Разное

Подготовка к диаскинтесту: Диаскинтест: что это такое (Сергиев Посад)

Содержание

Диаскинтест / Вакцинопрофилактика / Услуги

Диаскинтест – современный препарат, позволяющий выявить латентные формы туберкулеза. В сравнении с пробой Манту этот способ первичной диагностики позволяет практически без ошибок выявлять инфицированность пациента туберкулезными бактериями. Тест может определить присутствие палочек Коха в организме еще на стадиях, когда опасная болезнь себя пока не проявила.

ЧТО ТАКОЕ ДИАСКИНТЕСТ

Как и проба Манту, Диаскин не является прививкой. Это тестовая проба, которая показывает реакцию на туберкулез в активной, неактивной форме. Для проведения иммунологического теста под кожу вводят белковые аллергены или антигены. С их помощью устанавливается иммунный ответ организма. Если он положительный, пациент находится на активной стадии болезни или инфицирован. Положительная реакция – подтверждение того, что иммунитет человека знаком с антигенами.

КАК ПРОВОДЯТ ТЕСТ

Диаскинтест выполняют таким же способом, как и остальные виды проб. Препарат вводят в область предплечья на любую руку. Обычно для правшей пробу ставят в левую руку, чтобы минимизировать механическое раздражение. Важно, чтобы человек не расчесывал зону введения препарата. Проба вводится внутрикожно тонкой иглой.

ДЛЯ ЧЕГО НУЖЕН ДИАСКИН

Многие люди путают Диаскинтест с вакциной. Но это совсем не так. Отказываться от проведения пробы не стоит, поскольку до 95 % взрослых людей сегодня инфицированы палочкой Коха. То есть, они являются носителями туберкулезных бактерий. Это носительство называют латентной формой заболевания – когда человек не болен, но болезнь может развиться при определенных условиях. Такой вариант наблюдается у 1 % пациентов. Причем инфекционный процесс долго может протекать бессимптомно. Без проведения проб выявить его только по внешним признакам невозможно. И чем раньше будет выявлен туберкулезный процесс, тем выше у пациента будут шансы на выздоровление.

ПЕРИОДИЧНОСТЬ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОБЫ

Согласно рекомендации российского Министерства здравоохранения, Диаскинтест в обязательном порядке выполняют один раз в год в возрасте 8-17 лет.

Решая, как часто можно ставить пробу, учитывают некоторые нюансы:

  • Тест можно делать не раньше, чем через месяц после любой вакцинации.
  • После выздоровления от любой инфекционной болезни должен пройти месяц.
  • Если предыдущий результат пробы был отрицательным, следующий тест можно сделать через 2 месяца.

Контрольная проба для людей, стоящих на учете в противотуберкулезном диспансере, проводится раз в 3-6 месяцев.

Если у ребенка была положительной проба Манту, выполнять Диаскинтест ему можно с 1 года.

ПОДГОТОВКА К ПРОБЕ

Как и при Манту, постановка Диаскинтеста не требует подготовки. Необходимо лишь исключить наличие инфекционных заболеваний – за месяц до тестирования и на момент его проведения.

СОСТАВ ПРЕПАРАТА

Препарат содержит:

  • Белки бактерий туберкулеза CFP10 ESAT6, подготовленные специальным образом.
  • Фенол как консервант.
  • Полисорбат как стабилизатор.
  • Фосфорно-кислые натрий, калий.
  • Хлорид натрия.
  • Вода.

Диаскинтест является российским препаратом. Пройти тестирование можно в различных учреждениях. Чаще всего пробу выполняют в детских садах, школах, поликлиниках или же в противотуберкулезных институтах, центрах, диспансерах. Для взрослых обследование назначается при наличии контакта с больными или в случаях, когда человек стоит на учете в диспансере.

КАК ОЦЕНИВАЮТ РЕЗУЛЬТАТЫ

Проверка реакции выполняется на 3-4 день после проведения теста. Результат может быть положительным, отрицательным или ложноположительным (сомнительным). Отрицательный результат – норма для детей и взрослых. При полном отсутствии реакции не должно быть папул, покраснений.

Первая реакция может наблюдаться через 6 часов после введения препарата. Результат теста – ответ иммунитета человека. Воспаления, покраснения могут наблюдаться в первый же день после тестирования. Реакция может возрастать в течение 72 часов, максимальный результат наблюдается на третий день у взрослых и детей. Затем реакция угасает.

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ

Нормой при отрицательной реакции считают:

  • Следы от иглы.
  • Небольшой синяк на месте укола.
  • Бесцветное уплотнение на месте укола размером менее 1 см.

СОМНИТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ

Ложноположительный результат устанавливается в случаях, когда у человека не появилась папула, но есть покраснения. В этих ситуациях пациенту назначают повторный тест через 2 месяца. Также необходимо пройти консультацию в противотуберкулезном диспансере, сдать флюорографию, дополнительные анализы.

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ

Наличие папулы любого размера говорит об инфицировании пациента туберкулезными бактериями. У взрослых размер воспалительной папулы не имеет решающего значения. Однако для простоты оценки используется общая классификация размеров припухлостей:

  • Менее 5 мм – слабая.
  • Не более 9 мм – умеренная.
  • Свыше 10 мм – сильная.

Чем более выражена реакция, тем больше возбудителя присутствует в организме человека.

Пациенту обязательно нужно обратиться в диспансер для лечения, постановки на учет.

У детей наличие папулы также требует незамедлительного обращения к врачу. Понадобятся дополнительные исследования для оценки формы заболевания – активная или латентная. Используется и специальное лечение.

ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ, ОСЛОЖНЕНИЯ

Диаскинтест безвреден для пациентов любого возраста, поэтому можно не опасаться реакции у детей и взрослых. Какие-либо побочные эффекты могут наблюдаться лишь в редких случаях в виде симптомов, указывающих на общую интоксикацию. К ним относят головную боль и слабость, общее недомогание, возрастание температуры. Это нормальная реакция. Не относят к поводам для беспокойства и небольшие синяки на месте укола.

Может возникать и гиперергическая реакция организма на введение препарата – образование крупной папулы диаметром более 15 мм. К такой же реакции относят сильное воспаление, раздражение ткани вокруг папулы.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ТЕСТУ

Диаскинтест нельзя выполнять в нескольких случаях:

  • Аллергии.
  • Вакцинация любыми прививками в течение месяца до пробы.
  • Любые заболевания в фазе обострения, острые заболевания.
  • Эпилепсия.
  • Заболевания кожи.

Диаскинтест, как и Манту, нельзя ставить при простуде, ОРВИ. Аллергические реакции на препарат являются противопоказанием к тестированию.

ПОВЕДЕНИЕ ПОСЛЕ ПРОБЫ

После постановки Диаскинтеста можно мочить руку, принимать душ или ванну. Категорически не рекомендуется расчесывать место укола, заклеивать эту зону пластырем, обматывать бинтом. Также не стоит смазывать место укола кремами, моющими и другими косметическими средствами. Ограничений по питанию не существует.

Диаскинтест имеет высокую чувствительность – около 80 %, а точность достигает почти 100 %. Но, как и любая медицинская тестовая методика, и эта проба может ошибаться.

Диаскинтест в разы точнее Манту, поскольку он не показывает положительные реакции у людей с приобретенным противотуберкулезным иммунитетом. Вот почему эта проба считается наиболее достоверной и безопасной. С ее помощью можно узнать, не болен ли пациент на данный момент, проанализировать, не заболеет ли человек через 1-2 года.

Цены

Уважаемые посетители нашего сайта, так как прайс регулярно обновляется (вынуждены заметить, что довольно часто в сторону уменьшения), цены на все услуги размещены на отдельной странице, воспользовавшись поиском по которой, вы легко сможете найти цены на интересующие услуги. Мы стараемся пристально следить за актуальностью цен на сайте!

Также вы можете просто позвонить нашим специалистам и они быстро вас проконсультируют:

+7 (495) 577-09-41

Сделать диаскинтест в СПБ недорого : цены, преимущества

Диаскинтест — это современный метод диагностики туберкулеза, дающий возможность практически безошибочно распознать это заболевание на самых ранних стадиях.

Своевременное выявление тубинфицирования позволяет провести максимально эффективный курс лечения. Именно диаскинтест поможет обнаружить в организме тестируемого туберкулезные бактерии еще до того, как они начнут как-либо себя проявлять.

Преимущества диаскинтеста на туберкулез

  • выявление болезни в латентной форме;
  • более высокая точность в сравнении с широко применяемой реакцией Манту;
  • самый достоверный и безболезненный метод первичной диагностики.

Именно поэтому тестовая проба диаскинтест — одна из популярных услуг нашей клиники.

Процедура постановки диаскинтеста

Особая подготовка перед пробой не нужна. Единственное требование — отсутствие инфекционных заболеваний за месяц до и на момент постановки теста.

Сама процедура проведения диаскинтеста идентична пробе Манту. Под кожу в области предплечья туберкулиновым шприцем вводят взвесь белковых антигенов, которые позволяют наблюдать за иммунным ответом организма. При положительной реакции на диаскинтест можно говорить о том, что иммунитет тестируемого уже знаком с этим антигеном, то есть человек либо уже болен, либо только заражен туберкулезной палочкой.

Оценка реакции на диаскинтест

На третий день после проведения теста можно определить реакцию организма на введенный препарат. Отрицательным результатом диаскинтеста (нормой) считается полное отсутствие каких-либо видимых признаков (покраснение, припухлость и т.д.). Если же результат сомнительный (ложноположительный), тогда на месте укола будет наблюдаться покраснение, но без припухлости (папулы). О положительном результате диаскинтеста свидетельствует папула.

Опытные врачи Немецкой клиники готовы предоставить вам всю необходимую информацию о диаскинтесте (цена, подготовка, противопоказания и т.д.), качественно провести тест и безошибочно оценить его результат.

Как можно обследовать ребенка на туберкулез без реакции Манту

Это очень распространенный вопрос среди родителей. Многим родителям не нравится регулярно водить ребенка в туб.диспансер по результатам реакции Манту.  Они ищут ей замену. Попробуем разобраться, существует ли на сегодняшний день более совершенный вариант массовой диагностики туберкулеза у детей.

Диаскинтест — это новый кожный диагностический препарат, официально зарегистрирован в августе 2008г. Применяется для диагностики инфицирования туберкулезом в России с 2009г. Принцип его действия такой же, как у туберкулина. Но этот препарат обладает более высокой специфичностью.

Диаскинтест — это белок, содержащий 2 антигена, присутсвующие в вирулентных штаммах Mycobacteriumtuberculosis  — возбудителя человеческого туберкулеза. Поэтому и реакция при внутрикожном введении этого препарата развивается, только если человек инфицирован Mycobacteriumtuberculosis, Поствакцинальный иммунитет после БЦЖ на этот тест не влияет, т. к. вакцина БЦЖ содержит другой вид M.bovis —  Поэтому у привитых здоровых детей он будет отрицательным. Более того, этот тест положителен только у людей, в организме которых возбудитель находится в состоянии активного размножения. При стихании активности процесса реакция становится отрицательной. Это дает возможность применять его для оценки эффективности лечения.

Самого возбудителя туберкулеза он не содержит, поэтому заболевание вызвать не может. Аналогично туберкулину он является неполным антигеном (гаптеном): на его введение иммунитет не вырабатывается, а уже имеющиеся в организме.готовые специфические антитела вступают с ним в реакцию. В остальном состав этого препарата аналогичен туберкулину (фенол, полисорбат 80 и т. д.) — препарат белковый, поэтому без консервантов не обойтись.

Техника  проведения теста, техника его оценки, противопоказания и рекомендации при его проведении аналогичны таковым при Манту.

Оценка результатов.

Положительным тест считается при наличии папулы любого размера.

Сомнительной реакцией считается гиперемия любого размера без папулы.

Отрицательной: след от укола.

Лица с сомнительной и положительной реакцией ( в соответствии с инструкцией к препарату) обследуются на туберкулез.

Диаскинтест является Российской разработкой, выпускается отечественным производителем,  в настоящее время он активно рекламируется.

Манту официально признается неточной (точность ее результатов оценивается, как 50-70%), а у диаскинтеста – 90%. Обсуждается возможность заменить Манту диаскинтестомдлямассовой диагностике туберкулеза у детей. С октября 2009г. внесены изменения в приказ № 109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской федерации», согласно которым при отрицательных результатах диаскинтеста профилактическое противотуберкулезное лечение детям не назначается (но обследование в т.ч. рентгенологическое по этому же приказу все же проводится).

Почему же Манту до сих пор не заменили на этот современный тест?

Потому что  у него тоже есть недостатки. Если туберкулин  достаточно часто дает ложно положительные результаты, то диаскинтест опасен ложно отрицательными:

1. Этот тест не чувствителен в отношении M.bovis — возбудителя коровьего туберкулеза, который также может вызывать болезнь у человека в 5 -15% случаях от всех форм заболевания, а также в отношении атипичных микобактерий, при вялотекущей инфекции. В разных источниках информация в отношении возбудителя коровьего туберкулеза и чувствительности к нему диаскинтеста расходится: из приказа 109 следует что тест чувствителен к наличию в организме вирулентных M.bovis , а из инструкции препарата — спавочникVidal — следует, что тест чувствителен только к Mycobacteriumtuberculosis — возбудителю человеческого туберкулеза . Хотя типичный возбудитель человеческого туберкулеза лидирует, как причина заболевания, другие патогенные для человека микобактерии туберкулеза не должны упускаться при диагностике заболевания. Поэтому рентгенологическое обследование детям с виражом по результатам Манту и отрицательным диаскинтестом  —  проводится.

2. Диаскинтест может быть отрицательным на ранних стадиях инфицирования, и на ранних стадиях развития туберкулезного процесса, поэтому при вираже Манту и отрицательном диаскинтесте, последний рекомендуется повторить через 2 месяца.

3. Ложно отрицательный результат может быть у больных с тяжелыми формами туберкулеза в стадии распада и у больных с иммунодефицитнымисостояними (ВИЧ, иммуносупрессивная терапия и т. д.), на фоне других тяжелых хронических заболеваний.

Поэтому не все фтизиатры настроены оптимистично в отношении этого препарата, как замены Манту для массовой туберкулинодиагностики.

Диаскинтест в настоящее время применяется в сети тубдиспансеров, как дополнительный метод в совокупности с другими, в том числе у детей направленных на консультацию к фтизиатру по поводу увеличения р.Манту  —  для уточнения активности бактерий.

Его можно проводить одновременно с Манту на разных руках, или после нее. Интервал между ними значения не имеет,  т. к. то и другое –  кожные пробы, а не прививки. При этом, если по результатам Манту выставляется вираж, то отрицательный результат диаскинтеста не снимает этот диагноз. В данном случае отрицательный результат говорит о том, что организм ребенка на данный момент успешно справляется с возбудителем попавшим извне и дополнительного лечения не требуется. Зато положительный результат является показанием к назначению профилактического лечения изониазидом.

Выводы:

Как у любого медицинского препарата у диаскинтеста имеется 2 стороны: преимущества и недостатки. 

Диаскинтест очень ценное достижение современной науки, но для скрининговой диагностики туберкулеза он не подходит из-за достаточно высокой вероятности ложно отрицательных результатов.

Знать о наличии этого препарата родителям очень полезно, чтобы иметь возможность грамотно задать вопросы фтизиатру, если этот метод диагностики Вам не предлагают.

Многие родители не хотят делать ребенку кожные пробы и рентгенографию, считая это вредным. Они пытаются найти замену этим методам. Существует ли на сегодняшний день такой абсолютно достоверный и безопасный метод, который можно использовать для массовой диагностики туберкулеза?

Анализы крови.

Остановимся на методах обследования, которые основаны на заборе крови (или других биологических жидкостей) у ребенка, следовательно, являются безвредными.

1. ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Этот метод основан на обнаружении частичек ДНК возбудителя туберкулеза в биологических жидкостях: крови, моче, мокроте и т. д. Метод достаточно чувствителен, позволяет обнаружить возбудителя при наличии нескольких сотен микробов в 1 мл биологической жидкости. Но возбудитель может находиться внутри очажка или внутри клеток, в этом случае в биологических  жидкостях невозможно обнаружить даже фрагментов его ДНК – следовательно, ПЦР будет отрицательной. У детей с клиническим туберкулезом легких чувствительность этого метода колеблется от 25 до 83% т. е. при наличии клинически подтвержденного туберкулеза, а следовательно наличии возбудителя в организме, положительный результат ПЦР был от 25 до 83% больных детей, у остальных отрицательным. А специфичность ПЦР — 90%, т. е. в 10% случаев возможны ложноположительные результаты. Отсюда следует, что отрицательный результат ПЦР не исключает диагноза туберкулез и как самостоятельный метод для диагностики туберкулеза не используется. Этот метод выгодно отличается от других тем, что он обнаруживает непосредственно антиген (частички ДНК бактерий), а не антитела, как все другие методы диагностики. Поэтому его с успехом можно применять в тех случаях, когда возбудитель в организме присутствует, а иммунитет к нему не вырабатывается. Этот тест применяют в основном у детей с тяжелыми формами туберкулеза, у детей с иммунодефицитами, при различных формах внелегочного туберкулеза, когда диагноз не удается установить другими методами.

2.РПГА. Реакция непрямойгемаглютинации.

Метод основан на выявлении специфических антител в крови больного тубекулезом. Для анализа используется кровь больного и препарат: Диагностикумэритроцитарный туберкулезный антигенный сухой – бараньи эритроциты, на которых осажден антиген микобактерий туберкулеза. При туберкулезе реакция бывает положительной в 70-90% случаев, т. е. возможны ложноотрицательные результаты. Используют его как иммунологический тест для определения активности процесса и эффективности лечения.

3.ИФА. Иммуноферментный анализ.

Метод основан на обнаружении антител к возбудителю туберкулеза в крови больного. У пациента берется кровь и тестируется на наличие антител, при этом используется: Тест система иммуноферментная для определения антител к возбудителю туберкулеза. Чувствительность метода составляет 60-70%, специфичность 90%, что не позволяет использовать метод для скринингового (массового), обследования населения на туберкулез. Метод используется для подтверждения диагноза и определения активности процесса.

4.Квантифероновый тест.

Тест проводится в пробирке: у больного берется кровь из вены и исследуется. Широко применяется для диагностики скрытого (латентного) туберкулеза за рубежом. У нас так же проводится в крупных городах: Москве, Санкт-Петербурге, но широкого распространения пока не получил.

Этот метод основан на определении в крови пациента специфического интерферрона. Т-лимфоциты пациента стимулируются специфическими антигенами М. tuberculosis. Только у людей инфицированных именно этим видом микобактерий тест будет положительным. У вакцинированных БЦЖ, а также инфицированных возбудителем коровьего туберкулеза тест будет отрицательным. 

Недостатки.

Квантифероновый тест имеет чувствительность  89% (в 11% возможны ложноотрицательные результаты), т.е. отрицательный тест не исключает диагноз туберкулез, поэтому применяется он у нас в России не вместо Манту и рентгена, а вместе с ними для уточнения диагноза.

Специфичность у него 99,2 %, это выше, чем у других методов диагностики туберкулеза. Поэтому положительный тест практически в 100% случаев служит доказательством инфицированности человека туберкулезом. Именно инфицированности, а не болезни.

Для взрослого населения  он не представляет большой ценности и для скрининговой диагностики туберкулеза  использоваться не может, т.к. в России микобактерией туберкулеза инфицирована большая часть взрослого населения.

А для ребенка его положительный результат подтверждает инфицированность микобактерией человеческого туберкулеза, но не показывает интенсивность (активность) этой инфицированности. Для подтверждения или исключения диагноза туберкулез все-равно нужен рентген, а для решения вопроса о назначении ребенку профилактического лечения кожные пробы: Манту или диаскинтест.

Этот тест широко используется для диагностики скрытого туберкулеза у лиц с иммунодефицитами и ВИЧ-инфекцией, когда Манту может быть ложно отрицательной. Этот тест может помочь подтвердить или снять диагноз туберкулез в сомнительных случаях. Но заменой Манту он не является.

Выводы:

Все выше перечисленные методы, включая диаскинтест, дают достаточно большой % ложно отрицательных результатов, при их массовом применении есть большая вероятность пропустить больных туберкулезом, поэтому для скринингового обследования детей ни один из них не подходит.

При всей своей неточности (50-70%), единственным методом подходящим для массового обследования детей на туберкулез по-прежнему остается реакция Манту. Она дает много ложно положительных реакций, но минимум ложно отрицательных. Она выявляет всех детей у которых в организме присутствуют любые микобактерии туберкулеза: патогенные и не патогенные для человека; в любом состоянии: активном и дремлющем. Педиатр по результатам  реакции Манту получает возможность выделить группу детей нуждающихся в дополнительном обследовании на туберкулез и отсечь не нуждающихся в этом детей, без риска пропустить больных и инфицированных.

У выделенной по результатам Манту группы детей проводится дальнейшее обследование, включающее традиционное рентгенологическое, которое хорошо дополняется перечисленными выше методами. По совокупности всех методов обследования выставляется окончательный диагноз.

Безопасный и 100% достоверный метод диагностики туберкулеза пока не изобрели.

Среди взрослого населения  России около 90% людей инфицировано туберкулезом, поэтому все мероприятия направлены на выявление явных клинических форм болезни, особенно легочных форм с бактериовыделением.  Поэтому у взрослого населения скринингом служит обязательнаяфлюрография, а другие методы являются дополнительными (уточняющими).

Родители, категорически не желающие делать ребенку реакцию Манту, а также родители детей, у которых есть противопоказания к Манту, обязаны обследовать детей рентгенологически не реже 1 раза в год. Обязательное обследование детей на туберкулез контролируется санитарными правилами РФ. В случае отказа – ребенок может не допускаться в коллектив.

Рентгенологический метод обследования органов грудной клетки, с наибольшей долей вероятности, исключает выраженные клинические формы туберкулеза органов дыхания, т.е. исключает попадание в детский коллектив детей – бактериовыделителей, т.е. являющихся заразными для других.

Следовательно, ответ на вопрос в заголовке статьи звучит так:

вместо Манту – только рентген.

Источники информации:

Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.1295-03 «Профилактика туберкулеза»

Приказ Министерства Здравоохранения РФ № 109 от 21марта 2003г. «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»

Диаскинтест

ДИАСКИНТЕСТ

Уважаемые родители!

    Информируем Вас, что с 2016 года в школе в качестве метода выявления туберкулеза у учащихся, будет использован Диаскинтест. Реакция Манту в школе проводится не будет.

  Диаскинтест представляет собой новый способ диагностики туберкулеза и состояний тубинфицированности в основе которого лежит определение реакции организма обследуемого человека на специальные вещества, которые встречаются только в микробах возбудителях туберкулеза. Диаскинтест был разработан в Российском НИИ Московской Медицинской Академии им. И.М. Сеченова и на данный момент прошел клинические исследования, показавшие его высокую эффективность.

     Диаскинтест по сравнению с пробой Манту имеет ряд преимуществ. Работает он по тому же принципу что и реакция Манту – в кожу предплечья человека  строго внутрикожно тонкой иглой вводится небольшое количество специального раствора, содержащего вещества, которые встречаются в структуре возбудителей туберкулеза. Однако состав растворов для Диаскинтеста и реакции Манту различен.

     Раствор для постановки пробы Манту содержит туберкулин – особый белок который содержится в возбудителях туберкулеза, а также в их «близких родственниках» бактериях, которые используются в прививке БЦЖ и в непатогенных микобактериях, которые очень похожи на возбудителей туберкулеза, но в отличии от последних не могут провоцировать болезнь у человека.  
     Раствор для постановки Диаскинтеста содержит только синтетические белки ESAT6/CFP10 характерные исключительно для возбудителей туберкулеза.

    В связи с различным составом результаты Диаскинтеста и проба Манту выявляют два разных аспекта состояния противотуберкулезного иммунитета: положительный результат пробы Манту означает, что организму обследуемого человека знаком туберкулин, что в свою очередь может значить, что обследуемый человек либо контактировал с туберкулезной инфекцией, либо недавно получил прививку БЦЖ, либо заражен непатогенными микобактериями, которые не могут вызвать болезни и, следовательно, не требуют никакого лечения. Последние две разновидности результата пробы Манту называются ложноположительными. 

     В отличие от пробы Манту, Диаскинтест дает положительный результат только в том случае, если организму обследуемого человека знакомы белки, которые можно встретить только в возбудителях туберкулеза. Другими словами, положительный результат Диаскинтеста с большой степенью точности указывает на то, что обследуемый человек либо заражен туберкулезом на данный момент, либо уже болеет им.

   Диаскинтест, дает отрицательный результат у лиц, не зараженных и не болеющих туберкулезом, а также после полного выздоровления после туберкулеза. Результаты диаскинтеста также остаются отрицательными в случае наличия у человека иммунитета после прививки против туберкулеза (БЦЖ) или в случае заражения обследуемого человека микобактериями которые не могут вызвать туберкулез (ложно положительные результаты пробы Манту). 
 

Таким образом, преимущества Диаскинтеста по сравнению с пробой Манту:

  • Диаскинтест является гораздо более специфичным и эффективным методом диагностики туберкулеза, чем реакция Манту
  • позволяет получить точный результат и отличить состояние заражения туберкулеза от ложно положительных реакций у людей привитых БЦЖ и лиц зараженных непатогенными микобактериями
  • обладает высокой чувствительностью: все больные зараженные туберкулезом и тубинфицированные лица, которые могут заболеть туберкулезом в ближайшее время дают положительную реакцию на Диаскинтест
  • дает возможность судить об эффективности лечения туберкулеза: у всех лиц выздоровевших после туберкулеза результат Диаскинтеста отрицательный

 

     Результаты Диаскинтеста считывается через 72 ч с момента инъекции. Специально обученный медицинский работник оценивает диаметр красного пятна (гиперемии) и уплотнения (папулы) которые образовались на месте инъекции.

Результаты Диаскинтеста могут быть:                                        

  1. отрицательными – при отсутствии красного пятна или уплотнения на месте инъекции
  2. сомнительными – при наличии на месте инъекции только красного пятна или небольшей припухлости диаметром менее 2-4 мм
  3. положительными – при наличии на месте инъекции припухлости диаметром 5 мм и более;
  4. гиперергическими: при образовании на месте инъекции уплотнения диаметром более 15 мм и более, а также в случае появления на месте инъекции пузырьков, изъязвлений или увеличения лимфатических узлов в локтевой ямке или в подмышечной впадине.

     

      Все лица, у которых была выявлена сомнительная, положительная или гиперэргическая реакция Диаскинтеста нуждаются в дополнительном обследовании у фтизиатра.

подготовка к школе и детскому саду

Россия находится в числе стран с неблагоприятной обстановкой по туберкулезу. При этом туберкулез входит в десятку самых опасных заболеваний, которые уносят каждый год больше всего жизней. Несмотря на то, что с каждым годом случаев заражения становится меньше, туберкулез остается крайне распространенной проблемой, которой нельзя пренебрегать

Вопреки частому заблуждению, туберкулез не связан напрямую ни с социальным положением, ни со стилем жизни. Из-за его распространенности им можно заразиться практически где угодно. При этом болеют туберкулезом не только взрослые.

Только в 2017 году, по данным ВОЗ, один миллион детей в возрасте до 14 лет заболели туберкулезом. 230 000 детей умерли от этой болезни. В Российской федерации доля детей составляет около 5,0% от числа всех заболевших туберкулезом.

Для предотвращения распространения инфекции важна ранняя диагностика. Вовремя поставленный диагноз также дает лучшие перспективы в выздоровлении. Туберкулез лечится долго и непросто, и чем раньше он будет обнаружен, тем быстрее и успешнее будет результат терапии.

Анализ перед школой и детским садом

При поступлении в школу или детский сад, а также перед поездкой в детский лагерь необходимо провести иммунологический тест на туберкулез. В случае противопоказаний к проведению кожных тестов или отказа родителей рекомендовано проведение теста Т-СПОТ.ТБ (согласно Федеральным клиническим рекомендациям по диагностике и лечению латентной туберкулёзной инфекции у детей, утвержденных Российским обществом фтизиатров).

Диагностика туберкулеза – вопрос безопасности детей в коллективе.

Профилактическое иммунологическое тестирование на туберкулез проводится ежегодно, а в группах риска — скрининг проводится два раза в год.

Какой анализ выбрать?

Кожные иммунологические тесты: проба Манту и Диаскинтест широко используются для тестирования детей. Методы отличаются доступностью, удобством применения, но при этом имеют ряд противопоказаний. Проба Манту имеет низкую специфичность, и положительный результат пробы Манту требует проведения повторного тестирования другими, более специфичными иммунологическими тестами: Диаскинтест, Т-СПОТ.ТБ.

У детей с аллергией и кожными заболеваниями предпочтительнее использовать тесты на туберкулез по анализу крови, например Т-СПОТ.ТБ.

TSPOT.ТБ – прогрессивный метод ранней диагностики

Ранняя диагностика туберкулезной инфекции подразумевает обнаружение скрытой (латентной) формы туберкулеза. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, сегодня микобактерией туберкулеза инфицировано от четверти до трети всего населения планеты. Подавляющее большинство из них — носители латентной, то есть спящей туберкулезной инфекции Наиболее прогрессивный и эффективный метод ранней диагностики латентного туберкулеза – тест по анализу крови T-SPOT. ТБ.

Преимущества теста TSPOT.ТБ:

  • Высокая чувствительность и специфичность
  • Отсутствие противопоказаний и ограничений
  • Безопасность теста, отсутствие побочных реакций
  • Отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения
  • Отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
  • Требуется только одно посещение клиники
  • Быстрый результат

Когда ребенку показан тест TSPOT.ТБ:

  • Если имеются любые противопоказания для применения кожных проб
  • Детям с кожными заболеваниями, склонностью к аллергическим реакциям, эпилепсией
  • В случае положительной реакции Манту для проверки диагноза
  • При подозрении на внелегочные формы туберкулеза
  • При подтвержденной ВИЧ-инфекции

Где сдать анализ?

В лаборатории ЛабКвест вы можете пройти T-SPOT. ТБ исследование быстро, качественно, в комфортных условиях и без очередей. В офисах ЛабКвест детям уделяется особое внимание. Чтобы процедуры прошли быстро и безболезненно, наши медсестры используют специальный инструментарий, который позволяет взять кровь из вены практически незаметно. Медицинские офисы оборудованы детскими зонами с бизибордами, карандашами, фломастерами и веселыми раскрасками.

ЛабКвест – это более 90 офисов по всей России. Часть офисов – LabQuest KIDS – специализируется на детских услугах. Выбрать ближайший офис вы можете по телефону 8 (800) 700-09-99 или на сайте: https://www.labquest.ru/adresa-i-vremya-raboty/

Анализ на дому

ЛабКвест предлагает услугу выезда на дом, которая особенно актуальна для маленьких пациентов. Сдача анализов – это стресс для ребенка. Если малышу спокойнее дома, наши медсестры могут приехать к вам в удобное время и бережно взять кровь на дому. Для этого просто оформите заявку на сайте: https://www. labquest.ru/vyezd-na-dom/

Проба Манту платно. Поставить Манту в Красноярске.

Зачем делать пробы Манту у детей?

Эту реакцию проводят детям для определения и контроля над выработкой противотуберкулезного иммунитета. Реакция Манту показывает был ли ребенок инфицирован, а также как иммунитет ребенка реагирует на наличие в организме микобактерии туберкулеза.

Когда проводится, и сколько «прививок» Манту делают детям?

Первую вакцинацию от туберкулеза (БЦЖ) делают ребенку еще в роддоме. В год ребенку проводят Первую пробу Манту, а затем ее делают ежегодно. До года малышам, как правило, не проводят реакцию Манту, т.к. у новорожденного иммунная система имеет свои особенности и проба на туберкулез у детей до года может быть искаженной. В последующие года проба Манту проводится для контроля устойчивости иммунитета к болезни.

Где в Красноярске можно платно сделать реакцию (пробу) Манту ребенку?

Прививки детям, а также и лечение малыша – это особая область, где потребуется не только умение лечить ребенка максимально быстро, качественно и безболезненно, но находить для каждого маленького пациента свою форму общения.

В нашем Центре вакцинации вы можете обратиться к любому детскому специалисту для решения проблем со здоровьем вашего ребенка, в том числе и для того, чтобы сделать прививки. Здесь вам расскажут подробно о том, что это такое реакция Манту у детей, делать ее или нет, до какого возраста, когда, для чего нужна «прививка», и зачем предварительная подготовка ребенка к пробе (обследование у педиатра). В Красноярске поставить пробу Манту платно можно в Клинике на Киренского. Схема достаточно простая: в день прививки необходимо получить допуск педиатра, который вы можете получить нашей Клинике на Киренского. Когда прошло 72 часов с момента постановки реакции врач замеряет результат и дает консультации.

О том, что проба Манту не всегда показывает верный результат, было известно давно. Современные же ученые изобрели новый вариант диагностики — Диаскинтест. При Диаскинтесте медики вводят малышу белки, реакция на которые у организма может быть только однозначной. Вероятность погрешности минимальна. Именно поэтому такому тесту родители склонны доверять в большей степени.

В чем же основные преимущества диаскинтеста?

  • Главный плюс – его точность. Если точность Манту может составлять до 70%, то испытания Диаскинтеста дают более 90% гарантии.
  • Тест даcт намного меньше осложнений, чем проба Манту. Дело в том, что во время введения туберкулина при пробе Манту велика вероятность попадания частичек клеток, что само по себе дает положительную реакцию. А в составе белка, вводимого при тесте, они точно отсутствуют.

Процедура введения инъекции ничем не отличается. При Диаскинтесте также вводят микробактерии подкожно и смотрят на реакцию организма через 72 ч. Диаскинтест в Красноярске можно сделать тажке в нашем Центре вакцинации

Диаскинтест в Москве платно, ребенку и взрослому сделать диаскинтест цена 1 280 руб. — Клиника «Доктор рядом»

Диаскинтест (Diaskintest) — это не столько прививка, сколько специальная тестовая проба. Она отличается от пробы Манту получением наиболее точного результата. Если сделать диаскинтест ребенку, то можно определить реакцию организма на туберкулез, находящийся в активной или неактивной форме. 

При получении положительного результата теста врачи клиники «Доктор Рядом» рекомендуют начать химиотерапевтическое лечение, чтобы препятствовать переходу болезни в более активную фазу. В нашей клинике вы сможете сделать диаскинтест в Москве взрослому или ребенку. Исследование представляет собой специальный иммунологический тест, который заключается во введении в кожу белковых антигенов. Диагностика проходит быстро. Введение антигенов теста Диаскино позволяет выявить иммунный ответ организма на туберкулез. 

Соответственно, если врачи получают положительный ответ, то значит иммунная система пациента уже сталкивалась с белковыми антигенами туберкулеза. То есть, человек либо находится в стадии инфицирования, либо в активном периоде болезни.

Как проводится диаскинтест?

Чтобы сделать диаскинтест, нужно выполнить все манипуляции, как и при других туберкулезных пробах. Его делают в любую из рук в зону предплечья. Правшам пробу рекомендуют ставить на левую руку, левшам — наоборот. Тест вводится внутрикожно при помощи специального туберкулинового шприца, который имеет очень тонкую иглу.

Показания для проведения диаскинтеста:

  • Первичная диагностика туберкулеза;
  • Оценка выраженности патологического процесса при выявленном заболевании;
  • Выявление людей, у которых присутствует высокая вероятность развития активного туберкулезного процесса;
  • Дифференциальная диагностика различных заболеваний и туберкулеза;
  • Необходимость дифференцировать инфекционную и поствакцинальную аллергию;
  • Определение эффективности комплексного лечения туберкулеза.

Противопоказания для диаскинтеста:

  • Острые и хронические воспалительные заболевания инфекционной природы;
  • Хронические заболевания различных органов в стадии обострения;
  • Аллергические реакции в ближайший месяц;
  • Эпилепсия при отсутствии должного контроля припадков.

Насколько часто делается диаскинтест?

Если вы еще не знаете, где сделать диаскинтест, то мы рекомендуем обратиться в клинику «Доктор Рядом». Врачи нашего медицинского центра посоветуют вам, насколько часто можно делать тест. По современным рекомендациям проба должна обязательно проводится один раз в год всем детям возрастом 8–17 лет.

Основные требования к частоте выполнения диаскинтеста:

  • После отрицательного теста возможно проведение следующей пробы через 2 месяца;
  • После любой вакцинации — только через один месяц;
  • После острых воспалительных заболеваний инфекционной природы — через месяц.
  • Если ребенок стоит на учете у фтизиатра, то тогда контрольный диаскинтест рекомендуется делать один раз в течение 3–6 месяцев.
  • Если была получена положительная проба Манту, то тогда диаскинтест может быть выполнен, начиная с однолетнего возраста.

Подготовка к проведению исследования

Перед тем, как сделать диаскинтест в Москве, не потребуется никакой специальной подготовки. Основное условие, которое нужно соблюдать перед выполнением теста — у пациента в течение месяца не должно быть никаких острых инфекционных процессов.

Состав Диаскинтеста

В состав препарата для проведения Диаскинтеста входят специально подготовленные белковые антигены микобактерии туберкулеза. Также состав теста включает дополнительные компоненты, обеспечивающие его эффективность.

Интерпретация результатов

Врач проверяет результаты Диаскинтеста через 4 дня после его введения. Отрицательный результат, при котором нет покраснения и набухания в области введения, считается абсолютной нормой. Если диаскинтест сомнительный или положительный, пациента направляют на дообследование.

Клинические испытания нового кожного теста Диаскинтест для диагностики туберкулеза

Новый реагент для кожного теста под названием Диаскинтест был разработан для скринингового диагноза туберкулеза, а также для проведения доклинических и клинических испытаний. Доклинические испытания проведены на 315 лабораторных животных (морские свинки, мыши-альбиносы). Было установлено, что реагент Диаскинтест нетоксичен, не обладает сенсибилизирующими свойствами, безопасен и специфичен и не вызывает положительных реакций у вакцинированных БЦЖ животных и здоровых морских свинок.Его удельная активность была сопоставима с таковой национального стандарта — туберкулина очищенного PPD-L-2. По мере прогрессирования туберкулезных поражений у морских свинок наблюдалась более высокая реакция на разведение Диаскинтеста, а у животных, вакцинированных БЦЖ, отсутствовала реакция на Диаскинтест с повышенной гиперчувствительностью замедленного типа. Клиническое исследование было разрешено Федеральной службой по надзору в сфере здравоохранения и социального развития Российской Федерации. Клинические испытания проведены у 150 человек.Безопасность, специфичность, чувствительность Диаскинтеста впервые были изучены в ходе клинических исследований, а его действие сравнивалось с результатами туберкулиновой кожной пробы (проба Манту) с 2 TE PPD L-2. Установлено, что диаскинтест обладает высокой чувствительностью при введении в дозе 0,2 мкг на 0,1 мл. У больных активным туберкулезом и новых случаев инфицирования Mycobacterium tuberculosis возбудитель вызывал положительную кожную реакцию (папула более 10 мм) в 98–100% случаев (p <0,05). Препарат не вызвал реакции, связанной с вакцинацией БЦЖ.Специфичность теста составила 93-100% при значимости 95%. Частота чрезмерных реакций (везикулярно-некротические изменения, лимфангит и лимфаденит) составляла 4-14% при значимости 95%. Больные туберкулезом со значительными иммунопатологическими нарушениями могут не иметь чувствительности кожи к Диаскинтесту, как и к PPD L-2 (отрицательный тест). Полученные данные обосновывают использование Диаскинтеста в массовых эпидемиологических исследованиях для дифференциальной диагностики туберкулеза и осложнений, связанных с вакцинацией БЦЖ.Средство также может быть использовано для оценки активности процесса у больных туберкулезом и эффективности лечения в сочетании с другими методами, а также для дифференциальной диагностики туберкулеза.

Сравнение внутрикожного теста с рекомбинантным туберкулезным аллергеном (диаскинтест) с другими иммунологическими тестами в диагностике туберкулезной инфекции

Старшинова и др .: Иммунологические тесты в диагностике туберкулеза

International Journal of Mycobacteriology ¦ Том 7 ¦ Выпуск 1 январь-март 2018 г. 33

в том числе 390 000 ВИЧ-инфицированных в 2015 г.[1,2,6] ТБ является девятой по значимости причиной смерти в мире

и ведущей причиной

, связанной с одним инфекционным агентом, по сравнению с ВИЧ / СПИДом.

По оценкам, в 2016 году от туберкулеза умерло 1,3 миллиона среди

ВИЧ-отрицательных людей (по сравнению с 1,7 миллиона в 2000 году) и еще

умерло среди ВИЧ-положительных людей. По оценкам

, в 2016 году туберкулезом заболели 10,4 миллиона человек: 90%

были взрослыми, 65% — мужчинами и 10% — людьми, живущими с

ВИЧ.В общей сложности было зарегистрировано 6,3 миллиона новых случаев ТБ (на

больше с 6,1 миллиона в 2015 году), что эквивалентно 61% от оценочной заболеваемости

в 10,4 миллиона. Было зарегистрировано 476 774 случая

ВИЧ-инфицированных больных ТБ (46% от оценочной заболеваемости).

По данным ВОЗ, одна треть населения мира

инфицирована Mycobacterium tuberculosis (MTB).

Стратегия ВОЗ по искоренению ТБ к 2035 году (Стратегия конца

ТБ) направлена ​​на раннюю и точную диагностику и

последующее эффективное лечение больных ТБ.[2] В настоящее время

не существует золотого стандарта для диагностики латентной инфекции ТБ

(ЛТИ) и раннего выявления активного ТБ.

Долгое время проба Манту была единственным иммунологическим методом

ранней диагностики туберкулезной инфекции. [7‑9]

Туберкулиновая кожная проба (ТКП, проба Манту) была известна с конца 19 века. века и основан на

реакции гиперчувствительности замедленного типа к специфическим белкам

возбудителя.Туберкулин был одобрен ВОЗ в

1958 и содержит> 200 антигенов, общих для ТБ, и

не-ТБ микобактерий (НТМ). [7] В результате наблюдается положительный иммунный ответ

на введение туберкулина

у лиц, сенсибилизированных НТМ или иммунизированных палочкой

Кальметта – Герена (БЦЖ). Диагностика

ТБ на основе пробы Манту в странах с

вакциной БЦЖ крайне затруднительна, что приводит к низкой диагностической специфичности

теста.[10]

Тесты, основанные на индукции выделения гамма-интерферона (анализ выделения гамма-интерферона

[IGRA]), основанные на стимуляции

клеточного иммунного ответа иммунодоминантными антигенами

ESAT ‑ 6 и CFP10, специфичные для МТБ, представляют собой диагностическую

альтернативу туберкулиновой пробе; это решает проблему сенсибилизации

при иммунизации БЦЖ и инфекции NTM, что является фактором

при использовании TST. [11]

Два варианта тестирования IGRA были недавно введены в международную практику

: тест QuantiFERON ‑ TB Gold In ‑ Tube

(QFT, Qiagen, Hilden, Германия), где используется цельная кровь

, и T ‑ SPOT. Тест на ТБ (ферментно-связанный

иммуноспот [ELISPOT], Oxford Immunotec, Великобритания, с использованием

очищенных мононуклеарных клеток периферической крови). По данным различных исследований

, их информативность в диагностике туберкулеза составляет

довольно высока: 78% –93%. [12‑14] Появление

тестов IGRA позволило

более точно идентифицировать скрытый ЛТИ. [13,15]

В то же время высокая стоимость этих тестов не позволяет ВОЗ

рекомендовать их в странах с низким уровнем доходов.[2] Необходимость

для специально оборудованной лаборатории, обученного персонала и

внутривенных манипуляций является существенным недостатком тестов

IGRA. Эти ограничения делают невозможным использование тестов

IGRA для крупномасштабных скрининговых исследований, особенно среди

детей (взятие венозной крови), в отличие от TST.

Рекомбинантный туберкулезный аллерген (Диаскинтест) производства

ГЕНЕРИУМ, Россия, представляет собой рекомбинантный гибридный белок

CFP10 ‑ ESAT6, производимый Escherichia coli BL21 (DE3) /

pCFP ‑ ESAT. [16] Диаскинтест, как и ТКП, проводится

in vivo. Он основан на реакции гиперчувствительности замедленного типа

после внутрикожного введения определенных белков. [17‑19] В отличие от пробы Манту

, результаты Диаскинтеста не зависят от

иммунизации БЦЖ. [20] Согласно широкому спектру исследований

Диаскинтест показал высокую чувствительность и специфичность

в диагностике туберкулеза. [7,17,18]

Тест на рекомбинантный туберкулезный аллерген был зарегистрирован в Российской Федерации

в 2008 г. Результаты доклинических исследований

и клинических испытаний и были юридически одобрены для комплексной диагностики ТБ

у детей и подростков с 2009 года.[21‑23]

Мы провели исследование, направленное на сравнение чувствительности

внутрикожного теста с использованием рекомбинантного аллергена TB

(Диаскинтест) с другими иммунологическими тестами в диагностике

активной инфекции ТБ и ЛТИ. Мы также провели

сравнения результатов существующих

иммунологических тестов на ТБ.

МЕТОД

План исследования и участники

Апостериорный анализ данных был проведен в двух противотуберкулезных учреждениях

в Санкт-Петербурге (Россия).Исследование

одобрено Независимым этическим комитетом ФГБУ

Федерального государственного научно-исследовательского института фтизиопульмонологии

Минздрава России (Утверждение

№ 16 от 4 апреля 2014 г.). Это исследование представляет собой ретроспективное когортное исследование

с оценкой результатов всех лиц, которые

посетили медицинские учреждения, чтобы исключить или подтвердить диагноз ТБ

в период с 1 января 2011 г. по 30 декабря 2016 г. .

История болезни, исходные характеристики (например, возраст, пол, вакцинация БЦЖ

, коморбидность, использование иммунодепрессантов и

истории ТБ), а также результаты бактериологического, радиологического и иммунологического обследований

были оценены в участников

включены в исследование. В исследование были включены лица в возрасте 1–65 лет, у которых было

иммунизации БЦЖ.

Подтверждение вакцинации: медицинские карты (дети), свидетельство

рубца от БЦЖ (дети и взрослые).

Критерии исключения из исследования: возраст <1 года

и> 65 лет; диагноз текущего активного туберкулеза;

противотуберкулезная терапия ≥1 месяца; легочный микобактериоз;

тяжелая и / или декомпенсированная коморбидность; ВИЧ-положительный статус

; беременность и лактация у женщин; отсутствие иммунизации БЦЖ

. Также были исключены лица с вторичным иммунодефицитом

, такими как сахарный диабет, трансплантация органов,

и злокачественные новообразования, а также лица, получающие лечение кортикостероидами

.Таким образом, 860 человек

[Загружено бесплатно с http://www.ijmyco.org в пятницу, 9 марта 2018, IP: 90.161.63.226]

Эффективность профилактики и раннего выявления туберкулеза у людей, живущих с ВИЧ

% PDF-1. 4 % 72 0 объект > endobj 101 0 объект > поток application / pdf

  • Эффективность профилактики и раннего выявления туберкулеза у людей, живущих с ВИЧ
  • 2021-02-07T19: 35: 21-08: 002021-02-07T19: 35: 21-08: 002021-02-07T19: 35: 21-08: 00uuid: f64fbdb3-1dd1-11b2-0a00-4509275dc400uuid: f64fbdb6- 1dd1-11b2-0a00-810000000000 конечный поток endobj 1 0 obj > endobj 2 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 3 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 4 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 5 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 6 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 7 0 объект > / MediaBox [0 0 595. 29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 8 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 9 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 10 0 obj > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 11 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 12 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 13 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 14 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 15 0 объект > / MediaBox [0 0 595. 29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 16 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 17 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 18 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 19 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 20 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 21 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 22 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 23 0 объект > / MediaBox [0 0 595. 29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 24 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 25 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 26 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 27 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 28 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 29 0 объект > / MediaBox [0 0 595.29999 841.

    ] / Parent 1 0 R / Resources> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> endobj 30 0 объект > / MediaBox [0 0 595.V Ӻmn8wӷ> + 77K \, F? O rsXU # Q8NYy> 2 \ dFIU} L & Zsy1 [= Джо /

    Эффективность профилактики и раннего выявления туберкулеза у людей, живущих с ВИЧ, bioRxiv — Immunology

    Задний план. Сложная эпидемическая ситуация, вызванная сочетанной инфекцией ТБ / ВИЧ, и, соответственно, необходимость усиления мер по профилактике туберкулеза среди пациентов с ВИЧ, выявила необходимость создания модели сотрудничества противотуберкулезных учреждений и центров СПИД.Цель исследования: анализ эффективности применяемых в Москве мер по предотвращению распространения коинфекции ВИЧ / туберкулез на основе разработанного нового алгоритма. Материалы и методы. Дизайн исследования — ретроспективное полноформатное когортное исследование всех пациентов с ВИЧ в отделении профилактики и раннего выявления туберкулеза у больных с ВИЧ (Отделение ПКЭД ТБ), которое было организовано в 2014 году как подразделение Московского противотуберкулезного центра на территории Московского противотуберкулезного центра. Московский центр СПИДа. Исследование проводилось с 2014 по 2017 год.Обследовано 22 190 ВИЧ-инфицированных. Для выявления туберкулезной инфекции все пациенты с ВИЧ были направлены на кожные пробы с препаратом Диаскинтест, который представляет собой рекомбинантные белки CFP10-ESAT6, а лица с положительной и сомнительной реакцией были обследованы для диагностики туберкулеза и латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ). Пациентам с ЛТИ назначали профилактическую терапию (ПТ), которую также получали пациенты с числом CD4 + ≤350 клеток / мм3, независимо от результатов кожной пробы.Результаты. За 4 года Диаскинтест проведен у 19777 человек. Положительные результаты были у 857 пациентов (4,3%) [95% ДИ 4,1–4,6]. У 131 пациента диагностирован туберкулез, у остальных — ЛТИ. Эффективность ПТ оценивалась по количеству случаев ТБ, выявленных среди пациентов с ВИЧ, завершивших ПТ (1757), и тех, кто ее не получил (5990). Частота регистрации туберкулеза в первой группе составила 228 [95% ДИ 65-582] на 100 000 пациентов, во второй 1486 [95% ДИ 1195–1825], что в 6,5 раз выше.Для оценки эффективности раннего выявления туберкулеза доля форм тяжести туберкулеза легких, диагностированных у 87 пациентов в противотуберкулезном отделении ПКЭР по новому алгоритму в 2016-2017 гг., Была сопоставлена ​​с 411 пациентами, выявленными в различных медицинских организациях Москвы традиционными методами. Доля диссеминированного туберкулеза была ниже в первой группе (23,0% против 44,5%) (p <0,01). Заключение. Исследование показало, что интеграция двух услуг позволяет повысить доступность противотуберкулезной помощи и вносит значительный вклад в повышение эффективности мер по предотвращению распространения туберкулеза среди пациентов с ВИЧ.Он подтверждает необходимость лечения ЛТИ, выявленного с помощью Диаскинтеста, для профилактики туберкулеза у ВИЧ-инфицированных пациентов. Достигнутые значительные эффекты включают снижение уровня регистрации случаев ТБ среди ВИЧ-инфицированных, улучшение диагностической структуры зарегистрированных случаев ТБ в результате их своевременного выявления.

    中文 翻译 :


    艾滋 病毒 感染 者 的 结核病 预防 和 早期 发现 的 有效性

    背景。 由 结核病 / 病毒 合并 感染 造成 的 困难 的 流行 情况 , 因此 , 患者 的 的 的 措施 , ВИЧ-инфекция и ВИЧ-инфекция в 2014 году. 的 结核病 预防 护理 HIV 检测 单位 (性 艾滋病 中心。的 艾滋 病毒 患者 介 代表 重组 CFP10-ESAT6 的 Diaskintest 制剂 进行 皮肤 测试 , 并 检查 了 反应 以 诊断 LTBI)治疗 (PT) , CD4 + 计数 ≤350 / мм3 的 患者 也 接受 了 LTBI , 而 不论 的 结果 如何。 结果。 在 4 的 时间 里 , Diaskintest 19,777 人 。857有 阳性 结果 (4.3)) [95 CI 4.1–4.6] 。131 诊断 出 患有 肺结核 , 其余 的 则被 诊断 LTBI。PT 的 有效性 通过 PT 的 HIV (1757) 和 未 ​​HIV (5990) 中 发现 的 结核病 例 数量 来。 第一 组 的 结核病 报告 率为 每 ​​100 000 228 例 [95 % CI 65-582] , 第二 组 为 1486 [95 % CI 1195–1825] , 高出 6.5 的 早期 发现 的 有效性 , 将 2016-2017 年 使用 新 算法 在 PCED 结核病 科 为 PCED 结核病 的 87 例 患者 中 , 肺结核 程度 比例 与 使用 在 莫斯科 不同 医疗 中的 411 患者 进行 了 比较。 组 中 , 结核病 的 传播 比例 较低 (23,0 % 对 44,5) (p <0,01)。 结论。 该 研究 表明 , 可以 增加 结核病 的及 性 , 并 为 提高 预防 结核病 艾滋 病毒 中 传播 的 措施 的 有效性 做出 大 贡献。 的 的 治疗 使用 Diaskintest 检测 的 LTBI重大 影响 包括 降低 了 艾滋 病毒 患者 的 结核病 报告 率 , 由于 及时 发现 了 结核病 , 登记 的 诊断 结构 得到 了 改善。

    Страница статьи: Российский педиатрический журнал

    Аксенова В. А., Барышникова Л.А., Клевно Н.И. Новые возможности скрининга и диагностики различных проявлений туберкулезной инфекции у детей и подростков в России. В кн .: Кожная проба с препаратом «Диаскинтест» — новые возможности идентификации туберкулезной инфекции. Часть 2, Гл. 1. Москва, 2011: 134-52.

    Мордык А.В., Турица А.А., Кондря А.В., Ароян А.Р., Цыганкова Е.А. Выявление различных форм и локализаций туберкулеза у детей разного возраста: роль скринингового обследования.Рос. педиатр. журн. 2016; 19 (3): 151-6.

    Диль Р., Лодденкемпер Р., Мейвальд-Вальтер К., Готтшалк Р., Ниенхаус А. Сравнительные характеристики туберкулиновой кожной пробы, QuantiFERON-TB-Gold In Tube Assay и T-Spot. Тест на туберкулез в контактных исследованиях на туберкулез. Сундук. 2009; 135 (4): 1010-8.

    Aissa K., Madhi F., Ronsin N., Delarocque F., Lecuyer A., ​​Decludt B. et al. Оценка модели для эффективного скрининга лиц, контактировавших с туберкулезом. Am. J. Respir. Крит.Care Med. 2008; 177 (9): 1041-7.

    Поллок Н., Мак. Адам А., Пай М. Анализы γ-высвобождения интерферона для диагностики латентного туберкулеза у медицинских работников в условиях низкой заболеваемости: за и против. Clin. Chem. 2014; 60 (5): 714-8.

    Поддубная Л.В., Шилова Е.П., Степченко И.М., Кононенко В.Г. Эпидемиологические факторы и иммунологические тесты в формировании групп риска по туберкулезу. Туберкулез и болезни легких. 2015; 5: 153-4.

    Мензис Д., Пай М., Комсток Г. Мета-анализ: новые тесты для диагностики латентной туберкулезной инфекции: области неопределенности и рекомендации для исследований. Анна. Междунар. Med. 2007; 146 (5): 340-54.

    Рангака М.Х., Уилкинсон К.А., Глинн Дж.Р., Линг Д., Мензис Д., Мванса-Камбафвиле Дж. И др. Прогностическая ценность тестов высвобождения интерферона-γ при активном туберкулезе: систематический обзор и метаанализ. Lancet Infect. Дис. 2012; 12 (1): 45-55.

    Дитрих Дж., Аагаард К., Лия Р. и др.Замена ESAT6 на TB 10.4 в противотуберкулезной субъединичной вакцине на основе гибридной молекулы Ag85B: эффективная защита и чувствительный мониторинг эффективности вакцины на основе ESAT6. J. Immunol. 2005; 174 (10): 6332-9.

    Бакир М., Миллингтон К., Сойсал А. и др. Прогностическое значение основанного на Т-клетках биомаркера гамма-интерферона у детей, инфицированных туберкулезом. Анна. Междунар. Med. 2008; 149 (11): 777-86.

    Диль Р., Лодденкемпер Р., Мейвальд-Вальтер К., Ниманн С., Ниенхаус А. Прогностическое значение анализа IFN-гамма цельной крови для развития активного туберкулеза после недавнего заражения Mycobacterium tuberculosis.Am. J. Respir. Крит. Уход. Med. 2008; 177: 1164-70.

    Доэрти Т., Демисси А., Олобо Дж. Иммунные ответы на специфический для Mycobacterium tuberculosis антиген ESAT-6 сигнализируют о субклинической инфекции среди лиц, контактировавших с больными туберкулезом. J. Clin. Microbiol. 2002; 40 (2): 704-6.

    Mazurek G., Weis S., Moonan P. Проспективное сравнение туберкулиновой кожной пробы и двух анализов высвобождения гамма-интерферона цельной крови у лиц с подозрением на туберкулез. Clin. Заразить. Дис. 2007; 45: 837-45.

    Дил Р., Лодденкемпер Р., Ниенхаус А. Доказательное сравнение коммерческого анализа высвобождения гамма-интерферона для выявления активного ТБ: метаанализ. Сундук. 2010; 137 (4): 952-68.

    Леунг К.С., Ям В.С., Ю В.В., Хо П.Л., Там К.М., Ло В.С. и другие. Т-пятно. ТБ превосходит туберкулиновую кожную пробу в прогнозировании заболевания туберкулезом. Am. J. Respir. Крит. Care Med. 2010; 182 (6): 834-40.

    Мачингаидзе С., Вервер С., Муленга Х. и др. Прогностическая ценность недавней конверсии Quanti FERON для лечения туберкулеза у подростков.Am. J. Respir. Крит. Уход. Med. 2012; 186 (10): 1051-6.

    Лалвани А., Пэрик М. Последние 100 лет по диагностике туберкулезной инфекции. Br. Med. Бык. 2010; 93 (1): 69-84.

    Мазурек Г., Джереб Дж., Вернон А. и др. Обновленные рекомендации по использованию анализов высвобождения гамма-интерферона для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis. MMWR Recomm. Rep.2010; 59 (1): 1-25.

    Винтон П., Михршахи С., Джонсон П. , Дженкин Г.А., Джолли Д., Биггс Б.А. Сравнение теста QuantiFERON-TB Gold In-Tube и туберкулинового кожного теста для выявления скрытой инфекции Mycobacterium tuberculosis у медицинского персонала и связь между положительными результатами теста и известными факторами риска инфицирования.Заразить. Контроль. Hosp. Эпидемиол. 2009; 30 (3): 215-21.

    Слотоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Богородская Е.М. Чувствительность теста с рекомбинантным аллергеном туберкулеза, содержащим белок CFP10-ESAT6, у впервые выявленных больных туберкулезом у детей и подростков в г. Москве. Туберкулы и социально значимые заболевания. 2013; 1: 37-44.

    Слогоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Никитина Г.В., Богородская Е.М. Эффективность кожной пробы с рекомбинантным аллергеном туберкулеза при выявлении туберкулеза у детей и подростков Москвы в 2013 г.Педиатрическая фармакология. 2015; 1: 99-103.

    Долженко Е.Н. Использование рекомбинантного туберкулезного аллергена (Диаскинтест) при выявлении активного туберкулеза у детей. Туберкулез и болезни легких. 2013; 6: 28-9.

    Долженко Е.Н., Шейкис Е.Г., Серегина И.В. Диагностические возможности аллергена туберкулезного рекомбинантного при скрининге туберкулезной инфекции у подростков в Рязанской области. инфекция. Туберкулез и болезни легких.2015; 6: 56-7.

    Корнева Н.В., Старшинова А.А., Овчинникова Ю.Е., Довгалюк И.Ф. Сравнение результатов пробы Манту с 2 ТЕ и Диаскинтестом при различных проявлениях туберкулезной инфекции. Туберкулез и болезни легких. 2013; 6: 49-50.

    Соботюк Н.В., Плечанова М.А., Мордык А.В., Веремеевич Л.И., Пацула Ю.И. Оценка специфического гуморального иммунитета у детей и подростков, больных туберкулезом. Рос. педиатр. журн. 2011; 2: 19-22.

    Слотоцкая Л.В., Кочетков Я.А., Сенчихина О.Ю., Сельцовский П.П., Литвинов В.И. Динамика кожной пробы (диаскин-проба) у детей при оценке активности туберкулезной инфекции. Туберкулез и болезни легких. 2011; 2: 59-63

    Моисеева Н.Н., Одинец В.С. Опыт применения кожной пробы с диаскинтестом при массовом обследовании на туберкулез. Туберкулез и болезни легких. 2015; 7: 92-3.

    Бармина Н.А., Барышникова Л.А., Шурыгин А.А., Рейхардт В.V. Скрининговое обследование детей и подростков III, IV и V групп здоровья с использованием нового диагностического теста. Туберкулез и болезни легких. 2015; 5: 40-1.

    Сотнева И.Б., Павлунин А.В. Использование выборки с диаскин-тестом для массового обследования детей и подростков Нижегородской области в 2013 году. Туберкулез и болезнь легких. 2015; 6: 173.

    Бочарова И.В., Демин А.В. Доклинические исследования специфической активности препарата «Диаскинтест».Б кн .: Кожная проба с препаратом «Диаскинтест» — новые возможности выявления туберкулезной инфекции. Часть 1, Глава 7. Под ред. Второе, переработанное и дополненное, изд. Пальцева М.А. М .; 2011. С.114-25.

    Велдингх К., Андерсен П. Кожный тест ESAT-6 / CFP10 предсказывает заболевание у морских свинок, инфицированных M. tuberculosis. PLoS ONE. 2008; 3 (4): 1978.

    Ламберти М., Уччелло Р., Монако М. и др. Туберкулиновая кожная проба и Соглашение о тесте квантиферона и влияющие факторы при скрининге медицинских работников на туберкулез: систематический обзор и метаанализ.Журнал медицины труда и токсикологии. 2015; 10: 2. Электронная версия этой статьи является полной, и ее можно найти в Интернете по адресу: Доступно по адресу: https://occup-med.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12995-015-0044-y (дата обращения: 27 апрель 2017)

    Борисов С.Е., Лукина Г.В., Слогоцкая Л.В. Скрининг и мониторинг туберкулезной инфекции у ревматологических больных, получающих генно-инженерные биологические препараты. Туберкулез и болезни легких. 2011; 6: 42-50.

    Салинас К., PascualErquicia S., Diez R. et al. Трехмесячный курс рифампицина и изониазида для лечения латентной туберкулезной инфекции. Med. Clin. (Barc.) 2010; 135 (7): 293-9. DOI: 10.1016 / j.medcli.2010.02.038.

    Овсянкина Е.С., Губкина М.Ф., Панова Л.В., Ючименко Н.В. Методы скрининга на туберкулезную инфекцию у детей и ее роль в формировании групп риска и диагностике заболевания. Рос. педиатр. журн. 2017; 20 (2): 108-15.

    Туберкулез в Российской Федерации, 2012.2013.2014. Аналитический обзор статистических показателей, используемых в Российской Федерации и в мире. Москва; 2015; 311.

    Заявка на патент США для кожных тестов на туберкулез у лиц с ослабленным иммунитетом Заявка на патент (заявка № 201

    479 от 23 мая 2019 г.)
    ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    Настоящее изобретение относится к применению антигенов Mycobacterium tuberculosis для приготовления специфической тестовой композиции для кожи с улучшенными диагностическими характеристиками ТБ у M.tuberculosis и коинфекции ВИЧ. Настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую антигенов Mycobacterium tuberculosis (Mtb), для диагностики инфекции Mtb in vivo у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, где реагент представляет собой смесь двух антигенов ESAT6 и CFP-10.

    ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ

    Обзор TB / PPD

    С момента открытия в 1908 году Робертом Кохом очищенное производное туберкулина белка (PPD) использовалось в качестве диагностического теста для скрытой инфекции Mtb.

    Использование диагностического теста на скрытую инфекцию Mtb в качестве руководства для профилактического лечения оказывает драматическое влияние на более позднее развитие туберкулеза. Люди, инфицированные МТБ, не имеют симптомов и нуждаются в более мягком режиме лечения, тогда как пациенты с активным туберкулезом имеют тяжелое заболевание, высокую смертность и требуют более длительного и сложного лечения. Считается, что ⅓ населения мира инфицировано Mtb, у 8 миллионов человек ежегодно развивается активный туберкулез, из которых 1,3 миллиона умирают.

    При применении в качестве диагностического теста небольшой объем 0.1 мл PPD вводится в верхний слой кожи, и через 2-3 дня можно определить положительную реакцию, измерив уплотнение кожи с помощью простой линейки. Иммунологический фон кожной реакции PPD представляет собой реакцию гиперчувствительности замедленного типа IV типа, реакцию, опосредованную в первую очередь PPD-специфическими Th2 Т-клетками.

    PPD при применении, как описано Менделем и Манту, одобрен Всемирной организацией здравоохранения с 1955 года, а туберкулиновый кожный тест (TST) на основе PPD остается одним из наиболее широко используемых диагностических тестов, каждый из которых выполняется более 50 миллионов тестов. год.PPD представляет собой комплексный фильтрат культуры из M. tuberculosis , содержащий более 1000 белковых антигенов, помимо липидов и углеводов. Это делает PPD широко распознаваемым Mtb-инфицированными людьми, и он очень иммуногенен, вызывая сильный ответ Th2 Т-клеток в коже. Однако грубый и сложный состав PPD также является причиной проблем с PPD TST. Важно отметить, что множественные антигены в PPD также распознаются регуляторными Т-клетками, ограниченными CD1 Т-клетками и Th3-клетками, которые избирательно могут ингибировать возникновение реакции типа IV.Кроме того, множественные антигены в PPD также экспрессируются микобактериями окружающей среды и Bacillus Calmette-Guérin (BCG), используемым для вакцинации против туберкулеза, что делает тест PPD неспецифичным.

    ВИЧ и лица с ослабленным иммунитетом.

    Другой серьезной проблемой при использовании PPD TST является его ненадежность у лиц с ослабленным иммунитетом. В особенности у людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), PPD TST часто перестает отвечать и дает ложноотрицательный результат, или может оказаться ложноположительным из-за применения слишком низкого отсечения.

    Иммунологический фон влияния ВИЧ на способность PPD вызывать кожную реакцию IV типа сложен, однако установлено, что селективная потеря CD4 Т-клеток ВИЧ-инфекцией является основной причиной. Таким образом, иммунодефицит, вызванный потерей CD4 T-клеток, является как основным фактором, приводящим к заболеванию, вызванным условно-патогенными инфекционными вирусами и бактериями (отличительным признаком ВИЧ / СПИДа), так и неспособностью реагировать на PPD TST.

    Последствия этой дилеммы могут быть смертельными.Часто ВИЧ-инфекция (или другой иммунодефицит) не диагностируется во время тестирования PPD TST. Следовательно, ответственный врач часто ложно полагается на результат PPD TST. Это ложное чувство безопасности часто приводит к неправильному диагнозу и отсутствию адекватного лечения инфекции Mtb, что приводит к более позднему развитию активного туберкулеза. Фактически, пациенты, инфицированные Mtb с ВИЧ / СПИДом, имеют 10% -ный годовой риск развития ТБ, а ТБ — болезнь, от которой умирает большинство пациентов с ВИЧ / СПИДом.

    Решение проблемы перекрестной реактивности с БЦЖ

    Как уже упоминалось выше, перекрестная реактивность с БЦЖ и микобактериями окружающей среды является основным ограничением для PPD TST.Перекрестная реактивность ставит под угрозу специфичность и потенциально приводит к избыточному лечению из-за ложноположительных ответов. Проблема специфичности может быть решена в некоторой степени, но не полностью, путем увеличения порога отсечки для TST с 5 мм до 10 мм или даже 15 мм уплотнения, однако увеличение отсечки снижает чувствительность теста.

    Дальнейшая потеря чувствительности может оказаться фатальной, особенно для ВИЧ-инфицированных и других больших групп пациентов с высоким риском развития ТБ, если не будет предложено адекватное лечение инфекции Mtb.Следовательно, тестирование на ВИЧ перед тестированием PPD TST, например, в Для оптимального выполнения PPD TST потребуется вакцинация БЦЖ. Однако из-за ограниченных ресурсов и табу как среди медицинских работников, так и среди пациентов, тестирование на ВИЧ часто не предлагается или не принимается человеком, нуждающимся в тестировании на PPD TST.

    Эпоха специфического тестирования

    Открытие специфических иммунодоминантных антигенов Mtb открыло новые важные возможности для диагностики инфекции Mtb. Ранняя работа показала возможность замены PPD TST тестом, который оценивал продукцию интерферона гамма (IFN-γ) Т-клетками в ответ на антигены Mtb in vitro.Примерно в то же время важным достижением стало открытие высокоиммуногенных антигенов, рано секретируемой антигенной мишени 6 (ESAT-6) и протеина фильтрата культуры 10 (CFP-10), которые значительно улучшили специфичность. Эти антигены кодируются в области различия 1 (RD1) патогена и, следовательно, отсутствуют во всех штаммах вакцины Bacille Calmette Guerin (BCG) и в большинстве нетуберкулезных микобактерий (исключения включают Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum, Mycobacterium szulgai ). .

    IFN-γ ответы на перекрывающиеся пептиды кодируемых RD1 антигенов ESAT-6 и CFP-10 формируют основу для выявления инфекции Mtb в двух коммерчески доступных анализах высвобождения IFN-γ (IGRA): QuantiFERON-TB Gold (QIAGEN , Германия) и T-SPOT.TB (Oxford Immunotec, Оксфорд, Великобритания).

    QuantiFERON-TB Gold (QFT, QIAGEN, Германия), иммуноферментный иммуноферментный анализ цельной крови (ELISA), имеет европейский сертификат CE и одобрен Американским Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для выявления как латентной инфекции, так и заболевания ТБ.

    T-SPOT.TB (Oxford Immunotec, Оксфорд, Великобритания), иммуноферментный анализ (ELISPOT), в котором используются мононуклеарные клетки периферической крови, одобрен европейским знаком CE и одобрен FDA.

    Ограничения IGRA

    Однако, несмотря на очевидные превосходные характеристики IGRA по сравнению с TST, IGRA имеет несколько ограничений:

    Тесты IGRA на основе образцов крови требуют взятия крови, сложного лабораторного оборудования и обученного персонала для его выполнения. Эти ограничения делают тест практически невозможным для реализации в настройках ограничения ресурсов, где такие тесты наиболее востребованы.Тесты IGRA также могут вызывать проблемы на этапе преанализа, например: ложноотрицательные ответы из-за отсроченного начала этапа инкубации.

    По сравнению с PPD TST, диагностическая эффективность тестов IGRA также требует, чтобы человек, подвергаемый тестированию, имел надежный иммунный ответ. Так же, как и в случае PPD TST, чувствительность IGRA может быть нарушена у лиц с ослабленным иммунитетом. В частности, пациенты с ВИЧ-инфекцией и низким числом Т-лимфоцитов CD4 или пациенты, получающие иммунодепрессанты, часто испытывают ложноотрицательные или неопределенные ответы.

    Вероятная основная причина плохой работы тестов IGRA при иммуносупрессии заключается в их зависимости от обнаружения очень слабого сигнала IFN-γ, который считается положительным (17,5 пг / мл или 6 реактивных Т-клеток на 200 000 PBMC). Такие низкие ответы граничат с уровнями обнаружения наиболее чувствительных анализов, используемых в клинической медицине.

    Таким образом, кожная проба, при которой иммунная реакция может быть вызвана потенциально любыми специфическими Т-клетками, доступными в организме, кажется сама по себе гораздо более надежной по сравнению с диагностическим тестом in vitro, в котором доступное количество Т-клеток ограничено небольшое количество клеток, включенных в образец.

    В мета-анализе Cattamanchi et al. (JAIDS 2011, 56 (3) 230-238) показали, что для ВИЧ-инфицированных лиц с активным ТБ (суррогатный эталонный стандарт для ЛТИ) объединенные оценки чувствительности были неоднородными, но выше для T- Анализ SPOT. TB (72%; 95% ДИ, 62–81%), чем для анализа QFT (61%; 95% ДИ, 47–75%) в странах с низким и средним уровнем дохода. Однако ни один из тестов IGRA не был стабильно более чувствительным, чем PPD TST при прямом сравнении. Авторы пришли к выводу, что на IGRA может в меньшей степени влиять степень иммуносупрессии, вызванной ВИЧ, по сравнению с PPD TST, но результаты различались в зависимости от географических регионов.

    Потенциально опасные для жизни последствия ложноотрицательных результатов PPD TST и IGRA были описаны Сестером и др. (Am J Respir Crit Care Med. 2014 Nov 15; 190 (10): 1168-76. Doi: 10.1164 / rccm.201405- 09670С.). В этом большом проспективном исследовании с участием 768 пациентов с ВИЧ-инфекцией у восьми пациентов с ВИЧ-инфекцией развился активный туберкулез во время последующего наблюдения. Пятеро из 8 пациентов с определенным результатом теста IGRA имели ложноотрицательный результат теста IGRA во время скрининга и не получали профилактического лечения.Еще 3 ВИЧ-инфицированных, у которых развился ТБ, имели неопределенный результат теста IGRA. PPD TST была проведена всем 11 больным туберкулезом. В этой группе только 4 из 11 протестированных были положительными с использованием оптимизированного для ВИЧ отрезка 5 мм.

    Диаскинтест представляет собой рекомбинантный слитый белок CFP10 -ESAT6, продуцируемый в E. coli BL21 (DE3) / pCF-ESAT. Белок представлен в виде белка с 6-кратной гистидиновой меткой и производится Generium в Российской Федерации. Доза составляет 0,2 мкг / 0,1 мл. Индурация любого размера считается признаком инфекции Mtb.Гистидиновая метка создает риск неоэпитопов. Сообщается, что диаскинтест работает с приемлемой специфичностью, но с высокой частотой (4–14%) везикулярно-некротическими изменениями, лимфангитом и лимфаденитом (Киселев В.И.; Пробл. Туберкулез. Болезн. Легк. 2009; 2: 11-6). Повторные инъекции высоких доз антигена могут создавать риск сенсибилизации, что может привести к ложноположительным реакциям, что еще больше увеличивает риск побочных реакций. Диаскинтест — единственный препарат, находящийся в клиническом применении. В нескольких исследованиях изучалась эффективность диаскинтеста у ВИЧ-инфицированных людей и было обнаружено очень сильное негативное влияние ВИЧ-инфекции на эффективность диаскинтеста.Панкратова обнаружила чувствительность 42,9% у ВИЧ-положительных субъектов по сравнению с 79,7% у лиц без ВИЧ-инфекции (Панкратова Л. и др., European Respiratory Journal 2012, том 40, Дополнение 56 / P431), аналогичные важные результаты были получены Литвиновым; 43,5% среди ВИЧ-инфицированных по сравнению с 89,7% среди ВИЧ-отрицательных случаев (Litvinov et al, Am J Respir Crit Care Med 185; 2012: A4703).

    Таким образом, PPD TST является привлекательным и простым тестом на латентную инфекцию Mtb, однако компонент антигена PPD неспецифичен, и результаты теста PPD TST у ВИЧ-инфицированных часто являются ложноотрицательными.Тест IGRA основан на специфических антигенах Mtb ESAT-6 и CFP10 и направлен на решение проблем специфичности теста PPD TST, однако эти тесты сложны в реализации и выполнении, а также часто дают ложноотрицательные результаты у ВИЧ-инфицированных. Диаскинтест обеспечивает кожный тест со специфичностью, подобной IGRA, однако эффективность диаскинтеста у ВИЧ-инфицированных сильно снижается, при этом чувствительность снижается вдвое у ВИЧ-инфицированных по сравнению с ВИЧ-неинфицированными. Следовательно, существует потребность в новом диагностическом кожном тесте на инфекцию Mtb с более высокой специфичностью по сравнению с PPD TST и повышенной чувствительностью у ВИЧ-инфицированных.

    СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    Изобретение раскрывает способ диагностики in vivo (кожные тесты) и диагностические агенты для диагностики Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, лиц, которые в противном случае не были бы признаны инфицированными M. tuberculosis из-за отсутствия чувствительности существующих тестов.

    Эффект достигается за счет использования смеси M. tuberculosis антигенов ESAT6 и CFP10 для приготовления средства для кожных тестов, состоящего из смеси, содержащей эти антигены. В предпочтительном воплощении используется смесь антигенов rdESAT-6 и rCFP-10. Комбинация антигенов C-Tb очень эффективна при ВИЧ-инфицированных, демонстрируя общее снижение чувствительности только на 33% по сравнению с 45% для квантиферона. В отличие от других методов тестирования, C-Tb, по-видимому, подвержен влиянию ВИЧ-инфекции только в наиболее тяжелых случаях с количеством CD4 + Т-клеток <100 CD4 + Т-клеток / мкл.

    ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    Настоящее изобретение раскрывает композицию, содержащую антигенов Mycobacterium tuberculosis для использования при определении in vivo наличия инфекции Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, при этом агент представляет собой смесь двух антигенов ESAT6 и CFP-10.

    Настоящее изобретение раскрывает использование антигенов Mycobacterium tuberculosis для приготовления диагностического средства для кожных проб (средство для кожных проб) для надежной оценки наличия инфекции Mtb у индивидуума, у которого индивидуум является человеком с ослабленным иммунитетом или человеком. коинфекция ВИЧ.

    Настоящее изобретение также раскрывает способ диагностики инфекции Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или у лиц, коинфицированных ВИЧ. Метод диагностики основан на измерении силы реакции кожи, возникающей в ответ на стимуляцию определенных иммунных клеток путем инъекции небольшого объема специфических антигенов Mtb.

    Два антигена предпочтительно клонировать, продуцировать и очищать из подходящего организма, например из Lactococcus lactis , rESAT6 и rCFP10, и наиболее предпочтительно двойной ESAT-6 (rdESAT-6; две молекулы ESAT-6, слитые вместе). rdESAT-6 и rCFP10 предпочтительно смешиваются в соотношении 1: 1 (мас. / мас.). Композиция включает два антигена, смешанные в носителе, где наиболее предпочтительный носитель включает фосфатно-солевой буферный раствор (PBS) с 0,01% полисорбата 20 и 0,5% фенола.

    Определения

    Термин «туберкулез» относится к клиническому состоянию туберкулезное заболевание, вызываемое различными штаммами микобактерий, обычно Mycobacterium tuberculosis.

    Термин «латентная инфекция M. tuberculosis » относится к субклинической или латентной инфекции M. tuberculosis , которая определяется наличием иммунного ответа на M. tuberculosis без признаков или симптомов активного заболевания .

    Термин «ESAT-6» в настоящем изобретении относится к ранней секреторной антигенной мишени 6 кДа, продуцируемой Mycobacterium tuberculosis (esxA), представляет собой секреторный белок и мощный Т-клеточный антиген, локусный тег Rv3875

    Термины « CFP10 »в настоящем изобретении относится к секретируемому антигену 10 кДа из Mycobacterium tuberculosis , также известному как ESAT-6-подобный белок esxB или секретируемый антигенный белок MTSA-10 или антиген фильтрата культуры 10 кДа, Rv3874.

    Термины «коктейль» и «коктейль антигенов» в настоящем изобретении относятся по меньшей мере к двум белкам вместе в носителе или растворе.

    Термин «иммунодефицит», или «иммуносупрессия», или «иммунодефицит» относится к состоянию, при котором способность иммунной системы бороться с инфекционным заболеванием или создавать иммунный ответ нарушена или полностью отсутствует.

    Термин «C-Tb» относится к приготовлению композиции rdESAT-6 и rCFP-10.

    Термин «ВИЧ» относится к лентивирусу Вируса иммунодефицита человека, который вызывает ВИЧ-инфекцию и со временем может привести к синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД)

    Под термином «гибридный белок» понимается случайный порядок двух или более иммуногенных полипептиды из M.tuberculosis или его аналоги, слитые вместе с аминокислотным линкером / спейсером (ами) произвольной длины и последовательности или без них. Чтобы избежать агрегации белка при последующем производстве, все цистеины в слитом белке можно заменить любой аминокислотой, но серин является предпочтительной заменой из-за его высокого структурного сходства с цистеином.

    Удивительно высокая диагностическая чувствительность ВИЧ-инфицированных, вероятно, достигается за счет совокупности механизмов. Реагент для кожной пробы C-Tb состоит из смеси антигенов по сравнению с e. г. Диаскинтест, представляющий собой гибридную конструкцию, включающую два белка, соединенных линкером. Дизайн коктейля C-Tb предлагает несколько потенциальных преимуществ, включая лучшую экспозицию эпитопов без вмешательства со стороны линкерных белков. Кроме того, формат кожных тестов имеет преимущества перед форматом IGRA. Продолжительный инкубационный период позволяет набирать ту же популяцию эффекторных Т-клеток, как отслеживается в IGRA, но, кроме того, также рекрутировать популяцию менее дифференцированных клеток.Более широкое привлечение Т-клеток в сочетании с форматом коктейля для кожных тестов, вероятно, позволило достичь более высокой чувствительности.

    Диагностический агент для кожной пробы включает два антигена ESAT6 и CFP10. В предпочтительном варианте осуществления реагент для кожной пробы состоит из смеси рекомбинантных версий двух антигенов. В наиболее предпочтительном варианте осуществления два антигена представляют собой двойной ESAT-6 (rdESAT-6; две молекулы ESAT-6, слитые вместе) и rCFP-10. Два антигена клонируют, ферментируют и очищают в подходящем организме e.г. из Lactococcus lactis или E. coli . Антигены смешивают в носителе или фармацевтически приемлемом носителе. В наиболее предпочтительном варианте осуществления rdESAT-6 и CFP10 смешивают в соотношении 1: 1 (мас. / Мас.) В носителе фосфатно-солевого буфера (PBS) с 0,01% Polysorbate 20® (и 0,5% фенола). Количество дозы антигена находится в диапазоне 0,25–2,0 мкг / мл каждого антигена. Предпочтительное количество составляет 0,1 мкг / 0,1 мл, что соответствует общей концентрации 1 мкг антигенов / мл, соответствующей 0.По 5 мкг / мл каждого. Этот специфический препарат rdESAT-6 и rCFP-10 называется C-Tb. Реагент не ограничивается только этими антигенами, но может дополнительно включать другие антигены, такие как Rv3615.

    Проведение кожной пробы

    Кожная проба выполняется путем внутрикожной инъекции небольшого объема C-Tb, например 0,1 мл во внутреннюю поверхность предплечья.

    Инъекцию следует производить туберкулиновым шприцем конусом иглы вверх. Однако можно использовать и другие способы внутрикожной инъекции.При правильном размещении инъекция C-Tb должна вызвать бледное возвышение кожи (волдырь) от 6 до 10 мм в диаметре.

    Реакцию кожной пробы следует читать через 48-72 часа после приема. Пациенту, который не вернется в течение 72 часов, необходимо будет перенести еще один кожный тест.

    Степень кожной реакции можно определить, измерив уплотнение в миллиметрах (диаметр пальпируемого, приподнятого, уплотненного участка или припухлости). Диаметр уплотненной области следует измерять поперек предплечья (перпендикулярно длинной оси предплечья).

    Уплотнение в 5 миллиметров или более, используемое в примере материала, является предпочтительным отрезком, несмотря на то, что могут использоваться другие отрезки, включая 10, 4, 3, 2, 1, или даже любую реакцию, превышающую 0 миллиметра. .

    Концепция C-Tb заключается в объединении хорошо известной техники Манту с использованием специфических антигенов из IGRA в специфический кожный тест с использованием единого универсального порогового значения уплотнения 5 мм независимо от вакцинации БЦЖ и статуса ВИЧ, считываемого через 2– 3 дня для выявления лиц, инфицированных Mtb, доставленных и переведенных медицинским персоналом или медперсоналом на месте.

    Диагностика

    Кожные пробы со специальным реагентом особенно полезны для людей с иммунодепрессией. ВИЧ составляет ключевую группу риска, в которой инфекция Mtb может быстро перейти в активную форму заболевания. У ВИЧ-инфицированных людей нарушена функция CD4-Т-лимфоцитов, поэтому кожные пробы с реагентом конкретно нацелены на Т-клетки Th2, а не на Th3 или регуляторные Т-клетки.

    Целевая группа по C-Tb включает лиц, подвергшихся воздействию Mtb, или лиц, проявляющих признаки или симптомы ТБ, с особым вниманием к группам с повышенным риском развития ТБ после заражения.Эти группы включают, но не ограничиваются ими, недавно инфицированные, выявленные при отслеживании контактов, детей в возрасте до 5 лет и ВИЧ-инфицированных.

    Настоящее изобретение обеспечивает реагент для кожной пробы для надежной оценки наличия инфекции Mtb у лиц, коинфицированных ВИЧ. Как ясно продемонстрировано в приведенных примерах, пример специфической кожной пробы (C-Tb) имеет лучшие характеристики по сравнению с PPD TST и IGRA.

    rdESAT-6 и CFP10 смешиваются в транспортном средстве в соотношении (мас. / Мас.), Хотя в предпочтительном варианте осуществления соотношение составляет 1: 1, другие соотношения мас. / Мас., Включая 1: 5, 1: 4, 1: 3, 1: 2; 2: 1, 3: 1, 4: 1, 5: 1 и другие соотношения, охватывающие 1:20 и 20: 1, могут оказаться полезными.

    Доза антигена находится в диапазоне 0,25-20,0 мкг / мл каждого антигена. Предпочтительное количество составляет 0,1 мкг / 0,1 мл, что соответствует общей концентрации 1 мкг антигенов / мл, соответствующей 0,5 мкг / мл каждого. Ожидается, что большее количество антигена будет вызывать более сильные реакции уплотнения кожи, но увеличивает риск побочных или излишне сильных реакций. В зависимости от клинической ситуации, генетического или этнического состава, степени иммуносупрессии или других характеристик тестируемой популяции доза антигена может быть выбрана в диапазоне от 0.25-20,0 0,25-20,0 мкг / мл каждого антигена.

    Хотя настоящее изобретение описывает специфический препарат rdESAT-6 и rCFP-10, агент не ограничивается только этими антигенами, но может дополнительно включать другие антигены, такие как espC (Rv3615) или другие специфические антигены, экспрессируемые M. tuberculosis. . Некоторые антигены, о которых известно, что они специфически экспрессируются инфекционными организмами в комплексе M. tuberculosis , могут быть подходящими добавками или заменами ESAT-6 и CFP10 в C-Tb.Эти антигены включают ограниченные по RD1 антигены, ассоциированные с RD1 антигены и антигены с иммунодиагностическим потенциалом, такие как Rv2564, Rv3865, Rv3877, Rv2348, Rv3614, Rv3616 и другие, известные специалистам.

    Предпочтительный вариант теста C-Tb предполагает внутрикожную инъекцию. Следует понимать, что инъекции с помощью шприца и иглы — лишь один из нескольких способов введения. Альтернативные методы включают в себя ружье Heaf (Sterneedle) и различные другие методы, такие как, помимо прочего, струйное впрыскивание, доставка снаряда с использованием порошка и частиц золота (т.е.е., генная пушка), твердые пластыри с микроиглами (металлические или растворяющиеся микроиглы), местное добавление C-Tb после предварительной обработки микроиглами, тату-пистолеты или технологии, разработанные для увеличения проницаемости кожи в сочетании с пластырем для доставки, например абразия кожи, ультразвук, электропорация, лазерная обработка, химические усилители и термическая абляция.

    РИСУНОК ЛЕГЕНДЫ

    РИС. 1. Уровень положительности C-Tb (черный; граница 5 мм) и QFT (белый; граница 0,35 МЕ / мл) среди 534 ВИЧ-отрицательных и 277 ВИЧ-положительных подозреваемых на ТБ.Полоса ошибок указывает 95% доверительный интервал.

    РИС. 2. Уровень положительности C-Tb (черный) и QFT (белый) стратифицирован в соответствии с количеством CD4 среди 292 подозреваемых на ТБ. Полоса ошибок указывает 95% доверительный интервал.

    ПРИМЕРЫ

    Диагностический агент C-Tb был получен путем клонирования, ферментации и очистки рекомбинантных версий двух антигенов rdESAT-6 и rCFP-10 из Lactococcus lactis . Антигены смешивали в эквимолярных количествах ESAT-6 и CFP-10, соответствующих весовому соотношению 1: 1 rdESAT-6 и rCFP-10 в носителе фосфатно-солевого буфера (PBS) с 0.01% Polysorbate 20® (и 0,5% фенола)

    Диагностическая эффективность C-Tb, PPD и IGRA под названием QuantiFERON®-TB Gold In Tube (QFT) сравнивалась в исследовании III фазы с участием младенцев и детей младше 5 лет. лет с подозрением на инфекцию Mtb, а также у детей старшего возраста и взрослых с подозрением на туберкулез. В исследование 1190 человек вошли 299 ВИЧ-положительных и 730 ВИЧ-отрицательных. Кровь для QFT-тестирования была собрана до кожной пробы. C-Tb и PPD вводили двойным слепым методом в отдельные руки в рандомизированном дизайне с разделенными корпусами.Были включены результаты добровольцев с доступными парными результатами.

    Как видно из фиг. 1, C-Tb и QFT показали одинаковый уровень положительности среди ВИЧ-отрицательных пациентов, 292/534 (54,7%) были положительными с C-Tb и 285/534 (53,4%) были положительными с QFT. С помощью обоих тестов было протестировано 277 ВИЧ-инфицированных. Неожиданно C-Tb выявил значительно больше инфицированных Mtb, чем тест QFT, 102/277 (36,8%) дали положительный результат на C-Tb и только 80/277 (28,9%) дали положительный результат на QFT (таблица 1, McNemar; P = 0 .009).

    ТАБЛИЦА 1 QFT HIV pos + −SC-Tb + 59 43102−21154175S80197277P = 0,009

    При расслоении результатов покоя по количеству Т-лимфоцитов CD4 (фиг. 2) становится очевидным, что более высокая чувствительность от C-Tb происходит из-за значительного увеличения устойчивости не только к слоям Т-лимфоцитов с низким содержанием CD4, но и по всему спектру количества Т-лимфоцитов CD4.

    Диагностические преимущества добавления EspC, EspF и Rv2348-B к комбинации антигенов QuantiFERON Gold в пробирке

    Диагностика LTBI является ключевой для контроля заболеваний и управления программами; тем не менее, нынешних методов недостаточно.Поэтому много усилий вкладывается в разработку новых диагностических инструментов, а также в улучшение существующих. Следуя этому направлению, в данном исследовании мы оценили эффект добавления дополнительных специфических антигенов (EspC, EspF и Rv2348-B) к антигенам, которые в настоящее время используются в QFN-G-IT, чтобы проверить, улучшила ли их иммуногенность эффективность анализа, увеличивая , следовательно, точность теста.

    Novel M. tuberculosis антигены были тщательно изучены с целью более точной характеристики инфекции ТБ 10,12,13,14 . В этом исследовании иммунный ответ против новых комбинаций антигенов оценивали путем измерения уровней IFN-γ, продуцируемых после специфической стимуляции. Проверенные здесь антигенные комбинации давали ответ IFN-γ, сравнимый с ответом, полученным с помощью QFN-G-IT (коэффициент Спирмана выше 0,86). Стимуляция всеми тестируемыми условиями давала значительно более высокие уровни IFN-γ у пациентов с активным туберкулезом и лиц с ЛТИ по сравнению со здоровым контролем (p <0,0001). После анализа кривой ROC и выбора пороговых значений были рассчитаны результаты испытаний.Добавление EspC, EspF и Rv2348-B к используемым в настоящее время ESAT-6, CFP-10 и TB7.7 позволило выявить еще семь положительных случаев. Добавление EspC и EspF выявило менее положительные случаи, чем когда присутствовали три дополнительных антигена, но дало более положительные результаты по сравнению с добавлением EspC и Rv2348-B (два больше при рассмотрении всей популяции и один при исключении здоровых контролей). Эти результаты показывают, что добавление EspC могло увеличить идентификацию положительных случаев вместе с EspF и Rv2348-B, поскольку последний антиген добавляет наименьшее количество. Однако добавление этих дополнительных антигенов может также увеличить количество неспецифических ответов, как видно из внутренних QFN + A и + B, которые определяют как положительные случаи трех и одного здорового контроля, соответственно.

    Недавно Whitworth et al. оценили IGRA на основе ELISPOT второго поколения, в котором они добавили EspC к ESAT-6 и CFP-10 19 . В этом исследовании они также пришли к выводу, что при добавлении этого дополнительного антигена диагностическая чувствительность увеличивается по сравнению с T-SPOT.TB и QFN-G-IT с небольшим снижением специфичности до 80%, аналогично тому, что мы получили в этом исследовании (87,5% как наименьшее значение специфичности). Хотя очевидно, что повышение специфичности и чувствительности новых комбинаций антигенов является незначительным, эти улучшения могут означать большой прогресс при рассмотрении ВИЧ-инфицированной популяции 20 , пациентов, получающих иммуносупрессивную терапию, 21 , людей с диабетом 22 , и дети в возрасте до 5 лет 23,24 , которые относятся к группе высокого риска развития ТБ и у которых на показатели IGRA может повлиять ослабленный или незрелый иммунный ответ. Кроме того, последняя новая версия QFN-G-IT, QuantiFERON-TB Gold Plus (QFN-Plus), была описана как эквивалент QFN-G-IT в многочисленных исследованиях, проведенных на различных сайтах. и с учетом различных исследуемых групп 25,26,27,28 . Учитывая, что добавление антигенов, представленных в этом исследовании, действительно увеличивает чувствительность теста QFN-G-IT, а в случае собственного QFN + C без потери специфичности их использование для улучшения существующих диагностических инструментов не следует упускать из виду, особенно при рассмотрении определенных групп пациентов, таких как вышеупомянутые.

    Учитывая иммуногенность ESAT-6, этот антиген был тщательно изучен как кандидатный компонент для защитных и терапевтических вакцин 29,30,31,32,33 . Более того, недавно было предложено использование этого специфического антигена M. tuberculosis , которое уже проходит испытания в качестве кожного теста следующего поколения вместе с CFP-10 в нескольких исследованиях 34,35,36,37 . Было показано, что разработанные кожные тесты ESAT-6 и / или CFP-10 безопасны и не дают перекрестной реакции с вакциной БЦЖ и нетуберкулезными микобактериями.

    В этом контексте изучается разработка IGRA без ESAT-6, который мог бы служить в качестве сопутствующего диагностического теста в случае будущей вакцины на основе ESAT-6 18,38 . До сих пор не содержащий ESAT-6 IGRA, содержащий CFP-10, TB7.7, EspC, EspF и Rv2348-B, давал многообещающие результаты, демонстрируя сопоставимые характеристики с QFN-G-IT. Хотя это было сделано на небольшой группе пациентов, стоит отметить, что в ходе этого исследования мы также протестировали эту же бесплатную комбинацию ESAT-6 в 9 образцах (5 от пациентов с активным туберкулезом, 1 от лиц с ЛТБИ и 3 от здоровых людей из контрольной группы).Принимая во внимание респондентов с уровнями антиген-специфического IFN-γ выше 0,61 МЕ / мл (недавно установленное пороговое значение) 38 , все здоровые контроли были отрицательными, индивидуум с ЛТИ был положительным и все пациенты с активной формой ТБ, кроме одного ( с высвобождением IFN-γ 0,56 МЕ / мл) были положительными. Эти результаты аналогичны результатам, описанным Nemes et al. 38 и Ruhwald et al 18 с сопоставимыми показателями специфичности и чувствительности. Эти результаты, хотя и представлены в очень небольшом количестве, дополняют предыдущие исследования, проведенные в этом направлении 18,19,38 , и подчеркивают многообещающие перспективы использования этой новой антигенной комбинации для будущей диагностики ТБ.

    В этом исследовании иммунный ответ, возникающий после стимуляции различными комбинациями антигенов, оценивался исключительно по количеству высвобожденного IFN-γ. Однако, чтобы лучше охарактеризовать этот ответ, было бы очень интересно изучить присутствие других цитокинов, таких как интерферон-гамма-индуцированный белок 10 (IP-10), комбинация цитокинов и маркеров, таких как CD27, CD38, HLA- DR и Ki67 7,39,40,41 .

    Кроме того, было показано, что TST и IGRA обладают пониженной чувствительностью у пациентов с высоким риском развития ТБ, таких как дети, ВИЧ-положительные люди и пациенты с иммуноопосредованными воспалительными заболеваниями (IMID) 42,43 . Тестирование комбинаций антигенов, используемых в этом исследовании, на когорте пациентов с высоким риском туберкулеза было бы очень интересным, чтобы охарактеризовать их иммунный ответ и сравнить его с реальными IGRA в поисках улучшенного инструмента для этих групп риска.

    Основным ограничением этого исследования является тот факт, что оценка эффективности тестируемых комбинаций антигенов сравнивалась с оценкой QFN-G-IT, который не является золотым стандартом. Таким образом, на расчеты пороговых значений и, следовательно, на специфичность и чувствительность влияет результат, полученный с помощью QFN-G-IT.

    Еще многое предстоит сделать в области борьбы с туберкулезом и ведения больных, чтобы уменьшить бремя болезни. Диагностика туберкулезной инфекции, а также определение стадии являются ключевыми для этих задач; Однако существующих методов недостаточно. В этом исследовании мы представили доказательства того, что добавление EspC, EspF и (в меньшей степени) Rv2384-B к существующей комбинации ESAT-6, CFP-10 и TB7.