Разное

Клякса раскраска: Кукла ЛОЛ Splatters Клякса — Куклы LOL

Содержание

Увидеть солнце в кляксе. Как развивать творчество в детях

Творчество — это не только радость, но и обучение. Пока дети рисуют, лепят, сочиняют истории или музицируют, они развивают мышление. Психологи уверены, такие занятия помогают познавать себя и окружающий мир, замечать красоту и самостоятельно решать задачи. Выбрали книги, которые помогут найти творческое дело по душе: от «кляксотерапии» — до каллиграфии.

1. Начни рисовать

С этой книгой учился рисовать сам Эдвин Лутц — человек, благодаря которому появился волшебный мир Диснея, Микки Маус, Бэмби, 101 далматинец, Русалочка и Аладдин. Лутц предлагает разделить сложные объекты на простые формы, повторить которые сможет любой человек: и ребенок, и взрослый. Тренироваться можно прямо тут: каждый разворот — это пример и пустой лист, который зовет творить.

2. Когда солнце было кляксой

Раскрасить консервативного голубя, нарисовать шарф для жирафа, любящего спорт, или слона, занятого в шоу-бизнесе, — вот такие удивительные задания ждут вас в творческом блокноте «Когда солнце было кляксой».

Выполняя их, ребенок научится смешивать цвета, создавать любой оттенок и творчески мыслить. А ещё сможет выразить свои эмоции и повеселиться от всей души!

3. От листка к лепестку

Гирлянды из колокольчиков и пышные пионы. Закладки для книг и заколки для волос. Цветы-фейерверки и украшения для праздников. Все эти вещи можно создать из… бумаги! С помощью практического руководства по бумажной флористике, где есть всё — от пошаговых инструкций до шаблонов. Ваш ребенок научится превращать обычный лист в чистое вдохновение и красоту. Загляденье.

4. Основы каллиграфии и леттеринга

Каллиграфия и леттеринг захватывают мир. Красивые буквы и надписи — везде. На открытках, футболках и постерах. Так и хочется взять ручку и написать что-то потрясающее. В этой удобной книге-прописи на пружинке — азы каллиграфии и леттеринга и примеры красивых композиций. Тренироваться можно прямо в книге. Такое вот занятие для души, которое дарит небывалое умиротворение.

5. Буква к букве

Если каллиграфия — это ровные буковки, то леттеринг — чистое творчество. Тут не обязательно что-то идеально выводить. Живость, рукотворность и лёгкая кривизна — только в плюс. Книга Татьяны Чулюскиной — подробный самоучитель по леттерингу. Теория+практика. Выполнять задания можно прямо тут — в книге. Ребенок и сам не заметит, как от простых штрихов перейдет к сложным графическим композициям.

6. Стикеры для скетчинга от Анны Расторгуевой

Всем, у кого есть блокнот или скетчбук, понравятся наши стикеры. Нарисовала их популярный художник-иллюстратор Анна Расторгуева. Это целый набор — 80 наклеек с совами, цветами, марками, штампами, разделителями для страниц и шаблонами. Они добавят недостающих штрихов и превратят ваш скетчбук в законченное произведение. Попробуйте — это здорово.

Вконтакте

Facebook

Twitter

Рассказ Клякса — Носов Н.Н. Рассказы для детей.

Рассказ о том, как учительница остроумно отучила Федю Рыбкина смеяться на уроках. Мальчик измазался тушью, весь класс не мог на него смотреть без смеха. Это очень радовало Федю. Учительница, обнаружив причину веселья, сказала, что на месте чернил у него вскочат волдыри и язвочки. Мальчик испугался и еле досидел до перемены…

Рассказ Клякса читать

Я расскажу вам про Федю Рыбкина, о том, как он насмешил весь класс. У него была привычка смешить ребят. И ему было всё равно: перемена сейчас или урок. Так вот. Началось это с того, что Федя подрался с Гришей Копейкиным из-за флакончика туши. Только если сказать по правде, то никакой драки тут не было. Никто никого не бил. Они просто вырывали друг у друга из рук флакончик, а тушь из него выплеснулась, и одна капля попала Феде на лоб. От этого на лбу у него получилась чёрная клякса величиной с пятак.


Сначала Федя рассердился, а потом он увидел, что ребята смеются, глядя на его кляксу, и решил, что это даже лучше. И не стал смывать кляксу.

Скоро зазвонил звонок, пришла Зинаида Ивановна, и начался урок. Все ребята оглядывались на Федю и потихоньку смеялись над его кляксой. Феде очень нравилось, что он одним своим видом может смешить ребят. Он нарочно сунул палец в флакончик и измазал нос тушью. Тут уж никто без смеха не мог на него смотреть. В классе стало шумно.

Зинаида Ивановна сначала никак не могла понять, в чём дело, но скоро заметила Федину кляксу и даже остановилась от удивления.

– Это чем ты лицо испачкал, тушью?– спросила она.

– Ага,– кивнул головой Федя.

– А какой тушью? Этой? Зинаида Ивановна показала на флакончик, который стоял на парте.

– Этой,– подтвердил Федя, и рот его разъехался чуть ли не до ушей.

Зинаида Ивановна надела на нос очки и с серьёзным видом осмотрела чёрные пятна на лице Феди, после чего сокрушённо покачала головой.

– Напрасно ты это сделал, напрасно!– сказала она.

– А что?– забеспокоился Федя.

– Да, видишь ли, тушь эта химическая, ядовитая.

Она разъедает кожу. От этого кожа сперва начинает чесаться, потом на ней выскакивают волдыри, а потом уже по всему лицу идут лишаи и язвочки.

Федя перепугался. Лицо у него вытянулось, рот сам собою открылся.

– Я больше не буду мазаться тушью,– пролепетал он.

– Да уж думаю, что больше не будешь!– усмехнулась Зинаида Ивановна и продолжала урок.

Федя поскорей принялся стирать пятна туши носовым платком, потом повернул своё испуганное лицо к Грише Копейкину и спросил:

– Есть?

– Есть,– шёпотом сказал Гриша. Федя снова принялся тереть лицо, тер и платком и промокашкой, но чёрные пятна глубоко въелись в кожу и не стирались. Гриша протянул Феде ластик и сказал:

– На вот. У меня есть замечательная резинка. Потри, попробуй. Если она тебе не поможет, то пиши пропало.

Федя принялся тереть лицо Гришиной резинкой, но и это не помогло. Тогда он решил сбегать умыться и поднял руку. Но Зинаида Ивановна, будто нарочно, не замечала его. Он — то вставал, то садился, то приподнимался на цыпочки, стараясь вытянуть руку как можно выше.

Наконец Зинаида Ивановна спросила, что ему нужно.

– Разрешите мне пойти умыться,– попросил жалобным голосом Федя.

– А что, уже чешется лицо?

– Нет,– замялся Федя.– Кажется, ещё не чешется.

– Ну, тогда посиди. На переменке успеешь умыться.

Федя сел на место и снова принялся тереть лицо промокашкой.

– Чешется?– озабоченно спрашивал Гриша.

– Нет, кажется, не чешется… Нет, кажется, чешется. Не разберу, чешется или не чешется. Кажется, уже чешется! Ну-ка, посмотри, нет ещё волдырей?

– Волдырей ещё нет, а вокруг уже всё покраснело,– шёпотом сказал Гриша.

– Покраснело?– испугался Федя.– Отчего же покраснело? Может быть, уже волдыри начинаются или язвочки?

Федя снова стал поднимать руку и просить Зинаиду Ивановну отпустить его умыться.

– Чешется!– хныкал он.

Теперь ему было не до смеха. А Зинаида Ивановна говорила:

– Ничего. Пусть почешется. Зато в другой раз не станешь мазать лицо чем попало.

Федя сидел как на иголках и всё время хватался за лицо руками. Ему стало казаться, что лицо на самом деле стало чесаться, а на месте пятен уже начинают вздуваться шишки.

– Ты лучше не три,– посоветовал ему Гриша.

Наконец прозвонил звонок. Федя первым выскочил из класса и во всю прыть побежал к умывальнику. Там он всю перемену тёр лицо мылом, а весь класс над ним потешался. Наконец он начисто оттёр пятна туши и целую неделю после этого ходил серьёзным. Всё ждал, что на лице волдыри вскочат. Но волдыри так и не вскочили, а за эту неделю Федя даже разучился на уроках смеяться. Теперь смеётся только на переменках, да и то не всегда.

(Илл. В.Канивца)

Простой способ раскрасить объект в Иллюстраторе. Подробный видео урок.

В прошлом уроке мы рисовали контур гитары по фотографии, а сейчас раскрасим его. Если рисовать вручную цветные пятна под контуром, это займет много времени, кроме того, в некоторых местах возможна неровность, при использовании автоматического инструмента делается это одним нажатием кнопки. В этом уроке я расскажу, как раскрасить векторное изображение в Adobe Illustrator CC вручную и автоматически.

Раскрашивание вручную

Для ручного метода подойдет инструмент «Кисть-клякса«, который можно сочетать с «Карандашом«, чтобы дорисовывать более мелкие детали. Иногда заливка может выходить за контуры, поэтому, периодически это нужно подправлять «Ластиком». Мой графический планшет позволяет стирать лишнее обратной стороной пера.

Ручной способ раскрашивания, требует большой внимательности и много времени. Лучше его применять лишь в крайних ситуациях, когда не срабатывает автоматический.

Раскрашивание объекта автоматическим способом

Но есть более легкий способ заливки цветом. Выделите весь рисунок и возьмите инструмент «Быстрая заливка«. Этот инструмент, распознает пространство ограниченное контурами и заливает его выбранным цветом. Выберите нужный цвет и наведите мышкой, контур области подсвечивается.

Если этого не происходит, значит есть слишком большой зазор между контурами, желательно перед раскраской все их замкнуть. Теперь, достаточно нажать по областям, которые вы хотите раскрасить.

Выделяйте только те области, цвет между которыми должен быть разный.

Например, струны и лады накладываются поверх рисунка и не разграничивают цвета, поэтому я снял с них выделение.

Инструмент «Быстрая заливка» действует как эффект. Поэтому, после завершения раскрашивания рисунок необходимо еще раз «Разобрать…» на объекты. А затем несколько раз разгруппировать.

Теперь можно выставить правильные цвета из палитры или взяв образец «Пипеткой» с фотографии.

Добавление теней, бликов и дополнительных деталей.

Иногда может потребоваться разграничить заливку еще на несколько цветов, например, для создания теней и бликов или дополнительных деталей. Рисуем карандашом новую фигуру, как показано на снимке ниже, выделяем обе.

Берем инструмент «Создание фигур» и удерживая клавишу ALT нажимаем по лишней области. Теперь, новый элемент можно перекрасить в другой цвет.

А вот и готовый векторный рисунок гитары, теперь его можно использовать в макете или продать на микростоке.

Подробнее о раскрашивании в видео уроке:


Пишите в комментариях, получилось ли у вас сделать векторный рисунок или возникли трудности.

(Visited 17 210 times, 1 visits today)

BLOT Mini Gel Coloring Pen, Взрослые цветные гелевые ручки, Набор многоцветных гелевых ручек — ручки с блестками, неоновые ручки, пастельные ручки для раскрашивания, 24 гелевых ручки разных цветов

  • Включает: 6 — неоновые гелевые ручки 0,8 мм, 9 — Пастельные гелевые ручки 1,0 мм, гелевые ручки с блестками 9 — 1,0 мм; Прочный пластиковый кейс идеально подходит для удобного путешествия и хранения.
  • Калейдоскоп из 24 чернил разных цветов обязательно выделит ваше письмо. Идеально подходит для письма на темной бумаге, раскрашивания, поделок и многого другого …
  • Тонкие наконечники (0,8–1,0 мм) обеспечивают более быстрый поток чернил и максимально гладкое письмо, создавая идеальную ширину линий как для мелких деталей, так и для заполнения более широких областей цвета при повседневном письме и творческих проектах.
  • 100% нетоксичный, бескислотный, экологически чистый. Каждая цветная гелевая ручка BLOT содержит на 70% больше чернил, с более толстыми чернильными стержнями по сравнению с другими.
  • Набор мини-гелевых ручек BLOT 24 цвета отлично подходит для пулевых журналов, набросков, интеллект-карт, составления списков, раскраски или просто для того, чтобы проявить свою индивидуальность, используя для повседневных письменных задач !.
Размер: 24 CT Комплект включает: 6 х 0,8 мм неоновые гелевые ручки Пастельные гелевые ручки 9 x 1,0 мм Гелевые ручки с блестками 9 x 1,0 мм Прочный пластиковый футляр для удобства путешествий и хранения Преимущества продукта: ★ Набор мини-гелевых ручек для раскрашивания включает в себя 24 ручки — с блестками, пастельными и неоновыми чернилами. прекрасное дополнение к вашим поделкам. ★ Различные варианты ширины наконечника шариковой ручки 0,8 мм и 1,0 мм, удовлетворяют различные потребности в окраске. ★ на 70% больше красочных чернил в каждой жидкой гелевой ручке, гарантия в 2 раза дольше.★ 100% нетоксичный, не содержащий кислоты, экологически чистый, безопасный для использования в повседневной жизни. ★ Идеально подходит для тех, кто любит раскраски, графику, рисование и создает новые творческие поделки для отдыха и отдых. Мини-цветные гелевые ручки BLOT — Яркие, быстросохнущие гелевые чернила различных ярких оттенков и различных стилей — пастель, неон и глиттер могут динамично выделяться и проявляться там, где нет других ручек. Яркие чернила плавно течет, так что вы можете оживить любые заметки, дневник, скрапбукинг, ремесленные проекты, открытки, приглашения или книжка-раскраска!

Какие маркеры лучше всего подходят для раскраски для взрослых? — ColorIt

Если вы любите раскраски для взрослых так же сильно, как и мы, то наверняка знаете, что работать с маркерами — мечта.

Маркеры уникальны тем, что благодаря ярким пигментам и возможностям смешивания они заставляют иллюстрации выделяться на странице.

Есть только одна крошечная ошибка: не все маркеры созданы равными.

Есть маркеры, которые плохо сочетаются, а хорошие могут быть довольно дорогими.

Мы знаем, что тестирование каждого бренда может быть сложной задачей, поэтому мы взяли один для сообщества взрослых раскраски и рассмотрели лучшие маркеры для вас!

Мы искали все выше и ниже, просматривали и читали многочисленные обзоры и сообщения в блогах, чтобы понять, что колористы хотят от идеального маркера.

Результат?

Исчерпывающий список с разбивкой на 9 ведущих брендов на рынке сегодня. В нем обсуждаются их плюсы, минусы и все, что между ними.

Какой маркер оказался на голову выше остальных? Вот краткий обзор того, как работал каждый маркер:

МАРКА ПРОФИ Минусы КУПИТЬ У AMAZON

Copic

— отличное смешивание

-нежные оттенки

— цвета очень удобные

— двойной наконечник (щетка и долото)

— наконечник щетки универсальный

— эргономичный ствол

— дорого

— ограниченная палитра в наборе (12 шт. )

— чехол не удобный

ColorIt

— отличное смешивание

— цвета очень удобные

— в комплекте удобный кейс

— доступная цена

— много цветового разнообразия

— двойной наконечник (долото и тонкий)

— эргономичный ствол

— Может просочиться через раскраски

PrismaColor

— отличное смешивание

— яркие пигменты

— цвета легко собираются

— в удобном для путешествий футляре

— эргономичный ствол

— дорого

— неограниченная палитра в наборе

-Может просачиваться через раскраски

Охуху

— доступный

— большое разнообразие

— светлые оттенки можно смешивать

— двойной наконечник (долото и тонкий)

— дорожный чемодан некачественный

— маркеры неудобно лежат в руке

— пигмент жидкий

— неоднородное смешивание с более темными оттенками

Faber-Castell

— упаковка премиум-класса

— прекрасно лежит в руке

— использует индийские чернила, устойчивые к кровотечениям, водонепроницаемые, не имеющие запаха и светостойкие.

— дорого

— только один наконечник

— может повредить бумагу при наложении слишком большого количества слоев

Бьяньо

— доступный

— большое разнообразие

— двойной наконечник (долото и тонкий)

— дорожный чемодан некачественный

— маркеры неудобно лежат в руке

— множество оттенков, близких к двойным

— штриховка неоднородная, неровная

— много оперения

Могила

— яркие пигменты

— двойной наконечник (кисть и тонкий)

— кончик кисти универсальный

— минимальное кровотечение и без запаха

— дорого

— ограниченная палитра в наборе

— использует технику смешивания на водной основе, может повредить раскраски

— больше подходит для каллиграфии и букв

Sharpie

— доступный

— яркие пигменты

— одинарное перо

— страницы могут выходить за пределы страниц

— сильный запах маркера

— не очень смешивается

— перо не универсальное

Crayola

— доступный

— большое разнообразие

— минимальное кровотечение

— нетоксичный

— плохо смешивается

-может повредить бумагу

— не подходит для тонкой штриховки

— неудобное перо

Прежде чем мы углубимся в обзоры, давайте кратко рассмотрим, как мы проводили тестирование.

После тщательного отбора мы выбрали 9 лучших брендов на рынке сегодня. Что интересно, у нас есть как высокие, так и средние и недорогие бренды, а также смесь маркеров на спиртовой и водной основе.

Затем мы каталогизировали физические характеристики каждого маркера, убедившись, что они эргономичны и просты в использовании.

Мы проверили перья и вид мазков, которые они наносили, перед тем, как выбрать образец каждого маркера, чтобы проверить согласованность их цветов.

Затем мы проверили их возможности наращивания, постепенно добавляя один слой цвета поверх другого, чтобы увидеть, можно ли создавать разные оттенки с помощью одного маркера. Этот тест также показал нам, насколько маркеры просачивались сквозь бумагу, сколько было растушевок и повредили ли они бумагу в процессе.

Мы также провели тест на размытие, в котором маркерами наносили мазки на черный фломастер. Таким образом, вы будете знать, какие маркеры лучше всего подходят для раскраски вашей иллюстрации.

Самым важным и интересным тестом, конечно же, был тест на смешение. Мы взяли от двух до трех цветов маркеров каждой марки и провели полевой день, смешивая их вместе. Мы сделали смелые прямые мазки, а также круглые, чтобы проверить их универсальность. Мы также отметили плавность перехода цвета и качество пигментов при смешивании. Излишне говорить, что этот тест был нашим любимым, поскольку он показал потенциал и возможности каждого маркера.

Для получения наилучших результатов для всех тестов мы использовали плотную бумагу художественного качества.Мы также раскрасили мандалу с помощью маркеров из этого списка, чтобы вы могли видеть их различия и сходства бок о бок. Обратите внимание, что мы не включили Copic в эту мандалу, поскольку у нас был установлен только оттенок кожи для этого конкретного бренда.

Обратите внимание, что помимо производительности, мы также учитывали цену и упаковку каждой марки.

Теперь, когда мы разобрались с этим, давайте перейдем к самой интересной части: обзорам!

Давайте начнем с большого оружия. ..или, в данном случае, самое большое имя в раскраске маркеров: Copic.

Эти маркеры, по-видимому, работают как шарм, и убежденные поклонники утверждают, что они гладкие, простые в использовании и очень, очень, очень хорошо растушевываются. Они также стоят небольшого состояния, поэтому возникает вопрос: стоит ли тратить на эти качества ваши сбережения?

Первоначальные результаты

Для этого обзора мы использовали набор тонов кожи из 12 маркеров Copic Ciao. Эти двусторонние маркеры на спиртовой основе можно купить в Интернете по цене около 55 долларов за комплект.Да, мы тоже слышим, как ваше сердце разбивается от цены. Наши точно сделали.

Для сравнения: 12 маркеров Copic равны 72 маркерам Bianyo.

Позвольте этому немного осознать.

Маркеры поставляются в красивом и прочном акриловом корпусе, который сделает их уютным местом на вашем столе. Однако они не очень удобны для путешествий, так как могут сломаться и не закрыться надежно.

Посмотрев на маркеры, вы увидите, что это обычные круглые стволы. Вы получаете два наконечника: на одном конце есть наконечник кисти, а на другом — наконечник с долотом, что сильно отличается от других двусторонних маркеров в этом списке. Посмотрев на ствол, вы увидите, что есть метки, указывающие, какой наконечник какой. Цветовые коды также можно найти на корпусе маркера.

Пакет оттенков кожи состоит из теплых тонов, таких как бежевый, персиковый и коричневый. Очевидно, что он довольно ограничен, и если вы хотите иметь больше, вам придется инвестировать в набор из 36 или 72 предметов (что составляет примерно несколько долларов меньше 200 долларов).

Что делает все несколько лучше, так это то, что эти маркеры действительно многоразовые. Они дорогие, но если вы можете себе их позволить, маркеры Copic могут стать своего рода вложением.

Чернила и приложения

Давайте просто избавимся от этого: копики работают как мечта, и они создают прекрасные образцы.

Большинство оттенков в этой палитре — это заниженные оттенки кожи, поэтому они явно не являются ярким или ярким разнообразием, но что в них хорошего, так это то, что они чрезвычайно удобны. Это означает, что вы действительно можете увидеть разницу между каждым слоем. В его формуле есть что-то, что заставляет их высыхать быстрее при нанесении, поэтому каждый штрих дает нужное количество пигмента. Создается впечатление, что маркер хочет, чтобы вы медленно, но верно добились желаемого оттенка. Поскольку он очень хорошо складывается, вы можете использовать один и тот же маркер для создания разных оттенков и можете смешивать и сочетать цветовые комбинации по своему желанию.

Он также не растекается через бумагу до нескольких слоев, а растушевка минимальна.

Растушевка, особенно при использовании кончика кисти, великолепна. Эти восторженные отзывы фанатов? Они не преувеличивают. В то время как долотообразное острие работает нормально, волшебство творится только кончиком кисти. Благодаря этому цвета плавно переходят воедино. Им легко управлять с нужной степенью твердости: это не так уж непросто, чтобы вы не смогли его контролировать, но не слишком жесткое, чтобы ограничивать вашу гибкость.

В комплекте также идет бесцветный блендер, который является отличным дополнением к этому набору.

Наш вердикт

Давайте будем честными: критиковать Copic за его способность раскрашивать — все равно что критиковать Мерил Стрип за ее способность действовать. Маркеры действительно хороши во многих аспектах, особенно в смешивании.

Пожалуй, единственный минус этих маркеров Copic — это их цена. Это безумно дорого.

Готовы ли вы потратить 200 долларов на полный набор маркеров? Хотя эти маркеры фантастичны и с ними приятно работать, не все могут позволить себе такую ​​высокую цену.Их внушительный ценник рассчитан на профессиональных колористов и опытных энтузиастов. Вы всегда можете медленно покупать по одному маркеру за раз, что может занять очень много времени и совсем не весело.

А пока мы думаем, что имеет смысл присмотреться к другим более доступным брендам, которые работают так же хорошо, и вам не придется грабить.

Не секрет, что компания ColorIt гордится своей продукцией. Будучи пионерами в области раскраски для взрослых премиум-класса, мы разработали красящие материалы, специально созданные для удовлетворения потребностей сообщества взрослых раскраски.У нас есть обычные и блестящие гелевые ручки, цветные карандаши и, конечно же, набор маркеров премиум-класса, которые, кажется, нравятся нашим клиентам … если наши постоянные 5-звездочные рейтинги на Amazon являются показателем.

Тем не менее, мы хотим взглянуть на наши маркеры с точки зрения потребителя, поэтому мы ставим перед собой цели и тестируем наши продукты вместе с другими. Вот что мы наблюдали:

Первоначальные результаты

Во-первых, набор ColorIt с 50 маркерами поставляется в комплекте с дорожным чемоданом.В отличие от большинства других марок маркеров в этом списке, это единственный набор, который поставляется с красивым и прочным дорожным футляром. Кейс позволяет носить маркеры с собой или класть их горизонтально, чтобы они прослужили дольше. Они великолепны, будь вы в дороге или дома.

Эти маркеры на спиртовой основе, двусторонние, имеют как долото, так и острие. Цветовые коды и названия цветов отображаются на концах колпачков маркеров. Крышки закрываются надежно, чтобы вы случайно не открыли их.

Маркеры имеют мягкую треугольную форму, чтобы они не скатывались с поверхностей. Вы могли подумать, что ими будет сложно пользоваться, но на самом деле они довольно эргономичны и совсем не кажутся громоздкими в руке.

В наборе много ярких оттенков, но нет ничего слишком яркого или флуоресцентного. Думайте об этом как о преимущественно пастельной палитре с добавлением сплошных и темных цветов. Есть хороший выбор серых и нейтральных, а также холодных зеленых и синих оттенков. Выбор цветов хорошо сбалансирован, поэтому вы не получите слишком много одного и того же оттенка.Эти маркеры также являются открытыми, что означает, что вам не нужно покупать весь набор, если один или два маркера иссякнут.

Чернила и приложения

К наконечнику долота нужно немного привыкнуть, особенно если вы хотите равномерно покрыть много места. Тонкий наконечник отлично работает и действительно позволяет вам работать над деталями каждой иллюстрации.

Маркеры также источают сильный запах — что довольно часто встречается среди других маркеров на спиртовой основе.

Вот одна вещь, которая нам беззастенчиво нравится в наших маркерах: их способность к смешиванию превосходна для их ценовой категории.При цене всего 49,99 доллара это один из самых доступных маркеров в этом списке, но то, как сочетаются цвета, наводит на мысль, что вы используете премиальный набор.

Пигмент имеет великолепную консистенцию, поэтому штрихи выглядят плавно и ровно на странице. Их смешивание дает красивую матовую поверхность, поэтому переходы выглядят хорошо, даже если вы используете более темные оттенки.

Маркеры лучше всего работают «мокрый по мокрому». Вы определенно можете наращивать цвета — вы можете начать с действительно приглушенных тонов и добавить больше слоев, чтобы получить более темный оттенок.Цвета выглядят почти так же после 5-го слоя, но растушевка на удивление сведена к минимуму.

Что замечательно, они не повреждают бумагу даже при добавлении нескольких слоев. Эти маркеры просачиваются сквозь бумагу, поэтому при раскрашивании обязательно используйте промокательную страницу.

Наш вердикт

Если вы хотите получить максимальную отдачу от вложенных средств, ColorIt — ваш выбор. Очевидно, что набор из 50 маркеров менее разнообразен, чем, скажем, набор из 72 или 80 предметов, но недостаток в количестве компенсирует качество — большое время.

При относительно доступной цене вы уже можете получить набор маркеров, дающих отличные результаты, а также дорожный чемодан, который позволяет брать маркеры с собой куда угодно. У него лучшее соотношение цены и качества из всех рассмотренных нами брендов. Цвета очень удобны, а результаты смешивания аналогичны высококачественным маркерам в этом списке. Единственная разница в том, что вы не разоритесь, когда получите их.

Когда мы составляли этот список, мы постарались включить в него различные бренды высокого, среднего и низкого уровня. Prismacolor определенно находится в верхнем конце спектра предметов искусства. Бренд известен своими цветными карандашами, но их маркеры также широко используются в художественном сообществе, поэтому мы подумали: «Эй, давайте проверим их!

Эти маркеры на спиртовой основе, одноразовые и имеют двойные наконечники: один заканчивается кисточкой, а другой — тонким. Для этого обзора мы получили набор из 24 предметов, который доступен по цене около 50 долларов. Очевидно, что 24 маркера не предлагают такого же разнообразия, как набор из 50 или 100 предметов.Что лучше: ограниченный набор маркеров премиум-класса или лучше купить более дешевый бренд с большим количеством цветов?

Вот что мы узнали:

Первоначальные результаты

Маркеры Prismacolor поставляются в черном футляре с мягкой подкладкой, который даже на первый взгляд кажется «профессиональным». Помимо ColorIt, это единственный бренд, у которого есть дорожный чемодан, который нас действительно впечатлил. Маркеры также лежат горизонтально на корпусе, что очень удобно, если вы хотите продлить срок их службы.

Большая часть палитры состоит из ярких основных цветов, таких как красный мак (PB-13) и зеленый травяной (PB-165). При этом не ожидайте найти в этом наборе много третичных цветов. Приглушенные или легкие нейтральные тона также ограничены, если не отсутствуют вовсе.

У маркеров черный корпус, приятный на ощупь матовый. Они определенно шире и плотнее, чем Crayolas или Tombows (которые мы рассмотрим ниже), но захват по-прежнему потрясающий.

Как упоминалось ранее, маркеры двусторонние.Вы можете определить, какой конец какой, посмотрев на корпус: прямая линия рядом с кончиком указывает на острие с тонким концом, а волнистая линия, вьющаяся вокруг другого конца, указывает на острие кисти. На колпачке также указан цвет и цветовой код каждого маркера. Он закрывается с приятным щелчком, что означает, что он не откроется или не откроется случайно.

Чернила и приложения

Вот два слова, которые лучше всего описывают маркеры Prismacolor: плотные пигменты.

Цвета яркие и насыщенные и более или менее соответствуют этикетке на конце каждой крышки.Они сильно кровоточат и имеют сильный запах, но при этом сохнут быстрее, чем большинство маркеров в этом списке.

Тонкий наконечник, красивый и прочный, дает четкие и точные линии. Вы не чувствуете, как он сжимается или размазывается под давлением вашей руки. Наконечник кисти очень универсален и обладает необходимой подачей. Он достаточно гибкий, чтобы делать нежные штрихи, но при этом не слишком мягкий. Вы можете использовать кисть, чтобы покрыть как большие площади, так и мелкие детали.

Пожалуй, самое лучшее в маркерах Prismacolor — это то, что они также хорошо смешиваются.Хотя большинство цветов яркие и плотные, их смешение по-прежнему превосходно. Цвета плавно переходят от одного оттенка к другому. Пока вы наносите ровные штрихи, полосатость не будет проблемой.

Вы тоже можете создавать цвета; добавление одного слоя за другим делает цвет более ярким, не повреждая бумагу.

Наш вердикт

С учетом всего вышесказанного самое лучшее в маркерах Prismacolor — это то, что их цвета яркие и яркие без ущерба для смешиваемости.Обратной стороной является то, что в этом наборе не было большого разнообразия цветов.

Поскольку это профессиональные маркеры премиум-класса, их высокая цена тоже может быть проблемой. Если вы хотите иметь больше маркеров, будьте готовы потратить больше. Из-за своей пигментации маркеры также могут быть довольно кровоточащими, поэтому используйте только высококачественную бумагу при использовании этих маркеров.

Если вы регулярно смотрите художественные каналы и влоги (как это делаем мы), то заметите, что бренд Ohuhu часто рекламируется как доступная альтернатива Copic.Эти маркеры довольно дешевы — всего 40 долларов за набор из 80 предметов. Действительно ли они лучше Copics? Наше тестирование показало обратное.

Первоначальные результаты

Маркеры Ohuhu, по цене примерно 50 центов за маркер, являются, пожалуй, самыми дешевыми маркерами на спиртовой основе в этом списке.

Внешний вид и упаковка очень похожи на маркеры Bianyo (см. Ниже по списку). Их футляр сделан из хрупкого материала, из-за которого маркеры сбиваются в кучу.Разложите маркеры внутри сумки? К сожалению, не из приятных впечатлений.

Ствол маркера — это нечто среднее между круглым стволом и квадратным угловатым стволом. Он более плоский, с более мягкими краями, но и не полностью круглый. Нам было неудобно лежать в руке, особенно при использовании наконечника стамески.

Это маркер с двумя наконечниками, и вы можете определить, где находится тонкий конец, по серой полосе рядом с ним.

Цветовые коды и этикетки находятся на верхней части каждой крышки.Забавно то, что коды произвольные — некоторые маркеры имеют буквенно-цифровые коды, а другие просто помечены цифрами. Вы не можете сделать никаких выводов по этим кодам, а цвет на крышке не соответствует фактическому цвету маркера, поэтому лучше предварительно их поменять.

В этом наборе было много зеленых оттенков, а также флуоресцентные маркеры, которые могут служить маркерами. При просмотре образцов мы заметили, что в этом наборе много почти дублированных, таких как маркеры 52 и 54 (темно-зеленый и виридиановый, соответственно).Цвета настолько похожи, что их трудно различить даже после свотча.

Судя по внешнему виду, они совсем не похожи на копиков. Может сходство кроется в приложении? Давайте посмотрим.

Чернила и приложения

К сожалению, маркеры Ohuhu — хит и промах, когда дело доходит до применения.

С одной стороны, смешать более светлые и более прохладные оттенки проще простого. Если вы используете правильную комбинацию, вы получите более или менее плавный и ровный переход, что довольно впечатляет, учитывая, что Ohuhu находится на нижнем конце ценового диапазона.Это действительно хорошо работает при использовании оттенков кожи и холодного приглушенного синего или персикового цветов.

Однако смешивание более темных оттенков — это совсем другая история. Если более светлые оттенки смешиваются плавно, более темные будут неоднородными. Мы думаем, что это, возможно, связано с единообразием маркеров. Хотя цветовой результат великолепен, консистенция самого пигмента немного жидкая. Также требуется немного больше времени для высыхания. Использование их на раскраске привело к смазыванию линий, чего не происходило с другими маркерами в этом списке.

Наш вердикт

При использовании с правильной цветовой комбинацией маркеры Ohuhu хорошо смешиваются. Если вы знаете, что делаете, с этим маркером действительно можно добиться достойных, даже отличных результатов. Просто жаль, что их упаковка не так хороша, как характеристики маркеров (на этикетке упаковки написано «Сделано в Чиане» вместо «Китай», что разочаровало как минимум в трех разных категориях).

Действительно ли они обманщики Copic? Они, конечно, хороши, но сравнивать их с маркерами Copic — дело своего рода.

Faber-Castell, один из старейших мировых брендов товаров для искусства, всегда ассоциировался с материалами премиум-класса. Особой популярностью пользуются их ручки для художников PITT. В этих ручках используются чернила — водостойкий, светостойкий материал без запаха. Могут ли эти ручки быть идеальными инструментами для раскрашивания?

Первоначальные результаты

Упаковка сама по себе кричит ультра-премиум: маркеры поставляются в роскошной оливковой коробке, которая закрывается на магнитную заслонку. Откройте их, и вы увидите ручки PITT, расположенные по оттенкам, с приветственной вставкой.Скажем откровенно, это простое решение придает дополнительную привлекательность общему внешнему виду и впечатлениям от продукта.

У нас есть набор из 24 ручек, который сделан из хорошей подборки цветов. Он имеет большое разнообразие вторичных и третичных цветов, а также оттенков кожи и серого.

Важно отметить, что ручки PITT выпускаются с различными наконечниками. Вы можете увидеть тип наконечника, указанный в верхней части каждой крышки. В нашем случае кончики кистей обозначаются буквой «B» на колпачках, но существуют и другие типы наконечников.

Ручки, а не маркеры, они меньше и тоньше, чем большинство красящих материалов, представленных в этом списке. Еще одна вещь, которая отличает их, заключается в том, что в этих ручках используются индийские чернила, которые являются водонепроницаемыми, не пропускают кровь и не имеют запаха. Это звучит как несбыточная мечта, но после нескольких тестов мы обнаружили, что эти утверждения полностью соответствуют действительности.

Чернила и приложения

Индийские чернила созданы на основе пигментов, поэтому обладают уникальными свойствами. Когда мы дошли до тестирования, мы обнаружили, что он действительно не растекается, не кровоточит и не имеет неприятного запаха.

Кроме того, чернила также водонепроницаемы и являются одними из самых богатых в этом списке, особенно когда они еще влажные. Кисть плавно скользит по бумаге, создавая ощущение традиционного искусства.

Более темные цвета кажутся сплошными и насыщенными, но при высыхании они становятся более приглушенными. Тем не менее, нейтральные цвета и свет кажутся неоднородными при первом запуске, поэтому убедитесь, что дополнительные штрихи нанесены равномерно. Нам не понравился оттенок слоновой кости, который на самом деле казался более желтым, чем белый или бежевый.

Мы обнаружили, что цвета лучше всего смешиваются, когда они наносятся мокрым по мокрому. Этот метод дает отличные результаты с точки зрения цвета, но поскольку пигмент остается наверху страницы, а не поглощается бумагой, это может привести к ее повреждению.

При этом мы заметили, что ручки сохнут не так быстро, как спиртовые маркеры, особенно если вы используете их на глянцевой бумаге, такой как та, которую мы использовали во время тестирования. В данном случае они очень похожи на маркеры на водной основе, но немного лучше растушевываются.

Наш вердикт

Ручки Faber-Castell PITT, несомненно, премиальные по цене и внешнему виду, действительно для серьезных художников. Цвета красивые и насыщенные, но поскольку они сохнут не так быстро, как маркеры на спиртовой основе, они могут повредить вашу бумагу, если вы не будете достаточно осторожны. Они предназначены для иллюстраций и рисунков, сделанных на более плотной бумаге.

Эти ручки, как и любые другие премиум-класса, стоят тоже дорого.

В общем, ручки для художников PITT — это здорово, если вы знаете, как ими пользоваться, но мы не рекомендуем их начинающим колористам.

Компания Bianyo занимается производством художественных принадлежностей, таких как маркеры, ручки и кисти, с 2007 года, и стремится поставлять качественные художественные материалы по более низкой цене. Как они конкурируют с другими марками из этого списка?

Первоначальные результаты

При цене всего около 40 долларов за набор из 72 маркеров, Bianyo является одним из самых дешевых маркеров на спиртовой основе в этом обзоре, уступая только своему кузену Охуху.

Эти маркеры на спиртовой основе, одноразовые, двусторонние, с долотом и острием.В этом наборе большое разнообразие и распределение цветов, включая широкий спектр теплых оттенков кожи, нейтральных и серых, а также бесцветный блендер.

В нашем наборе было много желтых оттенков, которые мы поначалу считали фломастерами. Не волнуйтесь — изучив образцы, мы поняли, что это не дубликаты, но они действительно очень похожи друг на друга. Это заставляет задуматься: получается ли у вас одинаковая комбинация цветов или у вас есть разные варианты для каждого набора?

Маркеры поставляются в черном дорожном футляре, который, честно говоря, не очень впечатляет в плане футляров.Как мы упоминали в обзоре Ohuhu выше, сумка хрупкая и плохо удерживает маркеры. Если вы вытащите из сумки связку маркеров, остальные маркеры просто упадут друг на друга. Разложить эти маркеры внутри сумки — непростая задача. Было бы лучше, если бы сумка была более структурной.

Глядя на сами маркеры, можно заметить, что они сделаны из глянцевого пластика. Что-то более матовое придало бы им более профессиональный вид. С другой стороны, кончики маркеров легко распознать, поскольку индикаторы наконечников напечатаны на корпусе маркера. Вы также можете увидеть черное кольцо вокруг тонкого наконечника. Цветовые коды в конце каждой крышки маркера также легко понять (WG для теплых оттенков серого, CG для холодных оттенков серого и т. Д.).

Маркеры имеют квадратный ствол, предназначенный для предотвращения их скатывания с поверхности. Хотя эта форма имеет свои преимущества, она также затрудняет захват, особенно при использовании наконечника долота под углом.

Чернила и приложения

После нанесения мы обнаружили, что тонкий наконечник красив и прочен.Пигмент не такой привлекательный, как мы ожидали, но он сохранил свои свойства. Просто убедитесь, что вы выбрали их заранее: цвета становятся ярче при первом нанесении и могут выглядеть иначе и более приглушенными, когда они высохнут.

Как упоминалось выше, в этой связке было много желтых маркеров, настолько много, что в итоге мы получили множество почти идентичных оттенков. Это обычная проблема, когда у вас много маркеров. На самом деле вы можете просто создать два-три оттенка с помощью одного и того же маркера, вместо того, чтобы нуждаться в другом. Но опять же, если вам нравятся теплые тона, развлекайтесь!

Маркеры не кровоточат, и это здорово. Просто по мере того, как вы добавляете больше слоев, цвета становятся менее удобными. В этом случае 4-й слой выглядит примерно так же, как 6-й. Смешивание довольно среднее. Это не так гладко, как хотелось бы, и переходы от одного оттенка к другому иногда могут казаться неоднородными.

Мы также обнаружили много растушевок по краям штрихов. Маркеры сохнут не так быстро, как другие марки в этом списке, поэтому обязательно подождите пару секунд, прежде чем добавлять еще один слой, чтобы предотвратить повреждение вашей бумаги и добиться наилучших результатов.

Наш вердикт

В заключение, мы считаем, что маркеры Bianyo довольно средние. Лучшее в них — доступная цена и разнообразие цветов. Кроме того, они не сильно нас ослепили. Нам показалось, что квадратный ствол неудобен, особенно если вы используете долото и делаете круговые движения. Они определенно могли бы сделать лучше с точки зрения упаковки, особенно с их дорожным чемоданом.

Ручки-кисточки

Tombow часто используются для каллиграфии и надписей, но говорят, что их можно использовать и для раскрашивания.Чем отличаются эти ручки на водной основе от своих аналогов на спиртовой основе?

Первоначальные результаты

Ручки-кисточки Tombow имеют водную основу и имеют двойной наконечник: на одном конце есть наконечник-кисть, а на другом — острие с тонким наконечником. Для этого обзора у нас есть упаковка «Brights», набор из десяти ручек-кистей, в основном состоящих из основных и дополнительных цветов.

Ручки-кисточки длиннее и тоньше, чем маркеры на спиртовой основе, вероятно, потому, что они созданы для каллиграфии.Глядя на корпус пера, вы увидите цветные метки и цветовые коды. Колпачок также соответствует цвету ручки. Конец щетки имеет больший колпачок, поэтому нетрудно понять, какой конец какой.

Чернила и приложения

Ручки приятные и легкие в руке. Мы ожидали, что кончик кисти будет мягким и податливым, как и у других маркеров с кисточкой, но, к нашему удивлению, он оказался более твердым. Это преимущество, поскольку позволяет лучше контролировать перо.

Поскольку эти ручки созданы на водной основе, вы можете ожидать немного полосатости от этих ручек.К счастью, они восполняют это, создавая красивые однотонные цвета. Вы определенно можете построить их, но, как всегда с маркерами на водной основе, вы должны дать несколько секунд, чтобы слой высох, прежде чем добавлять еще один, чтобы предотвратить повреждение бумаги.

При растушевке важно помнить, что ручки-кисточки на водной основе не работают так же, как маркеры на спиртовой основе.

Чтобы смешать эти цвета вместе, вы должны использовать другие техники и инструменты. Одним из таких инструментов является бесцветный блендер, входящий в комплект маркеров.Мы думаем, что это хорошее дополнение к палитре, поскольку оно позволяет создавать более приглушенные эффекты градиента. Это требует некоторой практики, но работать с этим очень весело.

Другой способ растушевки Tombows — использовать влажную кисть. Вы также можете окунуть кисти в воду или прикоснуться к более светлому кончику кисти более темным, чтобы создать красивый эффект омбре. При этом окраска может быть не лучшим вариантом применения этих ручек-кистей. Надгробие лучше всего работает с водой, поэтому вам понадобится более толстая бумага, предпочтительно бумага для акварели, чтобы действительно повеселиться.

Наш вердикт

В целом, эти ручки выглядят, удобны и отлично работают. У него отличный пигмент и общее качество. Дело в том, что они могут не подходить для взрослых раскраски. Скорее всего, они испортят ваши раскраски. Эти ручки лучше всего использовать для каллиграфии и рисования акварелью, поэтому сохраните их для подобных художественных проектов. Для окрашивания лучше использовать маркеры на спиртовой основе.

На протяжении многих лет маркеры Sharpies были синонимом перманентных маркеров.Мы используем их для маркировки чего угодно — от коробок для переездов до школьных проектов и контейнеров с китайской едой. Мы знаем, что они работают, но можно ли их использовать с книжками-раскрасками для взрослых? Давай выясним.

Первоначальные результаты

Для этого обзора мы получили пакет Colorburst, который представляет собой набор из 24 маркеров. Набор в основном состоит из основных цветов, а также некоторых третичных оттенков. Также в набор добавлен один серый и коричневый маркер. Как и Crayola Supertips (рассмотренные ниже), эти маркеры являются односторонними, но могут наносить как узкие, так и толстые штрихи, в зависимости от того, как вы их наклоняете.

Как вы уже догадались, Sharpies основаны на алкоголе и являются постоянными. Спорим, вы могли это сказать по характерному запаху алкогольного маркера и этикетке «перманентный маркер», гордо напечатанной вдоль ствола.

Маркеры поставляются в стандартной картонной и пластиковой упаковке. Вы не можете использовать его для хранения маркеров, поэтому убедитесь, что у вас есть под рукой контейнер или чемодан.

Колпачки указывают цвета маркеров, которые более или менее соответствуют фактическому пигменту.Они также закрываются красиво и плотно.

Чернила и приложения

Sharpies известны своими яркими цветами, и это ясно показали, когда мы провели наши тесты. Маркеры сильно пигментированы; они сильно кровоточат и умеренно растушевываются, поэтому всегда используйте промокательную страницу при использовании этих маркеров. Цвета несколько изменяемы, но вы не увидите большой разницы в последних двух слоях.

Перо твердое и жесткое — отлично подходит для маркировки и письма, но, возможно, слишком сложно для окраски.Он недостаточно универсален для смешивания. В определенной степени они действительно работают, но чаще всего результаты были неоднородными, особенно если вам нужно покрыть много места.

Вы наверняка можете получить плоский и матовый эффект, но если вам нужно плавное затенение, в этом списке есть более подходящие маркеры.

Наш вердикт

Самое замечательное в маркере Sharpie заключается в том, что он никогда не выцветает легко и относительно дешев. Обратной стороной является то, что они не так изысканны, когда дело доходит до смешивания, и их аромат такой сильный.В заключение мы советуем придерживаться метки Sharpie, когда вам нужно пометить такие вещи, как движущиеся коробки, но оставьте окраску лучшим маркерам.

Любой, кто когда-либо раскрашивал в детстве, знает зелено-желтую коробку Crayola где угодно. Хотя бренд наиболее популярен благодаря своим мелкам, Crayola также производит множество школьных принадлежностей и принадлежностей для творчества, предназначенных для детей. Эти принадлежности включают художественную бумагу, цветные карандаши и, конечно же, маркеры.

Маркеры Crayola, как и все остальные, нетоксичны, что делает их совершенно безопасными для детей.Эти маркеры также на водной основе, поэтому их легко смыть. Вопрос в том, могут ли взрослые тоже использовать их для раскрашивания … и повеселиться?

Вот что мы узнали:

Первоначальные результаты

Для этого обзора мы взяли набор маркеров Supertips на 100 штук, который стоил довольно дешево и стоил чуть меньше 12 долларов. Как и то, что мы упоминали ранее, все маркеры в этом наборе на водной основе, моющиеся и нетоксичные. Они также одноразовые и одноразовые.

Набор маркеров Crayola поставляется в стандартной картонной коробке.Он поместится в любом рабочем столе или кабинете, но это определенно не то, что вы можете взять с собой в поездки. Беглый взгляд внутрь коробки показывает, что маркеры примерно распределены по оттенку. Преимущественно у нас было много зеленых оттенков, но также были разные теплые, холодные и нейтральные тона, что было довольно впечатляюще для детской марки.


Маркеры более тонкие, чем обычные цветные маркеры, вероятно, потому, что они созданы для детей. Колпачки окрашены в соответствии с фактическим цветом маркеров.

Глядя на корпус, вы увидите марку, но не название цвета или код. Для сотни маркеров разных оттенков это может стать головной болью. Вы можете заранее их скопировать или наклеить для удобства свои собственные этикетки. Когда вы раскрашиваете, тоже будет полезно держать под рукой бумагу для заметок.

Маркеры Crayola имеют одинарный наконечник — он начинается широким и сужается к тонкому концу. Наклон маркера под углом 45 градусов создает толстые штрихи, а использование кончика под углом около 90 градусов создает тонкие линии.

Чернила и приложения

Теперь о приложении!

Дело в том, что маркеры на водной основе сохнут гораздо медленнее, чем маркеры на спиртовой основе. Это означает, что они склонны к образованию полос и их трудно смешать. Вам нужно будет нанести примерно 2-3 слоя, чтобы получить ровный результат. В лучшем случае вы получите солидный результат, который отлично подходит, если вы хотите что-то мультяшное или китчевое. Однако, если вам нужны изящные переходы и переходы, лучше поменять эти маркеры на водной основе на маркеры на спиртовой основе.

Вы также должны быть осторожны при укладке штрихов. Маркеры на водной основе не растекаются и не пачкаются так сильно, как маркеры на спиртовой основе, но они повреждают бумагу, чем больше вы добавляете слоев. Во время тестирования мы заметили небольшое повреждение бумаги вокруг 4-го слоя, поэтому лучше подождать, пока цвета маркера высохнут, прежде чем наносить следующий слой.

Еще одна проблема, связанная с этими маркерами, — это их наконечники. Хотя у нас не было никаких проблем с использованием обычных тонких наконечников, наклонять маркеры для получения широких мазков в руке было неудобно.

С другой стороны, наличие сотни маркеров означает, что вы получаете большое разнообразие по очень доступной цене. Вы получаете широкий спектр холодных оттенков, а также теплые, приглушенные тона кожи и нейтральные оттенки, которые часто встречаются в детских фломастерах.

Наш вердикт

В целом, набор Crayola Supertips предлагает широкий выбор цветов и оттенков по очень доступной цене. Включенные промежуточные и нейтральные оттенки составляют очень интересную и разнообразную палитру.

Опять же, он на водной основе, что означает, что он не предлагает многого с точки зрения смешиваемости и многослойности, двух качеств, которые вам необходимы, если вы хотите вывести свое искусство на новый уровень. Получите набор, если вы новичок или раскрашиваете с детьми, но если вы хотите поднять свою раскраску на ступеньку выше, самое время поиграть, оставьте этот набор с детьми и приобретите себе некоторые взрослые инструменты для раскрашивания, такие как спиртосодержащие маркеры.

Итак, вот и все: подробное и, надеюсь, полезное изложение лучших маркеров для раскрашивания взрослых.

После всех тщательных испытаний и оценок мы можем сказать, что маркеры ColorIt имеют лучшее соотношение цены и качества из всех маркеров в этом списке.

Не поймите нас неправильно — премиальные маркеры, такие как Copic и Prismacolor, показали себя очень хорошо и прошли отлично, но вы должны признать: у них действительно крутые — и болезненные — цены.

Более дешевые маркеры на спиртовой основе в этом списке, такие как Bianyo и Ohuhu, имели хорошие характеристики, но их идентичные дорожные футляры и неудобные стволы просто не подходили.

Наконец, упомянутые в этом списке ручки на водной и пигментной основе были созданы для каллиграфии (Tombow), рисования (Faber-Castell) или для детей (Crayola).

Учитывая все обстоятельства, маркеры ColorIt отметили все флажки. Они отлично сочетаются, они доступны по цене и специально разработаны для окрашивания взрослых.

Считаете ли вы этот обзор полезным? Оставьте комментарий ниже и расскажите нам, что вы думаете!

Ink Blot Фотографии, вдохновленные исследованием цвета и движения с балетными танцорами и пудрой

Когда фотографу Яне Крудер было поручено сфотографировать балет Aspen Santa Fe Ballet, она ухватилась за возможность сделать что-то другое — что-то, что, по ее мнению, лучше могло бы выразить «эмоцию и искусство движения», свидетелем которых она стала, когда увидела их выступление.

Это что-то оказалось обильным количеством цветного кукурузного крахмала.

Изначально эксперимент был вдохновлен выступлением балета Aspen Santa Fe Ballet, которое она попросила посмотреть перед съемкой. «Как артисту важно видеть, на что способны танцоры и как они двигаются», — сказала она нам по электронной почте. «Я знал, что это вдохновит меня на столько идей».

И что он сделал. Увидев, как они занимаются своим искусством, она говорит, что «была тронута тем, как эти молодые художники выражали себя и как звук и цвет формировали мои эмоции.Она сразу же была вдохновлена ​​на организацию фотосессии, во время которой она «рисовала цветом, а они рисовали движением своих тел в прекрасном унисон».

Превращению общей идеи в конкретную фотосессию помог арт-директор Мэтью Минидис, который первоначально предложил им изучить идею чернильных пятен Роршаха .

Мэтью предложил изучить чернильные пятна Роршаха, и эта концепция родилась.

Изучая чернильные кляксы, я решил подражать и воссоздать прекрасное исследование в симметрии только с человеческой формой и цветом. Я и танцоры исполнили несколько симметричных произведений, вдохновленных чернильными пятнами, а затем мы вместе дали волю нашему воображению.

Посмотрите на прекрасные результаты:

Конечно, это были не только радуги из кукурузного крахмала, но и проблемы. «Стрельба из пороха оказалась сложной задачей, но не только технически, — объясняет она в своем блоге.

И синхронизация движений с падающим порошком, и очистка от проклятых вещей из ее оборудования в конечном итоге вызвали некоторые головные боли, но головные боли, которые, в конце концов, того стоили.

Чтобы увидеть больше из этой серии или любых других работ Крудер, обязательно посетите ее веб-сайт и блог или подпишитесь на нее в Facebook, Instagram или Twitter.

(через Laughing Squid)


Изображение предоставлено : Фотографии Яны Крудер использованы с разрешения

Хемилюминесцентный вестерн-блоттинг | Thermo Fisher Scientific

Хемилюминесцентное обнаружение для вестерн-блоттинга популярно, потому что оно предлагает несколько преимуществ по сравнению с другими методами обнаружения.Использование хемилюминесценции позволяет делать несколько экспозиций, что позволяет оптимизировать соотношение сигнал / шум. Реагенты обнаружения могут быть удалены, и весь блот может быть повторно зондирован для визуализации другого белка или для оптимизации обнаружения первого белка. Большой линейный диапазон отклика позволяет обнаруживать и количественно определять широкий диапазон концентраций белка. Что наиболее важно, хемилюминесценция обеспечивает наибольшую потенциальную чувствительность из всех доступных методов обнаружения вестерн-блоттинга. Эти преимущества позволили хемилюминесценции стать предпочтительным методом обнаружения в большинстве белковых лабораторий.

Изучите хемилюминесцентные субстраты Протокол хемилюминесцентного вестерн-блоттинга Скачать техническое руководство по хемилюминесцентному вестерн-блоттингу



Вступление

Вестерн-блоттинг — это мощный метод, позволяющий косвенно определять образцы белков, иммобилизованных на нитроцеллюлозных или поливинилиденфторидных мембранах (ПВДФ). При обычном вестерн-блоттинге образцы белка сначала разделяют электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE), а затем электрофоретически переносят на мембрану. После стадии блокировки мембрану исследуют первичным антителом, которое было индуцировано против рассматриваемого антигена. После последующей стадии промывки мембрану инкубируют с конъюгированным вторичным антителом, которое реагирует с первичным антителом. Двумя наиболее распространенными ферментами, конъюгированными со вторичными антителами, являются пероксидаза хрена (HRP) и щелочная фосфатаза (AP).Эти ферменты катализируют химическую реакцию для генерации записываемого сигнала в виде света.

Щелкните изображение, чтобы увеличить

Обнаружение хемилюминесцентного вестерн-блоттинга.

Хемилюминесцентные субстраты для HRP и AP отличаются от других субстратов тем, что обнаруживаемый свет является временным продуктом реакции, который присутствует только во время реакции фермент-субстрат. Это контрастирует с хромогенными субстратами, которые производят стабильный окрашенный продукт; эти окрашенные осадки остаются на мембране после завершения реакции фермент-субстрат.На хемилюминесцентном вестерн-блоте субстрат является лимитирующим реагентом в реакции; по мере того, как субстрат истощается, светоотдача уменьшается и в конечном итоге прекращается. Хорошо оптимизированная процедура с использованием правильных разведений антител обеспечит стабильный световой поток в течение нескольких часов, что позволит стабильно и точно определять белки.

Хемилюминесцентные методы обнаружения вестерн-блоттинга

Выбор субстрата для хемилюминесцентного вестерн-блоттинга определяется выбранным репортерным ферментом.В частности, реагенты на основе люминола и акридана представляют собой хемилюминесцентные субстраты HRP. Для хемилюминесцентного обнаружения АР доступны субстраты на основе акридана и 1,2-диоксетана.

Хемилюминесцентная реакция субстрата HRP-люминола. Хемилюминесценция — это свойство химических реакций, в результате которых в качестве побочного продукта выделяется свет. Люминол — один из наиболее широко используемых хемилюминесцентных реагентов. Окисление люминола пероксидом приводит к образованию продукта в возбужденном состоянии, называемого 3-аминофталатом. Этот продукт распадается до состояния с более низкой энергией, испуская фотоны света.

Хемилюминесцентная реакция субстрата АР — CDP-Star. CDP-Star дефосфорилируется AP с образованием метастабильного промежуточного аниона диоксетана фенолята, который разлагается и излучает свет с максимальной интенсивностью на длине волны 475 нм. Излучение света происходит только во время реакции фермент-субстрат.

Субстраты HRP (пероксидаза хрена) Субстраты АР (щелочная фосфатаза)
Чувствительность Чувствительность фемограммы Чувствительность пикограммы
Генерация сигнала Немедленно Постепенно увеличивается с максимумом сигнала ~ 30-60 минут
Длительность сигнала До 24 часов 24-96 часов
Рекомендации Совместим с распространенными буферами, такими как TBS и PBS Не совместим с фосфатными буферами
Когда использовать Антитела или зонды, конъюгированные с HRP Антитела или зонды, конъюгированные с AP

Пероксидаза хрена (HRP) катализирует окисление субстратов перекисью водорода, в результате чего образуется окрашенный или флуоресцентный продукт, а в качестве побочного продукта реакции выделяется свет. HRP оптимально функционирует при pH, близком к нейтральному, и может подавляться цианидами, сульфидами и азидами. Конъюгаты антитело-HRP превосходят конъюгаты антитело-AP в отношении специфической активности как фермента, так и антитела. Кроме того, его высокая скорость оборота, хорошая стабильность, низкая стоимость и широкая доступность субстратов делают HRP предпочтительным ферментом для большинства приложений. Из-за относительно небольшого размера фермента HRP дальнейшее повышение чувствительности может быть достигнуто за счет использования вторичных антител, конъюгированных с поли-HRP, и может устранить необходимость использования систем амплификации типа ABC для некоторых исследователей.Щелочная фосфатаза (ЩФ) катализирует гидролиз фосфатных групп из молекулы субстрата, приводя к окрашенному или флуоресцентному продукту и высвобождению света в качестве побочного продукта реакции. AP обладает оптимальной ферментативной активностью при щелочном pH (pH 8–10) и может подавляться цианидами, арсенатом, неорганическим фосфатом и хелаторами двухвалентных катионов, такими как EDTA. В качестве метки для вестерн-блоттинга AP предлагает явное преимущество перед другими ферментами. Поскольку скорость реакции остается линейной, чувствительность обнаружения можно повысить, просто позволив реакции протекать в течение более длительного периода времени.

Поскольку HRP — самый популярный фермент, используемый в вестерн-блоттинге, он будет обсуждаться в этой статье в качестве нашего примера. Доступно несколько разновидностей хемилюминесцентных HRP-субстратов Thermo Scientific Pierce ECL и SuperSignal, которые обеспечивают разные уровни чувствительности для хемилюминесцентного вестерн-блоттинга. Обратитесь к Таблице 1, чтобы определить наиболее подходящий хемилюминесцентный субстрат HRP на основе количества интересующего целевого белка, количества образца, содержащего целевой белок, а также уровня чувствительности и типа инструментов, доступных для обнаружения.В таблице также приведены характеристики обычно используемых хемилюминесцентных субстратов с улучшенной хемилюминесценцией (ECL) и SuperSignal.

Хемилюминесцентные субстраты для HRP обычно представляют собой двухкомпонентные системы, состоящие из стабильного раствора пероксида и улучшенного раствора субстрата, часто на основе люминола. В большинстве случаев для приготовления рабочего раствора смешиваются равные объемы двух компонентов. При инкубации с блотом, на котором связаны антитела, конъюгированные с HRP (или другие зонды), происходит химическая реакция, излучающая свет с длиной волны 425 нм, который можно уловить с помощью рентгеновских пленок и устройств визуализации на ПЗС-камерах, которые обнаруживают хемилюминесценцию.Хотя рентгеновская пленка обеспечивает качественные и полуколичественные данные и полезна для подтверждения присутствия целевых белков, тепловизоры на основе охлаждаемых ПЗС-камер предлагают преимущества количественного анализа, быстрого сбора данных, более высокой чувствительности, большего разрешения и большего динамического диапазона, чем фильм.

Таблица 1.
Хемилюминесцентные субстраты Thermo Scientific HRP.
Подложка Pierce ECL Подложка Pierce ECL Plus Подложка SuperSignal West Pico PLUS Подложка SuperSignal West Dura Подложка SuperSignal West Femto Подложка SuperSignal West Atto
Уровень обнаружения Низкая и средняя пикограмма Низкая пикограмма От низкой пикограммы к высокой фемтограмме Средняя фемтограмма От нижней до средней фемтограммы Низкая фемтограмма — высокая аттограмма
Длительность сигнала 0.5–2 часа 5 часов 6–24 часа 24 часа 8 часов 6 часов
Методы обнаружения Рентгеновская пленка, ПЗС-камера Рентгеновская пленка, ПЗС-матрица, флуоресцентная визуализация Рентгеновская пленка, ПЗС-камера Рентгеновская пленка, ПЗС-камера Рентгеновская пленка, ПЗС-камера Рентгеновская пленка, ПЗС-камера
Рекомендуемое разведение первичных антител * 1: 1,000 1: 1,000 1: 1,000 1: 5 000 1: 5 000 1: 5 000
Рекомендуемое вторичное разведение антител * 1: 25 000 — 1: 200 000 1: 1000 — 1: 15 000 1: 20 000 — 1: 100 000 1: 50 000 — 1: 250 000 1: 100 000 — 1: 500 000 1: 100 000 — 1: 250 000
Выберите, когда. .. … мишень и проба много … мишени меньше, количество проб ограничено, и вам нужно хемифлуоресцентное обнаружение … мишени меньше, количество образцов ограничено, и вам нужна более высокая чувствительность, чем обеспечивает ECL субстрат начального уровня. … цель менее многочисленна, выборка ограничена, и вы используете захват изображения CCD … мишени меньше всего, образец ценен, а вам нужна максимальная чувствительность… мишень меньше всего, образец точный, а вам нужна максимальная чувствительность
Ценность для вас Низкая стоимость; простой переход с других подложек ECL начального уровня Максимальная гибкость обнаружения с опцией хемифлуоресцентного обнаружения Лучшее соотношение цены и качества; работает для большинства вестерн-блотов Лучшая длительность сигнала Хорошая чувствительность при оптимальных условиях Максимальная чувствительность при меньшей необходимости оптимизации
* На основе концентрации антител 1 мг / мл

Световой поток, генерируемый во время хемилюминесцентной реакции с люминолом, относительно недолговечен; поэтому были разработаны субстраты с улучшенной хемилюминесцентностью (ECL). Например, использование усилителя с люминолом увеличивает чувствительность сигнала, интенсивность и продолжительность реакции фермент-субстрат. Субстрат Pierce ECL подходит для вестерн-блоттинга, в которых исследуются обильные белки или где эксперимент был оптимизирован. Однако были разработаны субстраты, обеспечивающие высокочувствительное обнаружение белков. Например, хемилюминесцентный субстрат SuperSignal West Pico PLUS позволяет обнаруживать белок на уровне от пикограмм до фемтограмм с помощью вестерн-блоттинга.

Подробнее: Обнаружение белков с низким содержанием в вестерн-блоттинге
Подробнее: Руководство по выбору хемилюминесцентных субстратов

Технические соображения

Разведение антител

Одним из наиболее важных технических факторов вестерн-блоттинга является оптимизация разведения антител. На желаемое разведение антител могут влиять многие факторы, включая объем доступного антитела, специфичность антитела к антигену, изобилие белка и выбор доступных субстратов. Кроме того, отдельные лабораторные протоколы могут направлять исследователей к предпочтительным, ранее оптимизированным условиям. Оптимизация антител — важный шаг для обеспечения надлежащего отношения сигнал / шум. Первичное антитело, которое специфично к антигену-мишени, связывается с доступными сайтами эпитопа на белке. После серии промывок, которые помогают удалить несвязанное первичное антитело, вторичное антитело, конъюгированное с ферментом, таким как HRP, инкубируется и связывается с первичным антителом.Множественные вторичные антитела могут связываться с одним первичным антителом, что приводит к процессу амплификации, в результате чего большее количество светопродуцирующих меток может реагировать и производить более детектируемый сигнал. Слишком много первичных или вторичных антител может вызвать перенасыщение блота или чрезмерный фоновый шум. Кроме того, слишком много антител может привести к быстрому формированию сигнала с последующей деградацией — сигнал может быстро исчезнуть, прежде чем его можно будет зафиксировать на пленке или с помощью системы визуализации. Эти проблемы крайне затрудняют надлежащий анализ и выводы из эксперимента.Приведенная ниже таблица может помочь предоставить общее руководство по разведениям антител в зависимости от целевого белка или количества образца, условий антител и выбранного субстрата. Также важно отметить, что при переходе с одного субстрата на другой может потребоваться повторная оптимизация разведений антител в соответствии с рекомендациями производителя.

Рекомендации по разведению антител
Условия
Образец Антиген Антитело Рекомендуемый субстрат Первичная Среднее Особенности
Образец обильный Антиген в изобилии Качество антител хорошее SuperSignal West Pico PLUS 1: 1K 1: 100 К
Образец обильный Антиген в изобилии неизвестен Качество антител неизвестно SuperSignal West Pico PLUS 1: 1K 1: 100 К Если полосы не видны, блот можно промыть и повторно визуализировать с помощью Atto
Образец обильный Низкое содержание антигена Низкое качество антител Подложка SuperSignal West Atto 1: 1K 1: 100 К
Образец обильный Низкое содержание антигена Качество антител хорошее Подложка SuperSignal West Atto 1: 2K 1: 250 К Предполагается, что обычное основное использование составляет 1: 1K
Образец обильный Низкое содержание антигена Количество антител ограничено Подложка SuperSignal West Atto 1: 5K 1: 100 К Предполагается, что обычное основное использование составляет 1: 1K
Образец обильный Антиген в изобилии Количество антител ограничено Подложка SuperSignal West Atto 1: 20 К 1: 250 К Предполагается, что обычное основное использование составляет 1: 1K
Образец ограничен Антиген в изобилии Качество антител хорошее SuperSignal West Pico PLUS 1: 1K 1: 100 К В качестве альтернативы можно было бы загружать меньше и использовать Atto при тех же концентрациях антител
Образец ограничен Обилие антигена неизвестно Качество антител неизвестно SuperSignal West Pico PLUS 1: 1K 1: 100 К Если полосы не видны, блот можно промыть и повторно визуализировать с помощью Atto
Образец ограничен Низкое содержание антигена Качество антител хорошее Подложка SuperSignal West Atto 1: 1K 1: 250 К
Образец ограничен Низкое содержание антигена Низкое качество антител Подложка SuperSignal West Atto 1: 1K 1: 100 К
* На основе концентрации антител 1 мг / мл

Захват сигнала

Вестерн-блоттинг — мощное рутинное приложение; однако захват хемилюминесцентного сигнала может быть сложной задачей, поскольку вестерн-блоттинг включает в себя серию шагов, для выполнения которых требуются определенные навыки. Отсутствие захвата сигнала может быть вызвано многими факторами. При таком большом количестве переменных (, таблица 2, ) устранение неполадок в проблемной пятне можно сравнить с поиском «иголки в стоге сена». Традиционный протокол часто оказывается неэффективным при обнаружении конкретного белка. Поэтому для оптимизации результатов часто необходимы руководства по устранению неполадок. Для обзора факторов, влияющих на результаты вестерн-блоттинга, просмотрите Таблицу 2. Для получения информации об устранении неполадок вестерн-блоттинга посетите веб-сайт Western Blot — Troubleshooting.

Таблица 2. Факторы, влияющие на результаты вестерн-блоттинга.
Фактор Переменная характеристика Советы
Целевой антиген Конформация, стабильность, доступный эпитоп (ы)
Полиакриламидный гель Производитель, процент полиакриламида, возраст, лот Используйте гели Bis-Tris для белков с низким / средним обилием, гели Tris-глицина для белков с высоким содержанием белка, гели Tricine для белков с низким молекулярным весом и гели Tris-Acetate для белков с высоким молекулярным весом
Мембрана Производитель, тип, лот
Первичное антитело Специфичность, титр, сродство, время инкубации и температура Используйте антитела, утвержденные специально для вестерн-блоттинга
HRP конъюгат Уровень активации фермента и активность, исходное животное, концентрация, детергент
Буфер блокировки Тип, концентрация, перекрестная реактивность
Моет Буфер, объем, продолжительность, частота Используйте минимум 6 промывок по 5 минут перед добавлением субстрата для тщательного удаления несвязавшихся вторичных антител.
Подложка Чувствительность, производитель партия, возраст
Метод обнаружения Возраст пленки, производитель оборудования для визуализации, время экспозиции

Интенсивность и продолжительность сигнала

В оптимальных условиях вестерн-блоттинга хемилюминесцентный сигнал может длиться 6–24 часа.Уровень и продолжительность генерации света зависят от конкретного используемого субстрата и соотношения фермент-субстрат в системе. Хотя количество субстрата на блоте относительно постоянно, количество присутствующего фермента зависит от добавленного количества и других факторов (, таблица 2, ). Слишком большое количество ферментного конъюгата, нанесенного на систему вестерн-блоттинга, является одной из основных причин изменчивости сигнала, темного фона, короткой продолжительности сигнала и низкой чувствительности. Кривая излучения сигнала, которая медленно затухает (см. Рисунок ниже), желательна, поскольку она демонстрирует, что каждый компонент системы оптимизирован и позволяет воспроизводить результаты.Слишком быстро затухающий сигнал может вызвать изменчивость, низкую чувствительность, высокий фон и проблемы с документированием сигнала. Длительный сигнал сводит к минимуму вариабельность результатов из-за эффективности переноса, партий подложки от разных производителей и других факторов. Реакция окисления молекул HRP люминолом в субстрате приводит к образованию свободных радикалов в дополнение к производимому свету. Изобилие HRP в системе создаст изобилие свободных радикалов, увеличивая вероятность инактивации HRP.Свободные радикалы могут также повредить антиген, антитела и мембрану, что приведет к снижению эффективности повторного зондирования. На приведенном ниже рисунке показан пример кривых излучения сигнала, генерируемых для подложек с коротким и длительным сроком службы.

Сравнение кривых излучения сигналов для коротко- и долговременных подложек. Когда в системе вестерн-блоттинга присутствует фермент, выходной сигнал достигает максимума вскоре после нанесения субстрата и быстро истощает субстрат ( сигнал 1 ). В оптимальной системе пик излучения сигнала достигается примерно через 5 минут после нанесения субстрата и плато в течение нескольких часов ( Сигнал 2 ).

Прямые и косвенные методы

Для прямого обнаружения используются меченые первичные антитела.Поскольку инкубация с вторичным антителом исключается, эта стратегия занимает меньше времени, чем классический вестерн-блоттинг. Кроме того, устраняется фоновый сигнал перекрестной реактивности со вторичным антителом. Прямое обнаружение также позволяет зондировать несколько целей одновременно. Однако маркировка первичного антитела иногда отрицательно сказывается на его иммунореактивности и не допускает усиления сигнала. Поскольку прямой метод обычно менее чувствителен, чем косвенное обнаружение, он наиболее полезен, когда цель относительно многочисленна.Одним из вариантов является биотинилирование первичного антитела, который является непрямым методом, который усиливает сигнал и устраняет необходимость во вторичном антителе. Мечение реагентами для биотинилирования обычно приводит к более чем одному фрагменту биотина на молекулу антитела. Каждая биотиновая составляющая способна взаимодействовать с конъюгированным с ферментом авидином, стрептавидином или белком NeutrAvidin Thermo Scientific (каталожный номер 31000). По существу, биотин-связывающий конъюгат заменяет вторичное антитело, и его соответствующая молярная концентрация такая же, как если бы использовалось вторичное антитело.Небольшой размер реагентов для биотинилирования (обычно менее 2 кДа) по сравнению с ферментами (40 кДа для HRP; 140 кДа для AP) часто снижает стерические затруднения, обеспечивая большую функциональность меченого первичного антитела.

Прямое и непрямое обнаружение белка и усиление сигнала за счет образования комплекса авидин-биотин в анализе, включающем обнаружение с помощью специфических антител (например,г. , иммуноферментный анализ).

Дальневосточные методы

Иногда антитела к конкретному антигену недоступны или не подходят для вестерн-блоттинга. Специфическое для целевого белка обнаружение с помощью блоттинга возможно, если соответствующий связывающий партнер доступен для использования в качестве зонда. Этот тип приложения, называемый дальневосточным блоттингом, обычно используется для обнаружения или подтверждения взаимодействия белок-белок.Существует множество вариантов детекции вестерн-блоттингом, которые включают, но не ограничиваются, ранее упомянутыми стратегиями. При дальнем вестерн-блоттинге меченые партнеры по связыванию могут быть помечены реакцией трансляции in vitro с помощью 35S-меченного зонда. Также возможно биотинилирование зонда и обнаружение конъюгатом биотин-связывающего белка. Этот тип обнаружения имеет дополнительное преимущество в виде усиления сигнала. Однако при использовании этого метода нельзя перемаркировать зонд, чтобы не допустить нарушения обнаружения цели.Кроме того, рекомбинантный зонд может быть экспрессирован в бактериях с такой меткой, как GST, HA, c-Myc или FLAG, в которых обнаружение происходит с помощью меченого антитела к конкретной метке. Как и в случае с другими приложениями для блоттинга, метод дальнего Запада эффективен как для мембранных, так и для гелевых систем обнаружения. На диаграмме ниже показан рабочий процесс на дальнем западе.

Схема дальнего вестерн-блоттинга для анализа белок-белковых взаимодействий. В этом примере меченый белок приманки используется для зондирования переносящей мембраны или геля на предмет белка жертвы. После связывания антитело, конъюгированное с ферментом (пероксидаза хрена; HRP), которое нацелено на бирку-приманку, используется для обозначения взаимодействия, которое затем обнаруживается ферментативной хемилюминесценцией. Этот общий подход может быть скорректирован, как показано в таблице ниже, с использованием немаркированного белка приманки, который определяется антителом, биотинилированного белка приманки, который обнаруживается конъюгированным с ферментом стрептавидином, или меченного радиоактивным изотопом белка приманки, который обнаруживается при воздействии на пленку.

Подробнее: Анализ дальнего вестерн-блоттинга
Изучить: Набор для дальнего вестерн-блоттинга

Сбор данных

Сигнал хемилюминесцентного вестерн-блоттинга может быть захвачен с помощью рентгеновской пленки, устройств цифровой визуализации на основе камеры с зарядовой связью (ПЗС) и фосфорных изображений, которые обнаруживают хемилюминесценцию. Хотя рентгеновская пленка предоставляет качественные и полуколичественные данные и полезна для подтверждения присутствия целевых белков, приборы для визуализации на основе ПЗС-камеры предлагают преимущества качественного анализа, мгновенного захвата и анализа изображений, более высокой чувствительности, большего разрешения и большего динамический диапазон, чем у пленки. Кроме того, нет необходимости в выделенном темном помещении и оборудовании для проявки. Инструменты для визуализации можно разместить прямо на столе рядом с другим лабораторным оборудованием.

ПЗС-камеры для хемилюминесцентного захвата изображений
Преимущества Ограничения
Динамический диапазон> 4 порядков Длительные выдержки (> 60 минут) могут привести к усилению фона из-за шума камеры
Интеллектуальные алгоритмы помогают определить оптимальное время экспозиции
Оптимизированный анализ и хранение изображений
Мгновенная визуализация результатов
Количественный
Системы визуализации iBright имеют 9. ПЗС-камера с охлаждением 1 МП обеспечивает высокую чувствительность и динамический диапазон, помогая обнаруживать небольшие различия в образцах.

Часто необходимо экспонировать несколько пленок в разные периоды времени, чтобы получить правильный баланс между сигналом и фоном. Цель состоит в том, чтобы рассчитать время воздействия мембран на пленку так, чтобы желаемый сигнал был четко виден, а фон оставался низким.Это сложно выполнить, поскольку процесс нельзя наблюдать и остановить при достижении желаемой конечной точки. Если пленка не экспонируется достаточно долго (недоэкспонирована), сигнал не будет виден. Если пленка экспонируется слишком долго (передержанная), сигнал может потеряться на заднем плане или отдельные полосы могут стать размытыми вместе. Кроме того, оценка оптимального времени экспозиции очень субъективна, так как трудно визуально определить точную точку, в которой достигается наилучший баланс сигнала и шума. Часто выполняются многократные циклы экспонирования пленки и проявления пленки, что может потребовать значительных затрат времени. После того, как данные записаны на пленку, пленка часто сканируется для создания цифровой копии данных, которые затем экспортируются в программное обеспечение для анализа, чтобы облегчить дальнейший анализ, такой как денситометрия и оценка молекулярной массы.

Одним из самых больших преимуществ систем цифровой обработки изображений является возможность точной настройки времени экспозиции (некоторые системы предлагают возможность настройки времени экспозиции с точностью до тысячных долей секунды).Кроме того, многие системы предлагают особую настройку автоматической экспозиции, в которой используются алгоритмы, которые автоматически определяют оптимальное время экспозиции, что не только позволяет получить изображение с оптимальным соотношением сигнал / шум, но также экономит значительное количество времени по сравнению с часто необходимыми многократными экспозициями. с пленкой. Поскольку данные фиксируются в цифровом виде, их можно легко экспортировать в программное обеспечение для анализа (исключая этап сканирования с помощью пленки). Некоторые из самых современных систем предлагают возможность выполнять анализ непосредственно на приборе.Эти удобства делают цифровую обработку изображений популярной заменой захвата данных с пленки.

Подробнее: Рентгеновская пленка и инструменты для цифровой визуализации
Подробнее: Системы визуализации вестерн-блот

Маркеры молекулярной массы

Для обнаружения любого вестерн-блоттинга желательно использовать предварительно окрашенные маркеры молекулярной массы, которые переносятся на мембрану вместе с образцом белка.Появление маркеров молекулярной массы на мембране позволяет оценить молекулярные массы любых обнаруженных полос белка, а также эффективно разделить представляющие интерес белки в геле перед этапом переноса. Когда хемилюминесцентное обнаружение используется для вестерн-блоттинга, полосы белка обнаруживаются на пленке или с помощью оборудования для цифровой обработки изображений. Если не модифицированы, маркеры молекулярной массы не отображаются на пленке, поскольку они не производят световой поток. Для этого есть несколько решений, описанных ниже.

Предварительно окрашенная протеиновая лестница iBright содержит двенадцать рекомбинантных белков, десять (от 11 до 250 кДа), которые окрашены синим цветом и помечены флюором для прямой и ближней инфракрасной флуоресцентной визуализации и определения размера белков, и два (30 кДа и 80 кДа), которые неокрашены и содержат сайты связывания IgG для связывания первичных и вторичных антител, используемых для хемилюминесцентного и флуоресцентного обнаружения целевого белка.

Одним из решений является использование маркеров молекулярной массы, которые используют домены связывания антител из белка A или G. Домены захвата антител этих белков сконструированы в маркеры молекулярной массы и, таким образом, связываются с антителами, используемыми в вестерн-блоттинге, обеспечивая передачу сигнала должны быть сгенерированы и зафиксированы вместе с экспериментальными данными.Применение этих маркеров ограничено, поскольку различное сродство антител к протеинам A и G приводит к различным уровням сигнала. Многие антитела, такие как антитела подкласса мышиных IgG1, не связываются прочно с белком A или G. Другой популярный вариант — использовать маркеры молекулярной массы биотинилированного белка, которые позволяют использовать стрептавидин вместе с детектирующими антителами или когда биотинилированные первичные детектирующие антитела используются.

Изучить: лестницы белков вестерн-блоттинга

Рекомендуемое чтение

  1. г.Х. Торп, Л. Дж. Крика. (1986) Усиленные хемилюминесцентные реакции, катализируемые пероксидазой хрена. Методы в энзимологии 133: 331–54.
  2. Alegria-Schaffer, A., et al. (2009) Выполнение и оптимизация вестерн-блоттинга с упором на хемилюминесцентное обнаружение. Методы Enzymol 463: 573–99.
  3. Гассманн, М., Гранахер, Б., Роде, Б. и Фогель, Дж. (2009) Количественная оценка вестерн-блоттинга: подводные камни денситометрии. Электрофорез 30: 1845–55.

Дополнительные ресурсы

Кляксы для детей и малышей

Искусство рисования кляксами настолько просто, насколько это возможно, и самое замечательное то, что вся семья может принять участие.

Если вы можете промокнуть краску и сложить лист бумаги, у вас есть все, что нужно, чтобы сделать это произведение искусства, и возможности безграничны с точки зрения выбора краски и цвета бумаги.

Искусство, которое можно повесить в любом месте дома!

Если вы украсите свой дом произведениями искусства своего ребенка, он почувствует себя еще более его частью. Секрет успеха в том, чтобы проявить смелость и действовать! Дети смелы. Они повсюду вешают свои работы, и мы тоже должны!

Все, что вам нужно для этого занятия, — это прочная художественная бумага, краска и пластиковые ложки! Просто включите свое воображение и получайте удовольствие!

Что вам понадобится:

  • Строительная бумага
  • Краска
  • Ложки пластиковые

Шаг 1. Возьмите припасы

  • Выньте художественную бумагу, краску и пластиковые ложки.
  • Подготовьте покрасочную станцию. Залейте краску отдельного цвета в каждый лоток для краски. Положите старую газету и приготовьте влажную ткань для легкой уборки!
  • Сложите бумагу пополам.

Шаг 2. Добавьте краску

  • Попросите ребенка развернуть бумагу и положить ее ровно.
  • Помогите им взять совок краски и нанести каплю на правую сторону листа.
  • Возьмите ложку краски другого цвета и нанесите ее рядом с первым цветом.Повторите то же самое с 3-м цветом.
  • Ничего страшного, если цвета накладываются друг на друга, но старайтесь держать это подальше от края бумаги, чтобы он не брызгал сбоку!

Шаг 3. Нажмите и разгладьте

  • После того, как вы закончите рисовать на бумаге, сложите бумагу и помогите ребенку прижать ее руками.
  • Попросите их двигать руками вперед и назад, разглаживая бумагу.
  • Вы чувствуете, как краска растекается под вашими руками в бумаге?
  • Как вы думаете, что вы увидите, когда откроете бумагу?

Шаг 4: Покажите свои работы!

  • Разверните бумагу, чтобы раскрыть свое прекрасное творение.
  • Что ты видишь? Использовать свое воображение!
  • У вас больше цветов, чем когда вы начали? Откуда они пришли? (Подсказка: цвета смешиваются!)
Грег Стокдейл 3 мая 2015 г.