по сравнению с окружающими клетками дикого типа. Затем мы сгенерировали мутантных клонов Ciao1 с использованием метода EGUF / hid ²⁹ . Большинство клеток мозаичных глаз, полученных с помощью этого метода, представляют собой мутантные клетки Ciao1 , поскольку клетки дикого типа элиминируются за счет сверхэкспрессии проапоптотического гена hid . Глаза, содержащие клонов Ciao1 EGUF , были сильно уменьшены (Fig. 3g-h), что указывает на то, что мутантные ткани не могут расти до нормального размера даже в отсутствие конкурирующих клеток дикого типа.Взятые вместе, эти данные подтверждают, что Ciao1 необходим для роста тканей и клеточной конкуренции во время развития.

Фенотип Ciao1 RNAi подавляется Xpd и наоборот

Домен Fe / S человеческого XPD консервативен в Drosophila Xpd, но неизвестно, имеет ли Ciao1 функциональное отношение к Xpd in vivo. Чтобы проверить их взаимосвязь, мы сначала проверили физическое взаимодействие Ciao1 и Xpd. Анализ GST pull-down показал связывание между Ciao1 и Xpd (рис.4а). Кроме того, V5-Ciao1 коиммунопреципитирует с Flag-Xpd, предполагая, что они образуют белковый комплекс (рис. 4b).

Рис. 4: Взаимодействие между Ciao1 и Xpd .

нисходящий анализ GST показывает прямое связывание между MBP-Xpd и GST-Ciao1. b Ciao1 ^V5 коиммунопреципитирует с Xpd ^Flag в клетках S2. c – g ‘ Эффекты спасения фенотипа малых глаз за счет сверхэкспрессии Ciao1 и Xpd. c Фенотип малых глаз ey > Xpd RNAi . d Двойное истощение Xpd и Ciao1 с помощью РНКи не показывает значительного усиления фенотипа глаза с единственной РНКи. e Спасательный эффект ey > Xpd RNAi за счет сверхэкспрессии Ciao1. f ey > Мухи Ciao1 RNAi обнаруживают фенотип малых глаз. g-g ‘ ey > Фенотип Ciao1 RNAi подавляется сверхэкспрессией Xpd, но эффект спасения варьирует от частичного до почти полного восстановления. г Частичное спасение. г ′ Почти полное спасение фенотипа маленьких глаз. Шкала 200 мкм ( c – g ′ ). h Количественная оценка однократного или двукратного истощения Ciao1 и Xpd. n = 10. i Количественные данные о фенотипе, спасенном от сверхэкспрессии Ciao1 или Xpd. ey > Xpd RNAi, Ciao1 , n = 48. ey > Ciao1 RNAi, Xpd , n = 64. Ciao1 RNAi и Xpd RNAi сокращенно обозначаются как Ciao1i и Xpdi соответственно. Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± s.e.m), и значения p были рассчитаны с использованием теста Стьюдента t . NS не значимо ( p > 0,05). *** р <0,001.

Генетическое тестирование дополнительно выявило функциональное взаимодействие между Ciao1 и Xpd. Фенотип частичной потери функции Xpd изначально дал нам ключ к разгадке того, что он может играть роль в регуляции роста. Xpd RNAi мух, управляемых ey-Gal4 , показали меньший размер глаза, а потомство, управляемое nub-Gal4 или MS1096-Gal4 , показало меньшие, деформированные крылья (рис. S3c – e). Тестирование с другими линиями Gal4, такими как en-Gal4, ptc-Gal4 и ap-Gal4 , показало летальность куколки. Фенотипы малых глаз Ciao1 RNAi и Xpd RNAi на ey-Gal4 существенно не различались (рис. 4c, f, h), хотя диапазон был больше для ey > Ciao1 RNAi .Двойной нокдаун Ciao1 и Xpd не выявил ни подавления, ни усиления фенотипа (Fig. 4d, h), подтверждая, что Ciao1 и Xpd могут функционировать по одному и тому же пути. Это привело нас к тестированию, может ли сверхэкспрессия Ciao1 спасти глазной фенотип Xpd RNAi и наоборот. Мы наблюдали, что сверхэкспрессия Xpd может спасти Ciao1 RNAi глаз в 77% потомков, из которых примерно у трети обнаружено почти полное спасение (Fig. 4g-g ‘). Сверхэкспрессия Ciao1 привела к более эффективному спасению Xpd RNAi (рис.4д, и). Количественный анализ показывает, что избыточная экспрессия Ciao1 значительно восстанавливает истощенные по Xpd глаза, показывая восстановление до своего полного размера (Fig. 4i).

Потеря Ciao1 или Xpd снижает CycE

Уменьшение размеров органов на Ciao1 RNAi или мутация предполагает, что Ciao1 необходим для пролиферации клеток в процессе развития. Поэтому мы сосредоточили внимание на значимости пролиферации клеток, проверив уровень регулятора клеточного цикла CycE в мутантных клетках Ciao1 . В глазных дисках CycE слабо экспрессируется во всех клетках, но его экспрессия усиливается во второй митотической волне, расположенной вдоль нескольких столбцов омматидий позади морфогенетической борозды ³⁰ .Контрольные клоны дикого типа не показали никаких изменений в уровне CycE (рис. S4a – a ′ ′). Напротив, результаты иммуноокрашивания показали последовательное снижение CycE в большинстве крупных мутантных клонов Ciao1 (Fig. 5a – a »).

Рис. 5. Снижение CycE в мутантных клонах Ciao1 и Xpd и эффекты восстановления фенотипа Ciao1 и Xpd RNAi с помощью CycE.

a – a » Мутантные клоны Ciao1 демонстрируют пониженный уровень CycE (стрелки). Ciao1 мутантных клонов в глазном диске (стрелки). a GFP. a ′ CycE. a ′ ′ Слияние. b – b ′ ′ Сниженное окрашивание CycE мутантных клонов Xpd в диске крыла (стрелки). b GFP. b ′ CycE. b ′ ′ Слияние. Масштабная линейка, 50 мкм ( a — b ′ ′ ). c ey > + контроль. d – e Фенотип малых глаз d ey > Ciao1 RNAi и e ey > Xpd RNAi . f ey > CycE . г – ч Спасательный эффект за счет гиперэкспрессии CycE г ey > Ciao1 RNAi и h ey > Xpd RNAi . i Количественная оценка теста CycE rescue. n = 10. Ciao1 RNAi и Xpd RNAi сокращенно обозначаются как Ciao1i и Xpdi соответственно. Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± с.e.m.), а значения p были рассчитаны с использованием теста Стьюдента t . NS не значимо ( p > 0,05). *** р <0,001.

Супрессия Ciao1 RNAi фенотипа глаза за счет сверхэкспрессии Xpd и наоборот предполагает, что Ciao1 и Xpd необходимы для родственной функции в развитии органов. По результатам Ciao1, Xpd может также потребоваться для достижения нормального уровня CycE. Клональный анализ показал подавление CycE в большинстве мутантных клонов Xpd (рис.5б – б ′ ′). Из этих результатов можно сделать вывод, что Ciao1 и Xpd необходимы для нормального уровня CycE, чтобы способствовать прогрессированию клеточного цикла.

CycE спасает фенотипы

Ciao1 и Xpd RNAi

Наши данные выше предполагают, что и Ciao1, и Xpd необходимы для надлежащего уровня CycE. Таким образом, мы проверили, является ли снижение CycE главным образом ответственным за дефекты роста, вызванные Ciao1 или Xpd RNAi . Во-первых, мы исследовали, можно ли восстановить паттерн CycE в обедненных Ciao1 глазных дисках за счет сверхэкспрессии Xpd и наоборот.Глазные диски ey > Xpd RNAi или ey > Ciao1 RNAi были уменьшены и деформированы по форме с аномальным окрашиванием CycE (рис. S5b, d). Примечательно, что окрашивание CycE глазных дисков не имело своей характерной экспрессии вдоль второй митотической волны. Интересно, что образец окрашивания CycE и размер были восстановлены с избыточной экспрессией Ciao1 в условиях нокдауна Xpd (фиг. S5c). Сходным образом сверхэкспрессия Xpd восстанавливала нормальный паттерн CycE в дисках глаза, лишенных Ciao1 (рис.S5e). Во-вторых, мы проверили, достаточно ли CycE для восстановления фенотипа уменьшения глаз у Ciao1 или Xpd RNAi . Мы обнаружили, что сверхэкспрессия CycE полностью спасает фенотип маленьких глаз на фоне Ciao1 и Xpd RNAi (Fig. 5d-i).

Потеря Ciao1 или Xpd приводит к апоптозу и снижению экспрессии Diap1

Размер органа зависит от выживаемости клеток, а также от пролиферации. Чтобы напрямую проверить, является ли уменьшение органа следствием потери клеток, мы наблюдали изменения активности каспаз, окрашивая диски антителом против расщепленного Dcp-1.Диски контрольных крыльев не обнаруживали заметного окрашивания Dcp-1 (рис. 6a – a ′ ′ ′). Напротив, нокдаун Ciao1 в ptc > Ciao1 RNAi обнаруживает повышенную апоптотическую активность в пограничной области A / P у ~ 64% популяции (рис. 6b ′ ′, n = 14). Такое увеличение апоптотической активности также наблюдалось на фоне нокдауна Xpd ptc > Xpd RNAi примерно у 76% популяции (рис. 6c ′ ′, n = 17).

Рис. 6: Апоптотическая гибель клеток и снижение уровня Diap1 на фоне снижения Ciao1 и Xpd.

a — c » ‘ Апоптотическая активность в ptc > Ciao1 RNAi и ptc > Xpd RNAi крыловых дисков, окрашенных DAPI, анти-GFP и анти-расщепленным DAPI указано. a — a ′ ′ ′ Control ptc > GFP Диск крыла. Окрашивание Dcp-1 не обнаруживается. b — b ′ ′ ′ ptc > Ciao1 RNAi . Окрашивание Dcp-1 повышено. c — c ′ ′ ′ ptc > Xpd RNAi крыловой диск.Окрашивание Dcp-1 повышено. d — d » Окрашивание Diap1 мутантных клонов Ciao1 . d GFP. d ‘Окрашивание Diap1 показывает уменьшение (стрелки). d ′ ′ Слияние. e — e ′ ′ Окрашивание Diap1 мутантных клонов Xpd . и GFP. e ′ Diap1. e ′ ′ Слияние. Шкала 50 мкм ( a – e ′ ′ ).

Основываясь на результатах того, что потеря Ciao1 и Xpd способствует апоптозу, мы исследовали уровень Diap1, ингибитора каспаз, необходимого для выживания клеток ^31,32 .В самом деле, мы обнаружили пониженные уровни Diap1 в большинстве крупных мутантных клонов Ciao1 в глазных дисках (Fig. 6d-d ′ ′). В контрольных клонах дикого типа такого изменения не наблюдалось (рис. S4b – b »). Кроме того, Xpd мутантных клонов в крыльевых дисках также обнаруживают снижение уровней Diap1 (Fig. 6e-e ′ ′).

Затем мы проверили, может ли ингибирование апоптоза спасти фенотип глаза Ciao1 или Xpd RNAi . Сверхэкспрессия Diap1 или ингибитора апоптоза p35 ³³ не влияла на размер глаза на фоне дикого типа (рис.7г, ж, к). Напротив, фенотип маленьких глаз с помощью Ciao1 RNAi д. Подавляться за счет сверхэкспрессии Diap1 (Fig. 7e, j). Однако такой эффект подавления не наблюдался для глаз взрослых Xpd RNAi (рис. 7f, j). Интересно, что сверхэкспрессия p35 м. Ни значительно подавлять фенотип глаз Ciao1 RNAi или Xpd RNAi (Fig. 7h – j). Следовательно, и Ciao1, и Xpd необходимы для поддержания нормальной экспрессии Diap1, а избыточной экспрессии Diap1 достаточно для спасения глазных фенотипов Ciao1 RNAi , но не Xpd RNAi .

Рис. 7. Подавление Ciao1 и Xpd RNAi с помощью CycE, Diap1 или p35.

a ey > + control. Фенотип малых глаз b ey > Ciao1 RNAi и c ey > Xpd RNAi . d ey > Diap1 . Эффект спасения за счет сверхэкспрессии Diap1 e ey > Ciao1 RNAi и f ey > Xpd RNAi . г ey > p35 . Сверхэкспрессия p35 не имеет эффекта спасения в h ey > Ciao1 RNAi и i ey > Xpd RNAi . Шкала 200 мкм (a – i ). j Количественная оценка теста на спасение всех вышеупомянутых генотипов. n = 10. Ciao1 RNAi и Xpd RNAi сокращенно обозначаются как Ciao1i и Xpdi соответственно.Все данные представляют собой среднее значение и стандартную ошибку среднего (± s.e.m), и значения p были рассчитаны с использованием теста Стьюдента t . NS не значимо ( p > 0,05). *** р <0,001.

Поскольку фенотип Ciao1 RNAi может быть подавлен сверхэкспрессией Diap1, возможно, что избыточная экспрессия Diap1 может позволить мутантным клеткам Ciao1 восстановить нормальный уровень CycE. Во-первых, мы подтвердили, что сверхэкспрессия Diap1 не влияет на уровень CycE в нормальных дисках (рис.8б – б ′ ′). Затем мы исследовали эффекты сверхэкспрессии Diap1 в Ciao1 ^Δ60 мутантных клонах с использованием техники мозаичного анализа MARCM ³⁴ . Контроль Ciao1 ⁺ клонов показал нормальный паттерн CycE, а мутантных клонов Ciao1 , полученных с помощью метода MARCM, показали снижение CycE (фиг. 8c ’, d’). Однако был повышенный уровень CycE в клонах Ciao1 ^Δ60 , экспрессирующих Diap1 (рис.8д ‘). Следовательно, избыточная экспрессия Diap1 может индуцировать экспрессию CycE в отсутствие Ciao1, что согласуется с частичным восстановлением фенотипа Ciao1 RNAi за счет избыточной экспрессии Diap1. Эти результаты предполагают, что Ciao1 может не требоваться для экспрессии CycE и что снижение CycE в клонах Ciao1 может быть связано с уменьшением Diap1.

Фиг. 8: Сверхэкспрессия Diap1 увеличивает уровень CycE в клонах Ciao1 MARCM.

a – b ′ ′ Окрашивание GFP и CycE контроля ptc > GFP и ptc > Diap1 , как указано. a – a ′ ′ Диск крыла управления. б – б ′ ′ ptc > Diap1 . Сверхэкспрессия Diap1 не влияет на уровень CycE. c Контрольные клоны дикого типа, маркированные GFP. d – d » клонов MARCM мутанта Ciao1 . Окрашивание CycE снижено в мутантных клонах (стрелка в d ‘). e – e » клонов MARCM мутантов Ciao1 с экспрессией Diap1. Окрашивание CycE повышено в мутантных клонах при экспрессии Diap1 (стрелки в e ‘).Шкала 50 мкм ( a – e ′ ′ ).

Полное руководство по использованию хлебных крошек на веб-сайтах + примеры

Первоначально это сообщение было написано Ником Бабичем на babich.biz. Ник — разработчик программного обеспечения, увлеченный пользовательским интерфейсом.

Breadcrumbs (или навигационная цепочка) — это дополнительная навигационная система, которая показывает местоположение пользователя на сайте или в веб-приложении. Термин пришел из сказки Гензель и Гретель, в которой главные герои создают след из панировочных сухарей, чтобы вернуться в свой дом.

В этой статье мы исследуем использование хлебных крошек на сайтах и ​​обсуждаем некоторые передовые методы применения цепочек навигации к вашему собственному веб-сайту или приложению. Настоятельно рекомендуется прочитать!

Изображение предоставлено: lostyourmarbles

Как и в сказке, посетители должны знать свое местоположение в иерархической структуре сайта, чтобы, возможно, перейти на более высокий уровень иерархии.

Навигация по хлебным крошкам

Панировочные сухари служат эффективным наглядным пособием, указывающим местоположение пользователя в иерархии сайта.Это свойство делает навигацию по хлебным крошкам отличным источником контекстной информации для пользователей и помогает им находить ответы на следующие вопросы:

• Где я? «Хлебные крошки» информируют посетителей об их местоположении по отношению ко всей иерархии сайта.
• Куда мне пойти? «Хлебные крошки» улучшают поиск разделов и страниц сайта. Структуру сайта легче понять, когда она размещена в виде хлебных крошек, чем если она помещена в меню.
• Мне туда? «Хлебные крошки» сообщают о ценности контента и стимулируют просмотр (например, посетитель сайта электронной коммерции может попасть на страницу продукта, продукт может не подходить, но посетитель может захотеть просмотреть другие продукты из той же категории). Это, в свою очередь, снижает общий показатель отказов сайта.

Уменьшает количество действий

С точки зрения удобства использования, хлебных крошек сокращают количество действий, которые посетитель должен совершить, чтобы перейти на страницу более высокого уровня.Вместо использования кнопки браузера «Назад» или основной навигации по сайту для возврата на страницу более высокого уровня посетители могут использовать хлебные крошки.

Занять минимум места

Компактный механизм, не занимающий много места на странице, поскольку это просто текст со ссылками в горизонтальной строке. Преимущество состоит в том, что они практически не оказывают отрицательного воздействия на перегрузку контента.

Пользователи не страдают от проблем из-за панировочных сухарей

Люди могут упустить этот небольшой элемент дизайна, но они никогда не поймут неверно следы хлебных крошек и не испытают проблем с их управлением.

Когда следует использовать панировочные сухари?

Отличный способ определить, выиграет ли сайт от навигации по хлебным крошкам, — это построить карту сайта или диаграмму, представляющую структуру навигации сайта, а затем проанализировать, улучшат ли хлебные крошки возможность навигации внутри категорий и между ними:

• Вы, , должны использовать хлебные крошки, когда у вас есть большой объем контента, организованный в строгую линейную структуру с определенными категориями.Отличный сценарий — веб-сайт электронной коммерции, на котором большое количество продуктов сгруппировано в логические категории.
• Вы, , не должны использовать хлебные крошки для одноуровневых веб-сайтов, которые не имеют логической иерархии или группировки.

Виды панировочных сухарей

Панировочные сухари могут быть на основе: местоположения, пути и атрибута.

Местонахождение

Панировочные сухари на основе местоположения представляют собой структуру сайта.Они помогают посетителям понять и ориентироваться в иерархии вашего сайта, которая имеет несколько уровней (обычно более двух уровней). Этот тип хлебных крошек очень полезен для посетителей, которые заходят на сайт на более глубоком уровне из внешнего источника (например, из результатов поисковой системы).

Навигация на основе местоположения. Изображение предоставлено: marketingland

В приведенном ниже примере (от BestBuy) каждая текстовая ссылка предназначена для страницы, которая на один уровень выше, чем правая.

Хлебная крошка на основе местоположения от BestBuy

На основе пути

Навигационные цепочки на основе пути (также известные как «исторический след») показывают весь путь, пройденный пользователем для перехода на определенную страницу.Этот тип хлебных крошек обычно создается динамически. Иногда хлебные крошки на основе путей могут быть полезны, но чаще всего они сбивают с толку — посетители часто просматривают страницы очень быстро, перепрыгивая с одной страницы на другую. Такой извилистый путь не очень полезен для пользователя и может быть легко заменен кнопкой « Назад » в браузере. Наконец, исторический след бесполезен для посетителей, которые попадают прямо на страницу в глубине сайта.

Ниже приведен пример навигационной цепочки на основе пути ссылки , которые показывают два пути для перехода к целевой странице.

Навигация на основе пути. Изображение предоставлено: Oracle

на основе атрибутов

Навигационная цепочка на основе атрибутов перечисляет категории для конкретной страницы или наиболее часто встречающегося продукта — так как этот вид навигации полезен для сайтов электронной коммерции. Этот вид панировочных сухарей помогает посетителям понять взаимосвязь продуктов и предлагает другой подход.

Навигация на основе атрибутов. Изображение предоставлено: marketingland

Например, в TM Lewin цепочки навигации показывают атрибуты элементов, отображаемых на определенной странице:

На этой странице отображаются все костюмы с атрибутом «Slim Fit».Изображение предоставлено: T.M. Левин

Иерархия или история?

Практическое правило для хлебных крошек — показывать иерархию сайта, а не историю пользователя. Таким образом, используйте хлебные крошки на основе местоположения / атрибутов, а не на основе пути.

Лучшие методы навигации по хлебным крошкам

При разработке навигации по хлебным крошкам помните о следующих моментах. Навигация по хлебным крошкам — это дополнительный помощник, который поможет пользователям улучшить работу вашего сайта.

Панировочные сухари как дополнительная навигация

Навигация по хлебным крошкам должна рассматриваться как дополнительная функция, а не должна заменять эффективные основные навигационные меню .Имейте в виду, что это удобная функция; вторичная схема навигации; альтернативный способ навигации по вашему веб-сайту.

Apple использует навигацию по хлебным крошкам для поддержки основной навигации

Не связывать текущую страницу с помощью хлебных крошек

Последний элемент в цепочке навигации (местоположение текущего пользователя) является необязательным — если вы хотите отобразить его, убедитесь, что он не доступен для нажатия или нажатия. Поскольку пользователи уже находятся на странице, нет никакого смысла добавлять ссылку текущей страницы в навигацию по хлебным крошкам.

Используйте разделители

Самый узнаваемый символ для разделения ссылок в цепочках навигации — это символ «больше чем» (>). Как правило, для обозначения иерархии используется знак > , как в формате Родительская категория> Дочерняя категория. Другие используемые символы: стрелки, указывающие вправо (→), угловые кавычки (») и косые черты (/). Выбор зависит от эстетики сайта и типа используемой панировки:

Изображение предоставлено: Dribbble

Выберите размер и набивку

Тщательно продумайте размер мишени и заполнение при проектировании.Между различными уровнями хлебных крошек должно быть достаточное расстояние. В противном случае людям может быть сложно их использовать, особенно в мобильном интерфейсе. Но в то же время вы не хотите, чтобы хлебные крошки доминировали на странице, поэтому они должны быть менее заметными, чем основное меню навигации.

Не делайте его центром дизайна

Вы не должны использовать необычные шрифты или яркие цвета, потому что они превзойдут саму цель использования хлебных крошек. Навигация с помощью хлебных крошек не должна быть первым элементом, который привлекает внимание пользователя при переходе на страницу.Приведенная ниже навигационная цепочка неплохая, но слишком привлекательная и может отвлекать посетителей от основной навигации и основного контента.

Изображение предоставлено: Dribbble

Google не делает навигацию по хлебным крошкам привлекательной, но пользователи могут легко ее найти и использовать.

Заключение

Все, что делают хлебные крошки, — это облегчает посетителям перемещение по сайту, при условии, что его содержание и общая структура имеют смысл. Это одна из немногих простых вещей, которые делают работу с сайтом удобнее и удобнее для пользователей.И этого достаточно для чего-то, что занимает всего одну строчку в дизайне.

Белки Crumbs регулируют многослойное развитие сосудов сетчатки, необходимое для зрения

Основные моменты

•

Экспрессия белков Crumbs сильно изменяется во время развития сосудов сетчатки.

•

Белки Crumbs регулируют развитие глубоких и промежуточных капиллярных сплетений.

•

Потеря белков крохи вызывает нарушение развития сосудов сетчатки.

•

Потеря белка крохи впоследствии приводит к кровоизлиянию в сетчатку и дисфункции нейронов.

•

Белки Крамбса контролируют ангиогенез сетчатки путем регулирования VEGFA и MMP-3.

Abstract

Белки Crumbs — это трансмембранные белки, которые регулируют клеточную апико-базальную полярность. У животных, несущих мутировавший crb1 , наблюдаются сосудистые аномалии сетчатки; эта мутация связана с прогрессирующей дегенерацией сетчатки с накоплением интраретинальной цистоидной жидкости у людей.Это исследование было направлено на оценку потенциальной роли белков крохи в развитии и поддержании сосудов сетчатки. Мы продемонстрировали, что гомологи крохи (CRB) по-разному экспрессировались и резко менялись во время развития сосудов сетчатки у мышей. Интравитреальная инъекция миРНК CRB1 и CRB2 вызвала задержку развития глубоких капиллярных сплетений и преждевременное развитие промежуточных капиллярных сплетений, что привело к нарушению целостности сосудов. Однако анализ микрожидкостного чипа с использованием эндотелиальных клеток сетчатки человека показал, что CRB не влияют напрямую на ангиогенез сетчатки in vitro.CRB контролируют ангиогенез сетчатки путем регулирования экспрессии фактора роста эндотелия сосудов нейроглии-A (VEGFA) и матриксной металлопротеиназы-3. Эти результаты демонстрируют ключевую роль CRB в обеспечении критической нейротрофической поддержки посредством развития и поддержания нормальной многоуровневой сосудистой сети. Это означает, что сохранение CRB и восстановление многослойных сосудистых сетей сетчатки могут быть новыми целями для предотвращения угрожающих зрению заболеваний сетчатки.

Ключевые слова

Crumbs protein

Retina.ангиогенез

Комплекс глубоких сосудов

Клетка Мюллера

Аббревиатуры

SCP

поверхностное капиллярное сплетение

ICP

промежуточное капиллярное сплетение

VEGF

© Фактор роста эндотелия сосудов

Полный текст статьи 9Citing 9Citing статьи . Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

crb — Протеиновые крошки-предшественники — Drosophila melanogaster (Плодовая муха)

9208 9208 9208 GlcNAc (GlcNAc …..) аспарагин 92124 Disulfide 9023 9204

Disulfide Disulfide ↔ 440

420 9128 Bond ^{i 9} 920ylation 920ylation связано (GlcNAc…) аспарагин Disulfide20 Disulfide ↔ 1007 9c2019 N-connected..) аспарагин ⁱ 4 ^{29 Disulfide} Disulfide ↔ 1847 Disulfide ↔ 1886⁸

^{92929 Disulfide}29

7 9c2019 N-connected..) аспарагин

Фосфорилирован в цитоплазматическом домене.

Ключ функции	Позиция (я)	Описание Действия	Графический вид	Этот подраздел раздела «PTM / Обработка» обозначает присутствие N-концевого сигнального пептида. Подробнее … Сигнальный пептид i	1 — 88	Добавить BLAST		88
В этом подразделе раздела «PTM / Обработка» описывается протяженность полипептидной цепи в зрелом белке после процессинга или протеолитического расщепления. Подробнее … Цепочка i PRO_0000007499	89 — 2146	Белковые крошки Добавить BLAST		2058
Функциональный ключ	Позиция (я)	Описание Действия	Длина
Этот подраздел PTM / Processing определяет положение и тип каждой ковалентно присоединенной гликановой группы (моно-, ди- или полисахарид). Подробнее … Гликозилирование i	94	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Гликозилирование i	196	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Гликозилирование i	236		1
Гликозилирование i	237	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Этот подраздел раздела PTM / Processing «: / help / ptm_processing_section описывает положения остатков цистеина, участвующих в дисульфидных связях. Подробнее .. . Дисульфидная связка i	269 ↔ 280	Подтвержденная вручную информация, созданная автоматической системой аннотаций UniProtKB. Подробнее… Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	274 ↔ 289	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
291 ↔ 300	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	308 ↔ 319		209 9047 9047 9047
Дисульфидная связь i	313 ↔ 329	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i 334			i 334			я
Гликозилирование i	334	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	350 ↔ 361	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
↔ 372	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	374 ↔ 383	Ручное утверждение в соответствии с правилами 9212	20 947 9017 906 Дисульфидная связь i	390 ↔ 401	Ручная установка в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	395 0 9000
Гликозилирование i	398	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	412 ↔ 422	Ручная установка в соответствии с правилами i
Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	434 ↔ 449	Ручное утверждение в соответствии с правилами 920		9017 906 Дисульфидная связь i	451 ↔ 460	Ручная установка в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	466
Дисульфидная связь i 9047 4	471 ↔ 486	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	488 ↔ 497		i 904 904 904 вручную
Дисульфидная связь i	547 ↔ 560	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i 54847-NN 9204…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	554 ↔ 567	Ручное утверждение в соответствии с правилами i		8 9206	Glyation		Glyation	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	569 ↔ 578	Ручное отверждение в соответствии с правилами i
611 ↔ 622	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	616 ↔ 632		616 ↔ 632
Дисульфидная связь i	634 ↔ 643	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	650 ↔ 662	Ручное утверждение в соответствии с правилами i				Disulfide Disulfide	657 ↔ 671	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	673 2 682	9023	в соответствии с правилами Manual as
Дисульфидная связь i	689 ↔ 700	Утверждение вручную согласно правилам i
Дисульфидная связь iser 904	Как вручную правила i
Дисульфидная связь i	711 ↔ 720	Ручная установка в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	7274 920 738	7274 920 738 938
Дисульфидная связь i	732 ↔ 747	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
		9047
	1
Гликозилирование i	744	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
9022 Дисульфидная связь
9049 758	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	765 ↔ 776	Ручное утверждение в соответствии с правилами 94720420 918	Bond i	770 ↔ 785	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	787 ↔ 797
Дисульфидная связь i	804 ↔ 815	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	809 ↔ 824	Ручное утверждение в соответствии с правилами i 74
	826 ↔ 835	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	842 ↔ 853	9023	в соответствии с правилами руководства
Дисульфидная связь i	847 ↔ 888	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i42019	N-гликозилированное соединение 904c 947	..) аспарагин		1
Гликозилирование i	882	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
9022 Дисульфидная связь			89022 899	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	906 ↔ 917	Ручное утверждение в соответствии с правилами	92	9000 918 Bond i	911 ↔ 926	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	928 937		928 ↔ 937
Дисульфидная связь i	944 ↔ 955	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	950 ↔ 964	Ручное утверждение в соответствии с правилами i		Disulfide		966 ↔ 975	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	974	N-connected (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	982 ↔ 993	Ручное утверждение согласно правилам i
Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	1006	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	1009 ↔ 1018	Ручное утверждение в соответствии с правилами i			Glyation	Glyation			N-связанный (GlcNAc …) аспарагин Утверждение вручную на основе эксперимента в i		1
Гликозилирование i	1112	N-connected (GlcNAc…) аспарагин		1
Гликозилирование i	1136	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
9022 Дисульфидная связь
9022 1203	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	1190	N-связанная (GlcNAc …) связь аспарагин				9047 i	1209 ↔ 1220	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1214 ↔ 1229			1214 ↔ 1229
Дисульфидная связь i	1231 ↔ 1240	Утверждение вручную n в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	1243	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Гликозилирование i	1253	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Glycosylation	Glycosylation N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Гликозилирование i	1361	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		G2019 6
		1439	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Гликозилирование i	1452	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
9022 Дисульфидная связь		9022 1494	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1488 ↔ 1503	Ручное утверждение в соответствии с правилами 9472017623 bond i	1505 ↔ 1514	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	1543		1
Дисульфидная связь i	1713 ↔ 1757	Ручное утверждение в соответствии с правилами i			Glya				89	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Гликозилирование i	1749	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин				1	1760 ↔ 1771	Утверждение вручную согласно правилам i
Дисульфидная связь i	1765 ↔ 1780			1765 ↔ 1780
Дисульфидная связь i	1782 ↔ 1791	Утверждение вручную n в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1798 ↔ 1809	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
1803 ↔ 1818	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	1806	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	1820 ↔ 1829	Ручная установка в соответствии с правилами i
Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1841 ↔ 1856	Ручное утверждение в соответствии с правилами	20	9017 906	Гликозилирование i	1846	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	1858 ↔ 1867	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1880 ↔ 1900	Ручное утверждение в соответствии с правилами 9212	20	9017 906 Гликозилирование i	1882	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Гликозилирование i	1891	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Glycosylation	Glycosylation	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	1916 ↔ 1927	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
i	1921 ↔ 1936	Утверждение вручную согласно правилам i
Дисульфидная связь i	1938 ↔ 1947000			1938 ↔ 1947000
Дисульфидная связь i	1954 ↔ 1965	Утверждение вручную n в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1959 ↔ 1974	Ручное утверждение в соответствии с правилами i			1976 ↔ 1986	Ручное утверждение в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	1993 ↔ 2006	Ручное утверждение в соответствии с правилами
Дисульфидная связь i	2000 ↔ 2015	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Дисульфидная связь i	473	2026 вручную я
Глик осилирование i	2027	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	2032 ↔ 2044	Ручное утверждение в соответствии с правилами i		Glyation 9047		Glyation	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин		1
Дисульфидная связь i	2038 ↔ 2056	Ручная установка в соответствии с правилами i 7420 9128 bond i	2058 ↔ 2067	Утверждение вручную в соответствии с правилами i
Гликозилирование i	2066		1

Характеристика гена полярности клеток крохи во время раннего развития и поддержания симбиоза легких органов кальмаров и вибрионов

ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ

Характеристика крошек гена полярности клеток

во время раннего развития и поддержания

кальмаров –Вибриональный симбиоз светового органа

Сюзанна М. Пейер

1,2

и Элизабет А.C. Heath-Heckman

1,3

& Margaret J. McFall-Ngai

1,2,4

Получено: 18 октября 2016 г. / принято: 13 января 2017 г. / опубликовано онлайн: 20 января 2017 г.

# Springer- Verlag Berlin Heidelberg 2017

Резюме Белок Crumbs является определяющим фактором полярности апикальных – bas-

al-клеток и играет роль в апоптозе эпителиальных клеток

и их защите от фотоповреждений. Используя вибрионную систему кальмаров

, модель развития симбиотических партнеров

кораблей, мы исследовали модуляцию гена crumbs в эпителиальных тканях хозяина

во время инициации и поддержания ассоциации as-

.Внеклеточный светящийся симбионт Vibrio fischeri

колонизирует апикальные поверхности поляризованного эпителия в глубоких

криптах светового органа Euprymna scolopes. Во время первоначальной

колонизации в каждом поколении сбор симбионтов увеличивается за счет биохимической и биофизической активности поверхностного

мерцательного эпителия, которые представляют собой несколько клеточных слоев эпителия крипты

, в котором находятся симбионты. В течение нескольких часов после колонизации крипты

симбионты индуцируют клеточную смерть, опосредованную

регрессией удаленных поверхностных ресничных полей.Однако

клеток крипты, непосредственно взаимодействующих с симбионтом, являются

защищенными от гибели. У кальмара-хозяина мы охарактеризовали ген

и кодируемый белок во время морфогенеза легких органов

и в ответ на симбиоз. Характеристики белковой последовательности

и структуры, филогенетические отношения и локализация паттернов

в глазу подтверждают принадлежность белка кальмара к

семейству Crumbs. Гибридизация in situ показала, что транскрипт

crumbs демонстрирует противоположную экспрессию в начале симбиоза

в двух разных областях светового органа:

повышенных уровней в поверхностном эпителии были ослаблены, а

как низкие уровни в были обнаружены эпителии склепа.Хотя ритмическая ассоциация

, в которой хозяин контролирует популяцию симбионтов

в течение дневно-ночного цикла, начинается у молодых особей

после колонизации, циклическое движение крохи было очевидным только у

взрослого органа с пиком экспрессии, совпадающим с максимумом

мамы симбионтпопуляция и люминесценция. Наши результаты про

свидетельствуют о том, что крохи реагируют на сигналы симбионтов, которые вызывают апоптоз

, а также на динамику популяции симбионтов

, коррелирующую с основанным на люминесценции стресстромом

за продолжительность ассоциации хозяин-микроб.

Ключевые слова Апоптоз. Головоногие. Глаз. Фотофор.

Фоторецептор. Вибрион кальмара .Симбиоз

Введение

В качестве регулятора апикально-базальной полярности (Wodarz et al. 1995)

и локализатора спаек (Izaddoost et al. 2002) белок

Крамбса поддерживает индивидуальный белок Крамбса. клеточная и межклеточная интеграция

в эпителиальных тканях. Выполняя эти критические роли, Crumbs

служит основным детерминантом жизни и смерти клеток у отических организмов эукари-

(Laprise 2011).Дисфункция белка

может иметь разрушительные последствия и связана с некоторыми из

наиболее трудноизлечимых заболеваний (Bulgakova and Knust 2009).

Кроме того, функциональный белок необходим для нормального развития

и поддержания целостности зрелых тканей; для примера

Crumbs имеет решающее значение для здоровой структуры и

Сообщено Марком К. Мартиндейлом

* Сюзанна М. Пейер

[email protected]

* Маргарет Дж.McFall-Ngai

[email protected]

1

Школа медицины и общественного здравоохранения, Медицинский факультет

Микробиология и иммунология, Университет Висконсина,

Мэдисон, Висконсин, 53706, США

2

Исследовательский институт, Университет Висконсина,

Мэдисон, Висконсин, 53706, США

3

Текущий адрес: Департамент молекулярной и клеточной биологии,

Калифорнийский университет — Беркли, Беркли, Калифорния 94720, США

4

Настоящее время адрес: Pacific Biosciences Research Center, Университет

Гавайи в Маноа, Гонолулу, HI 96822, США

Dev Genes Evol (2017) 227: 375–387

DOI 10.